Ctrp15在制备促进血管新生改善缺血相关的心功能产品中的应用制造技术

本发明专利技术公开了Ctrp15在制备促进血管新生改善缺血相关的心功能产品中的应用。本发明专利技术提供了Ctrp15蛋白或其编码基因或以Ctrp15蛋白为活性成分的物质在如下至少一种中的应用；1）制备治疗心脏损伤的产品；2)制备减轻心脏损伤的产品；3)制备提高心脏损伤后心功能修复能力的产品。本发明专利技术通过对运动过程中Ctrp15是否对侧支血管新生进行调控及分子机制的研究，发现运动诱导骨骼肌分泌的Ctrp15蛋白可以改善心肌梗死后侧支血管新生最终促进心脏功能的修复。复。

【技术实现步骤摘要】
Ctrp15在制备促进血管新生改善缺血相关的心功能产品中的应用


[0001]本专利技术属于医药领域，具体涉及Ctrp15在制备促进血管新生改善缺血相关的心功能产品中的应用。

技术介绍

[0002]心肌梗死(myocardial infarction，MI)是由于冠脉的急性闭塞引起的心肌缺血缺氧死亡，是导致心衰以及死亡的主要原因。其中约1/3的患者在入院治疗时发现既往已存在陈旧性心梗并且具有较充分的侧支循环；并且有临床研究发现患者远期预后与侧支循环新生的程度明显相关，侧支循环建立充分的患者再灌注治疗60个月后心力衰竭发生率(3.1%vs11.6%)和死亡发生率(7.1%vs15.4%)显著低于不充分的患者。目前针对心肌梗死患者主要的治疗手段也是通过再灌注治疗恢复血供，尽管如此仍有大量患者因为未能及时手术或缺血再灌注损伤等导致心肌修复不良，出现心衰等并发症。一旦出现心衰，5年存活率仅为50%。因此亟需寻找内科药物干预靶点，通过改善心脏损伤后血管新生促进心功能的恢复。
[0003]侧支血管新生过程中内皮细胞的增殖、出芽是新血管侧支形成的关键细胞事件，在心脏损伤修复过程的微环境由浸润到心脏组织的中性粒、巨噬细胞以及大量的外分泌型因子(VEGF,PDGF,etc.)形成，分泌型因子介导着细胞以及组织间的相互调节作用。研究发现骨骼肌与心脏组织之间的内皮细胞状态具有高度的相似性，提示骨骼肌与心脏组织中具有较为相似的调节机制，而骨骼肌是机体运动的主要支撑器官且研究表明运动可以促进心脏中侧支血管新生，同时2020年欧洲心血管疾病杂志指南表明适量的运动有助于心血管疾病患者的愈后。
[0004]肌连蛋白Ctrp15是主要来源于骨骼肌组织的C1q/TNF相关蛋白(CTRP)分泌性家族中的一员，可参与调控脂代谢与免疫功能的。且已有研究提示在缺血再灌注模型中运动时骨骼肌来源的Ctrp15因子可明显抑制心肌细胞的凋亡以及炎症的浸润来起到保护心功能的作用；但是心肌细胞的死亡主要是由于缺乏血供所导致，所以关注在心肌梗死过程中侧支血管新生的建立调控至为关键。

技术实现思路

[0005]本专利技术一个目的是提供Ctrp15蛋白或其编码基因或以Ctrp15蛋白为活性成分的物质的用途。
[0006]本专利技术提供的Ctrp15蛋白或其编码基因或以Ctrp15蛋白为活性成分的物质在如下至少一种中的应用；1）制备治疗心脏损伤的产品；2) 制备减轻心脏损伤的产品；3) 制备提高心脏损伤后心功能修复能力的产品。
[0007]上述应用中，所述心脏损伤为心肌缺血导致的心脏损伤。
[0008]上述应用中，所述心肌缺血导致的心脏损伤为心梗导致的心脏损伤。
[0009]上述应用中，所述心脏损伤为陈旧性心肌梗塞，或慢性冠脉闭塞性病变，或急性心肌梗死，或急性冠脉综合征。
[0010]上述提高心脏损伤后心功能修复能力体现在促进血管侧支的形成和新生。
[0011]Ctrp15蛋白或基因作为标志物在制备评估或辅助评估待测者心脏损伤程度的产品中的应用也是本专利技术保护的范围。
[0012]检测Ctrp15蛋白含量或Ctrp15蛋白编码基因表达量的物质在制备评估或辅助评估待测者心脏损伤程度的产品中的应用也是本专利技术保护的范围。
[0013]使动物运动的物质在制备促进侧支血管新生动物模型中的应用也是本专利技术保护的范围。
[0014]本专利技术还提供了一种促进侧支血管新生动物模型的制备方法，包括如下步骤：动物运动后得到促进侧支血管新生动物模型。
[0015]上述应用中，所述检测Ctrp15蛋白含量的物质包括特异结合Ctrp15蛋白的抗体，在本专利技术的实施例中，该抗体包被在ELISA试剂盒（德国antibodies
‑
online GmbH；货号：Catalog No. ABIN6955638）中的孔板上。
[0016]上述应用中，所述心脏损伤为心肌缺血导致的心脏损伤。
[0017]上述应用中，所述心肌缺血导致的心脏损伤为心梗导致的心脏损伤。
[0018]上述应用中，所述心脏损伤为陈旧性心肌梗塞、慢性冠脉闭塞性病变、急性心肌梗死或急性冠脉综合征。
[0019]本专利技术通过对运动过程中Ctrp15是否对侧支血管新生进行调控及分子机制的研究，发现运动诱导骨骼肌分泌的Ctrp15蛋白可以改善心肌梗死后侧支血管新生最终促进心脏功能的修复。
附图说明
[0020]图1为运动促进心脏缺血缺氧损伤后的功能修复。
[0021]图2为运动促进心脏中血管侧支的增加。
[0022]图3为运动过程中骨骼肌显著高分泌Ctrp15。
[0023]图4为心脏缺血过程中Ctrp15的表达明显下降。
[0024]图5为补充蛋白过表达Ctrp15可有效减轻心脏损伤。
[0025]图6为敲除Ctrp15抑制血管侧支再生能力最终加重心脏缺血后损伤。
[0026]图7为心脏损伤患者血浆中Ctrp15表达水平较健康人较低。
具体实施方式
[0027]下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
[0028]下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
[0029]下述实施例中雄性野生型小鼠(C57BL/6)均购自北京华阜康生物科技股份有限公司，下面简称为野生鼠（WT鼠）。
[0030]实施例1、运动诱导骨骼肌分泌的Ctrp15蛋白
一、运动促进心脏缺血缺氧损伤后的功能修复选择WT野生鼠，利用游泳实验以及急性心肌梗死模型，统计心肌梗死模型后小鼠的生存率、心功能改变以及病理水平评估心脏重塑改变，明确运动对心脏的保护过程中对心肌梗死后侧支血管新生程度、心功能修复的影响。
[0031]（一）运动模型的构建游泳模拟运动：起始游泳10分钟每天并逐渐增加10分钟/天，直到50分钟/天后，每周6天进行运动，运动4周，得到运动模型小鼠。
[0032]（二）心肌梗死动物模型的构建根据目前报道的通用的结扎冠脉前降支方案MI术（冠脉结扎术）建立小鼠模型，以下手术过程均为无菌环境下操作：(1) 选取8
‑
10周龄、体重20
‑
22g的雄性WT小鼠（未运动）和上述（一）得到的运动模型小鼠（8
‑
10周龄、体重20
‑
22g的雄性，运动后）分别饲养于SPF级动物房中，在计划手术的前一天使用脱毛膏进行胸部脱毛、备皮；(2) 术中使用2%的异氟烷进行持续性吸入麻醉，待小鼠稳定后固定体位使用75%酒精进行消毒心前区局部皮肤；(3) 在持续性吸入麻药的条件下，使用手术剪在左胸开一个1.2cm左右的小口；(4) 使用手术镊钝性分离胸大肌和胸小肌，可见明显搏动的肋间隙，用弯血管钳穿破肋间隙，顺势轻柔挤出心脏；(5) 利用7号外科手术针线，方结结扎冠脉左前降支后，可见被结扎后远端的心肌迅速变为白色，剪线后速将心脏恢复原位紧接着将胸腔挤一下排空胸腔中气体本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.Ctrp15蛋白或其编码基因或以Ctrp15蛋白为活性成分的物质在如下至少一种中的应用；1）制备治疗心脏损伤的产品；2) 制备减轻心脏损伤的产品；3) 制备提高心脏损伤后心功能修复能力的产品。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述心脏损伤为心肌缺血导致的心脏损伤。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述心肌缺血导致的心脏损伤为心梗导致的心脏损伤。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述心脏损伤为陈旧性心肌梗塞、慢性冠脉闭塞性病变、急性心肌梗死或急性冠脉综合征。5.Ctrp15蛋白或基因作为标志物在制备评估或辅助评估待测者心脏损伤程度...

【专利技术属性】
技术研发人员：杜杰，乔博康，李玉琳，王媛，贾立昕，张聪聪，王春筱，
申请(专利权)人：北京市心肺血管疾病研究所，
类型：发明
国别省市：