新型铈介导的共组装多功能纳米酶(CHA@GOx)用于糖尿病创面治疗制造技术

糖尿病伤口具有极其复杂的高血糖、缺氧和高活性氧(ROS)微环境。因此，对这种微环境的调节和管理可能为糖尿病伤口愈合提供更新和改进的治疗方法。在此，我们开发了基于Ce驱动的特殊双配体(阿仑膦酸和二甲基咪唑)和葡萄糖氧化酶(GOx)共同组装的用于糖尿病伤口治疗的多功能纳米酶(CHA@GOx)。它不仅保护了GOx的活性，而且还具有超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)模拟活性，使其能够有效去除多余的葡萄糖和ROS。特别是可催化葡萄糖氧化反应而产生的过量过氧化氢(H2O2)进而产生氧气，调节创面氧平衡，降低GOx的毒副作用。此外，铈的纳米复合物还具有促进细胞增殖和迁移以及促血管生成的作用。通过体外实验表明，CHA@GOx有助于细胞迁移并促进细胞管的形成。在体内，它可以明显加速糖尿病小鼠的伤口愈合。总之，我们的研究表明，多功能纳米酶的共组装在糖尿病伤口的临床治疗中具有潜力。口的临床治疗中具有潜力。

【技术实现步骤摘要】
新型铈介导的共组装多功能纳米酶(CHA@GOx)用于糖尿病创面治疗


[0001]本专利技术涉及铈介导与酶共组装形成的多功能纳米酶的制备方法，具体地说，是涉及一种利用铈介导的双配体和葡萄糖氧化酶共组装形成多功能纳米酶材料的制备方法，并进一步用于糖尿病创面的治疗，属于纳米酶材料和再生医学领域。

技术介绍

[0002]糖尿病已成为威胁人类健康的主要疾病之一，每年都会造成大量的死亡,而最常见的糖尿病综合征是糖尿病性溃疡。这是一种慢性并发症，其特征是创面愈合极其缓慢。造成糖尿病创面难愈合的主要原因是它特殊的微环境，例如高糖，缺氧和高活性氧(ROS)水平。值得注意的是，这些不利因素并不是相互独立的。典型的，因为过多的葡萄糖氧化会增加氧气的消耗从而加重环境的缺氧，促进包括超氧化物自由基(
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O2
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),羟基自由基(
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OH)和过氧化氢(H2O2)等ROS的产生。在这种情况下，皮肤相关的细胞(成纤维细胞，血管细胞等)将逐渐失去完整性，进而其迁移能力被抑制，创面微血管的生成也会受到限制。血管的缺失将导致氧气与本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.新型铈介导的共组装多功能纳米酶(CHA@GOx)用于糖尿病创面治疗，其特征包括包括如下步骤：(1)多功能纳米酶(CHA@GOx)的合成摸索和制备。(2)对多功能纳米酶的物理化学性质进行验证。(3)CHA@GOx的体外治疗。(4)CHA@GOx的体内治疗。2.按照权利要求1所述多功能纳米酶(CHA@GOx)的合成摸索和制备，其特征包括如下步骤：(1)双配体(阿仑膦酸钠和二甲基咪唑)浓度优化通过控制变量法分别添加阿仑膦酸钠(AL:1,5,10,15,20mg/mL)和二甲基咪唑(HMIM：1,5,10,15,20mg/mL)各1mL，磁力搅拌混匀后，再缓慢添加100μL硝酸铈溶液[Zn(NO3)2.6H2O](0.1M)，并在室温下搅拌2小时，最后用超纯水透析24h后，收集产物并通过DLS测量每个反应产物的水合粒径，以粒径最小为标准，确定最终反应浓度为AL(10mg/mL)，HMIM(10mg/mL)。(2)多功能纳米酶(CHA@GOx)的制备取AL(10mg/mL)和HMIM(10mg/mL)各1mL,磁力搅拌混匀后，缓慢添加100μL硝酸铈溶液[Zn(NO3)2.6H2O](0.1M)，然后再加入100μL葡萄糖氧化酶溶液(1mg/mL)，并在室温下搅拌2小时，最后用超纯水透析24h，得到纯净的CHA@GOx。3.按照权利要求1所述的CHA@GOx的物理化学性质，其特征包括以下步骤：(1)验证葡萄糖氧化酶活性：(a)各取1mL CHA@GOx溶液加入到10mLEP管中，再分别加入不同量的葡萄糖(0、1、2、4、6mg)和0.01％的甲基红溶液，最后放置在37℃反应4h，观察体系颜色变化和紫外
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可见光检测吸收光谱。(b)各取1mL CHA@GOx溶液加入到10mL EP管中，再分别加入0、2、4mg的葡萄糖，将EP管置于37℃，在不同的时间点(0、0.2、0.5、1、2、4、6、12、24h)测量体系pH值。(2)验证过氧化氢酶(CAT)活性，分别取超纯水、铈纳米颗粒(CHA)和CHA@GOx溶液各1mL加入到10mLEP管中，然后在加入20μLH2O2(1M)溶液的瞬间用溶氧仪检测体系溶氧量。(3)验证超氧化物歧化酶(SOD)活性，采用NBT检测法，分别将CHA、CHA@GOx溶液稀释成不同的浓度后，再加入NBT工作液，摇匀后，光照5min，最后用酶标仪...

【专利技术属性】
技术研发人员：于超，余晓娟，付晓雪，
申请(专利权)人：重庆医科大学，
类型：发明
国别省市：