一种快速筛选高产胞外多糖嗜热链球菌的方法技术

本发明专利技术涉及一种快速筛选高产胞外多糖嗜热链球菌的方法，包括以下步骤：(1)取嗜热链球菌样品稀释涂布于刚果红平板培养，确定菌落颜色，选择Red值较低的菌株作为初筛菌株；(2)采用微孔板培养初筛菌株，离心弃去菌体，煮沸，得到对应不同初筛菌株的发酵液；(3)取发酵液与刚果红缓冲液在微孔板中反应，测定其吸光值，选取吸光值较高的初筛菌株作为复筛菌株，即目标菌株，完成高产胞外多糖嗜热链球菌的筛选。与现有技术相比，本发明专利技术建立完整的高通量筛选流程，包含平板初筛和微孔板复筛，对筛选体系进行优化，在48h完成菌株培养与菌株筛选等。在48h完成菌株培养与菌株筛选等。在48h完成菌株培养与菌株筛选等。

【技术实现步骤摘要】
一种快速筛选高产胞外多糖嗜热链球菌的方法


[0001]本专利技术属于菌种筛选
，涉及一种快速筛选高产胞外多糖嗜热链球菌的方法。

技术介绍

[0002]嗜热链球菌作为唯一用于食品发酵的链球菌，广泛应用于酸奶等乳制品的制作。嗜热链球菌在生长代谢过程中会形成一种多糖类化合物并分泌到细胞壁外，也就是嗜热链球菌胞外多糖(EPS，Exopolysaccharides)。EPS具有稳定的保水性和凝胶性，不仅能增加酸奶和奶油的质构，还能作为增稠剂和稳定剂提高酸奶的质量。此外，还具有抗菌、抗肿瘤、抗氧化、降血脂等生理活性。
[0003]嗜热链球菌EPS是菌株适应环境产生的次级代谢产物，虽然具有安全性高、副作用小、理化特性独特等优点，但菌株稳定性差、产率低等问题限制其在工业生产中大规模应用。因此，筛选出高产EPS菌株是工业化关键步骤，通常采用改良微生物的遗传性状，或通过基因工程和代谢工程等方法对菌株进行定向进化，加速菌株选种并优化代谢途径。建立高通量筛选方法可以对庞大的定向进化文库进行快速筛选，获到高产EPS菌株，为嗜热链球菌EPS实现工业应用奠定基本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种快速筛选高产胞外多糖嗜热链球菌的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)取嗜热链球菌样品稀释涂布于刚果红平板培养，确定菌落颜色，选择Red值较低的菌株作为初筛菌株；(2)采用微孔板培养初筛菌株，离心弃去菌体，煮沸，得到对应不同初筛菌株的发酵液；(3)取发酵液与刚果红缓冲液在微孔板中反应，测定其吸光值，选取吸光值较高的初筛菌株作为复筛菌株，即目标菌株，完成高产胞外多糖嗜热链球菌的筛选。2.根据权利要求1所述的一种快速筛选高产胞外多糖嗜热链球菌的方法，其特征在于，步骤(1)中，所用刚果红平板通过在LM17培养基的基础上替换乳糖为等质量的蔗糖，并添加刚果红0.8g/L，琼脂20g/L得到。3.根据权利要求1所述的一种快速筛选高产胞外多糖嗜热链球菌的方法，其特征在于，步骤(1)中，嗜热链球菌样品在刚果红平板上的涂布密度为：30～300个菌落/49cm2。4.根据权利要求1所述的一种快速筛选高产胞外多糖嗜热链球菌的方法，其特征在于，步骤(1)中，确定菌落颜色并得到Red值的过程为：对菌落拍照后，采用屏幕颜色拾取工具Colors Pro 40...

【专利技术属性】
技术研发人员：艾连中，熊智强，夏永军，王光强，宋馨，张汇，
申请(专利权)人：上海理工大学，
类型：发明
国别省市：