质粒载体及其在构建转基因微藻中的应用制造技术

本发明专利技术涉及基因工程技术领域，尤其涉及质粒载体及其在构建转基因微藻中的应用。本发明专利技术提供了SEQ ID NO:1～4所示核酸序列的4个片段中任意一个在制备微藻的转基因质粒载体中的应用，并提供了适用于构建转基因微藻的质粒载体。本发明专利技术提供的质粒载体，以微藻的同源片段作为启动子或终止子，以微藻敏感的博来霉素作为抗性筛选标记。使用该质粒载体能够将外源基因顺利导入微藻，从而成为有效的微藻的转基因改造方法。改造方法。

【技术实现步骤摘要】
质粒载体及其在构建转基因微藻中的应用


[0001]本专利技术涉及基因工程
，尤其涉及质粒载体及其在构建转基因微藻中的应用。

技术介绍

[0002]小球藻属于绿藻门(Chlorphyta)绿藻纲(Chlorophyceae)绿球藻目(Chlorococcales)卵囊藻科(Oocystaceae)小球藻属(Chlorella)，是一种单细胞绿藻。小球藻细胞为球形或者广椭圆形，其直径为3
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12μm，小球藻种类丰富，生态类型多种多样。在我国国内普通小球藻、椭圆小球藻以及蛋白核小球藻比较普遍。小球藻大约在20亿年前就出现在地球上，在自然界中分布较为广泛，其中主要在淡水水域中种类繁多，并且繁殖速率高，易于生存，在湖泊、沟渠、海洋以及潮湿的土壤中都能生长，环境耐受性强，既可以耐受39℃的高温，也可耐受
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2℃的低温。小球藻行无性分裂繁殖，分裂周期为10
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20小时。目前世界上已知的小球藻有15种左右，加上它的变种可达数百种之多，且分布范围广泛，生态习性多样。
[0003]小球藻最早由贝耶本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.SEQ ID NO:1～4所示核酸序列的4个片段中任意一个在制备微藻的转基因质粒载体中的应用。2.质粒载体，其包括：上游片段和下游片段；所述上游片段的核酸序列如SEQ ID NO:1所示，或如SEQ ID NO:2所示；所述下游片段的核酸序列如SEQ ID NO:3所示，或如SEQ ID NO:4所示。3.根据权利要求2所述的质粒载体，其特征在于，依次包括：如SEQ ID NO:1所示上游片段、筛选标记、目的基因插入位点I、如SEQ ID NO:3所示的下游片段、如SEQ ID NO:2所示上游片段、目的基因插入位点II、如SEQ ID NO:4所示的下游片段。4.根据权利要求2所述的质粒载体，其特征在于，所述筛选标记包括抗性标记或荧光报告基因中至少一种；所述抗性标记包括抗博来霉素的基因；所述荧光蛋白包括绿色荧光报告基因或红色荧光报告基因中的至少一种。5.根据权利要求4所述的质粒载体，...

【专利技术属性】
技术研发人员：路延笃，邓颖，顾新萍，
申请(专利权)人：海南大学，
类型：发明
国别省市：