一种诱导白发模型的方法技术

本发明专利技术公开了一种诱导白发模型的方法，包括以下步骤：步骤1、储液溶解；步骤2、溶液分装；步骤3、注射剂量：根据小白鼠体重，按照60mg/kg的剂量将液态物质注射进入实验鼠的体内；步骤4、制作悬浊工作液：取1管100uL储液，加入10

【技术实现步骤摘要】
一种诱导白发模型的方法


[0001]本专利技术涉及抑制剂
，具体为一种诱导白发模型的方法。

技术介绍

[0002]白发是衰老过程中组织退化的明显迹象，其与年龄相关的头发花白归因于黑素细胞干细胞(McSCs)功能障碍，生理上，McSCs及其后代可组成毛囊色素系统，McSCs的激活与毛发周期一致，并增殖以补充McSC群，然后产生黑色素细胞，将色素沉积到生长的毛干中，研究已经证明，McSCs的完全丧失或其功能的减少会导致缺乏色素的毛干的产生，也就是我们所知的灰发，和我们的黑头发一样，小黑鼠的毛发之所以能乌黑亮丽，有赖于毛囊底部的黑素细胞(melanocyte)合成黑色素，如果缺少黑素细胞，或是不能正常合成黑色素，那么新长出来的毛便会发白。
[0003]Cabozantinib在已知的应用中主要是作为一种靶向抑制剂，作为抗肿瘤药物进行使用。体内研究时，Cabozantinib按30mg/kg剂量处理携带自发胰岛细胞瘤的RIP
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Tag2小鼠，扰乱83％肿瘤血管,降低周细胞和空基底膜袖，引起广泛瘤内缺氧和肿瘤细胞凋亡，且停药后延缓肿瘤血管再生长，与Tyrosinekinase
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IN
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1相比更显著抑制VEGFR而不是c
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Met，导致血管降低43％，说明抑制VEGFR，也抑制放大抑制血管新生的其他功能相关的受体酪氨酸激酶(RTK)，Cabozantinib也降低原发肿瘤的侵袭和减少转移，Cabozantinib每天按30mg/kg剂量处理SCID小鼠，显著废除人体MPNST移植瘤生长和转移，Cabozantinib处理乳腺癌，肺癌胶质瘤模型，抑制肿瘤生长，这种作用存在剂量依赖性，降低肿瘤和内皮细胞增殖，促进凋亡，Cabozantinib按100mg/kg和10mg/kg剂量分别单独处理携带MDA
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MB
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231肿瘤的小鼠和携带C6肿瘤的大鼠，持续抑制肿瘤生长。
[0004]我们发现Cabozantinib能够有效地诱导小鼠白发的生长，但具体作用机制还不清楚。
[0005]现有的诱导白发的方法存在的缺陷是：
[0006]1、专利文件CN109758569A公开了一种靶向调节基因矫正白发的组合物及其应用，“包括以下重量份的组分：甜菜碱提取物0.5～6份、花豆提取物0.2～4份、胡萝卜提取物1～8份、牡蛎肽0.5～5份、α
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亚麻酸0.1～2份和矿物元素补充剂0.1～0.8份；所述矿物元素补充剂包括Cu2+、Fe2+、Zn2+、Mg2+和Se2+。本申请通过解除毒性分子对白发早生或老年白发生成的关键性基因CAT、KROX20、MITF、IRF4、CYP450以及毛囊干细胞的活性抑制，促进黑色素沉积，从而使白发转黑。如实施例所示，各年龄段的白发志愿者服用所述组合物后，白发均得到不同程度的改善。”但是本方法中无法改善毛发的发量，且其操作较为繁琐，并且其由白转黑的见效周期不定。

技术实现思路

[0007]本专利技术的目的在于提供一种诱导白发模型的方法，以解决上述
技术介绍
中提出的问题。
[0008]为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种诱导白发模型的方法，包括以下步骤：
[0009]一种诱导白发模型的方法，包括以下步骤：
[0010]步骤1、储液溶解；
[0011]步骤2、溶液分装；
[0012]步骤3、注射剂量：根据小白鼠体重，按照60mg/kg的剂量将液态物质注射进入实验鼠的体内；
[0013]步骤4、制作悬浊工作液：取1管100uL储液，加入10
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15倍体积的生理盐水配成悬浊工作液；
[0014]步骤5、石蜡脱毛：第0天对8
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9周龄小鼠进行石蜡脱毛；
[0015]步骤6、体内研究：按照60mg/kg的注射剂量，对8
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9周龄、25g小鼠每天持续腹腔注射200uL工作液，时间持续2
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3个星期；
[0016]步骤7、小鼠毛发生长记录。
[0017]优选的，所述步骤S1中储液溶解分装时，在100mgCabozantinib加入1mLDMSO，并采用40
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60rpm的转速搅动混合溶液，使得二者充分溶解，使其浓度为100mg/mL。
[0018]优选的，所述步骤2中溶液分装时将步骤1中所得出的混合溶液分装成100uL/EP管，EP管的规格为2ml，然后将分装后的液态物质置于零下10
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30℃的环境中保存储液。
[0019]优选的，所述步骤4中，准备标准试管，将1管100uL储液置于标准试管中，之后以无菌操作向标准试管加入10
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15倍体积的无菌生理盐水，然后轻摇标准试管，之后静置10
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20min，得到悬浊工作液。
[0020]优选的，所述步骤6中，将步骤5中所得出的两组小鼠按照60mg/kg的注射剂量，对8
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9周龄、25g小鼠每天持续腹腔注射200uL工作液，时间持续2
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3个星期。
[0021]优选的，所述步骤7中，工作人员选取小白鼠注射工作液之后的第10天、第17天和第24天进行毛发记录，并与注射生理盐水的三组对照组小鼠进行对比。
[0022]与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：
[0023]1、本专利技术中按照60mg/kg的注射剂量，对8
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9周龄、25g小鼠每天持续腹腔注射200uL工作液，二十四天之后，小鼠可生长出白发，且其毛发由最初的稀疏转变为亮丽和茂密，其中本试验操作较为方便且简单，其周期较短，见效快，效果显著较为显著。
附图说明
[0024]图1为本专利技术的整体流程示意图；
[0025]图2为本专利技术的小鼠毛发生长记录的第10天效果图；
[0026]图3为本专利技术的小鼠毛发生长记录的第17天效果图；
[0027]图4为本专利技术的小鼠毛发生长记录的第24天效果图。
具体实施方式
[0028]下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他
实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0029]在本专利技术的描述中，需要说明的是，术语“上”、“下”、“内”、“外”“前端”、“后端”、“两端”、“一端”、“另一端”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本专利技术和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本专利技术的限制。此外，术语“第一”、“第二”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性。
[0030]在本专利技术的描述中，需要说明的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种诱导白发模型的方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤1、储液溶解；步骤2、溶液分装；步骤3、注射剂量：根据小白鼠体重，按照60mg/kg的剂量将液态物质注射进入实验鼠的体内；步骤4、制作悬浊工作液：取1管100uL储液，加入10
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15倍体积的生理盐水配成悬浊工作液；步骤5、石蜡脱毛：第0天对8
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9周龄小鼠进行石蜡脱毛；步骤6、体内研究：按照60mg/kg的注射剂量，对8
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9周龄、25g小鼠每天持续腹腔注射200uL工作液，时间持续2
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3个星期；步骤7、小鼠毛发生长记录。2.根据权利要求1所述的一种诱导白发模型的方法，其特征在于：所述步骤S1中储液溶解分装时，在100mgCabozantinib加入1mLDMSO，并采用40
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60rpm的转速搅动混合溶液，使得二者充分溶解，使其浓度为100mg/mL。3.根据权利要求1所述的一种诱导白发模型的方法，其特征在于：所述步骤2中溶液分装...

【专利技术属性】
技术研发人员：邓智利，徐伞，吴峥，
申请(专利权)人：中南大学湘雅医院，
类型：发明
国别省市：