一种基于超高效液相色谱-荧光法同时检测白果中吡哆醛和吡哆醇的方法技术

本发明专利技术公开了一种同时检测白果中吡哆醛和吡哆醇的超高效液相色谱

【技术实现步骤摘要】
一种基于超高效液相色谱
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荧光法同时检测白果中吡哆醛和吡哆醇的方法


[0001]本专利技术涉及一种基于超高效液相色谱
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荧光法同时检测白果中吡哆醛和吡哆醇的分析方法，属于分析


技术介绍

[0002]白果在我国用作食物和药材已经具有上千年的历史，有敛肺气、定喘嗽、止带浊、缩小便的功用，可治哮喘、痰嗽、白带、白浊、遗精、淋病、小便频数等疾病，在韩国和日本也有广泛的应用。目前关于白果的研究多集中在营养成分和功能成分上，其中吡哆醛和吡哆醇是白果中重要天然药物成分。
[0003]随着人们生活水平的提高，人们越来越重视保健和养生，促使了“药食两用”类植物渗透到人们生活中，同时人们对“药食两用”类植物的安全性也给予了更多的关注。近年来不断出现关于白果及成药制剂使用的不良反应甚至毒性反应的报道，而吡哆醛类物质及其衍生物被认为是引起毒性的主要原因之一。因此建立白果中吡哆醛和吡哆醇快速、简便、灵敏、准确的分析技术对白果安全评估及质量监控有重要意义。
[0004]目前文献中关于白果中吡哆醛和吡哆醇的测定，通常是利用索氏提取或超声提取，然后将提取液直接采用液相色谱
‑
荧光或质谱进行测定。样品前处理过程仅有提取过程，而没有净化过程，虽然简单快速，但由于中草药基质复杂，共提物给测定带来的干扰以及对色谱柱的损伤不可忽视。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是提供一种简单、方便、灵敏的超高效液相色谱
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荧光法以同时检测白果中吡哆醛和吡哆醇。
[0006]本专利技术的技术方案：一种基于超高效液相色谱
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荧光法实现白果中吡哆醛和吡哆醇同时检测的分析方法。白果中吡哆醛和吡哆醇用0.1 mol/L盐酸溶液超声提取，采用ZIF
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8材料净化后，采用UPLC
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FLD检测。
[0007]本专利技术主要包括以下几个步骤：液相色谱条件；吡哆醛和吡哆醇的同时检测；样品的前处理；样品的检测。
[0008]一种基于超高效液相色谱
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荧光法同时检测白果中吡哆醛和吡哆醇化合物的分析方法，其特征在于：主要包括以下几个步骤：（1）液相色谱条件本专利技术中所使用的仪器是Agilent Technologies 1260 Infinity超高效液相色谱仪（美国Agilent公司），配有G4220A型高压输流泵、G4226A型自动进样器、G1316C柱温箱和G1321B荧光检测器。色谱条件：色谱柱：SinoChrom ODS
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BP分析柱（4.6 mm
×
250 mm
×
5 μm）；柱温：30℃；进样体积：10 μL；流动相：A相为0.3 %甲酸水溶液，B相为甲醇；梯度洗脱程序：0 min，5% B；8 min，17% B；8.1~10 min，90% B；10.1~15 min，5% B；流速：1 mL/min；荧
光检测波长：λ
ex
/λ
em
=280/400 nm。
[0009]（2）吡哆醛和吡哆醇的同时检测配制一系列质量浓度的吡哆醛和吡哆醇混合标准溶液，在上述液相色谱条件下进行测定，以各组分峰面积Y对质量浓度X进行线性回归，得到线性回归方程。吡哆醛和吡哆醇在0.05~10 mg/L范围内线性关系良好（R2>0.9999），检测限（LOD）分别为0.012 mg/L和0.010 mg/L，定量限（LOQ）分别为0.039 mg/L、0.032 mg/L。
[0010]（3）样品前处理称取0.5 g（精确至0.001 g）白果样品，加入0.1 mol/L盐酸溶液15 mL ，摇荡混匀后，超声提取15 min，10000 rpm离心10 min，取上清液，加ZIF
‑
8材料10 mg，震荡吸附10 min，10000 rpm离心10 min，取上清液过0.22 μm滤膜，供UPLC
‑
FLD分析。
[0011]（4）样品检测取0.5 g样品，分别添加高、中、低三个不同水平的吡哆醛和吡哆醇混合标准溶液，按上述样品前处理方法对样品进行处理后，进行UPLC
‑
FLD分析，计算样品加标回收率。
[0012]本专利技术的有益效果：本专利技术设计了一种以ZIF
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8为净化材料，结合超高效液相色谱
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荧光技术同时检测白果中吡哆醛和吡哆醇的分析方法，可简便、快速、灵敏、准确地检测白果中吡哆醛和吡哆醇，为白果药材的质量控制及安全评估提供技术手段。
附图说明
[0013]图1为吡哆醛和吡哆醇混合标准溶液的色谱分离图。
[0014]1.吡哆醛（10 mg/L）；2.吡哆醇（10 mg/L）。
具体实施方式
[0015]实施例1：采用Agilent Technologies 1260 Infinity超高效液相色谱仪（美国Agilent公司），配有G4220A型高压输流泵、G4226A型自动进样器、G1316C柱温箱和G1321B荧光检测器。色谱条件：色谱柱：SinoChrom ODS
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BP分析柱（4.6 mm
×
250 mm
×
5 μm）；柱温：30℃；进样体积：10 μL；流动相：A相为0.3 %甲酸水溶液，B相为甲醇，梯度洗脱程序见表1；流速：1 mL/min；荧光检测波长：λ
ex
/λ
em
=280/400 nm。
[0016]表1 梯度洗脱程序实施例2：配制一系列质量浓度的吡哆醛和吡哆醇混合标准溶液，在上述液相色谱条件下进
行测定，以各组分峰面积Y对质量浓度X进行线性回归，线性范围、线性方程、相关系数、检测限及定量限见表2。
[0017]表2
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吡哆醛和吡哆醇的线性方程、检测限及定量限实施例3：样品的前处理：称取0.5 g（精确至0.001 g）白果样品，加入0.1 mol/L盐酸溶液15 mL ，摇荡混匀后，超声提取15 min，10000 rpm离心10 min，取上清液，加ZIF
‑
8材料10 mg，震荡吸附10 min，10000 rpm离心10 min，取上清液过0.22 μm滤膜，供UPLC
‑
FLD分析。
[0018]实施例4：取0.5 g样品，分别添加高、中、低三个不同水平的吡哆醛和吡哆醇混合标准溶液，按上述样品前处理方法对样品进行处理后，进行UPLC
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FLD分析，计算样品加标回收率，结果见表3。
[0019]表3
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加标回收率和精密度（n=6）以上内容是结合具体的优选实施方式对本专利技术所做的进一步详细说明，不能认定本专利技术的具体实施只局限于这些说明。对于本领域的普通技术人员来说，可以根据本专利技术的技术方案和专利技术构思，作出相应改变和替代，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种以ZIF
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8有机金属骨架材料为净化材料，结合超高效液相色谱
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荧光法同时检测白果中吡哆醛和吡哆醇化合物的分析方法，其特征在于：主要包括以下几个步骤：（1）液相色谱条件；（2）吡哆醛和吡哆醇的同时检测；（3）样品的前处理；（4）样品的检测。2.一种以ZIF
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8有机金属骨架材料为净化材料，结合超高效液相色谱
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荧光检测法同时检测白果中吡哆醛、吡哆醇化合物的分析方法，其特征在于：主要包括以下几个步骤：（1）液相色谱条件本发明中所使用的仪器是Agilent Technologies 1260 Infinity超高效液相色谱仪（美国Agilent公司），配有G4220A型高压输流泵、G4226A型自动进样器、G1316C柱温箱和G1321B荧光检测器，色谱条件：色谱柱：SinoChrom ODS
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BP分析柱（4.6 mm
×
250 mm
×
5 μm）；柱温：30℃；进样体积：10 μL；流动相：A相为0.3 %甲酸水溶液，B相为甲醇；梯度洗脱程序：0 min，5% B；8 min，17% B；8.1~10 min，90% B；10.1~15 m...

【专利技术属性】
技术研发人员：万益群，高源，郭岚，刘翻，
申请(专利权)人：南昌大学，
类型：发明
国别省市：