一种基于金属有机框架材料分散固相萃取结合高效液相色谱法检测鱼腥草中马兜铃酸的方法技术

本发明专利技术公开了一种基于金属有机框架材料分散固相萃取结合高效液相色谱法检测鱼腥草中马兜铃酸类化合物的方法。属功能材料制备及内源性有害物质分析技术领域。该方法基于金属有机框架材料MIL

【技术实现步骤摘要】
一种基于金属有机框架材料分散固相萃取结合高效液相色谱法检测鱼腥草中马兜铃酸的方法


[0001]本专利技术涉及一种基于金属有机框架材料分散固相萃取结合高效液相色谱法检测鱼腥草中马兜铃酸类化合物的方法，属功能材料制备及内源性有害物质分析


技术介绍

[0002]在我国，自东汉以来就有鱼腥草的食用记载。鱼腥草同时也是中国药典收录的草药，具有抗菌、抗病毒、提高机体免疫力、利尿等效用。近年来，经济、交通和媒体的迅速发展带动了越来越广泛和深入的文化、饮食交流，让本来只限于西南地区深受欢迎的鱼腥草开始在全国各地广泛流行起来。人们在日常饮食中，以鱼腥草嫩茎部位做菜，或者将鱼腥草全株晒干后泡茶，而药用则是取干燥的地上部位或新鲜全草。因此，鱼腥草作为典型的食药两用植物，其全株都被越来越广泛地摄食。
[0003]有研究发现，鱼腥草中可能含有马兜铃酸类物质，马兜铃酸是硝基菲羧酸类化合物，具有非常强的致突变作用，除了会诱发肾毒性外，还可能是导致肝癌的重要原因，被世界卫生组织国际癌症研究机构列为第一类致癌物。其中，马兜铃酸I和马兜铃酸II毒性最强。在2020年版的《中国药典》中，尚未对鱼腥草中马兜铃酸的测定方法进行规定。因此，建立鱼腥草中马兜铃酸I (AA
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I)和马兜铃酸II (AA
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II)准确、可靠、灵敏的检测体系对鱼腥草药材的安全评估十分必要。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种快速、简便、灵敏的高效液相色谱方法以同时检测鱼腥草中马兜铃酸类化合物（马兜铃酸I、马兜铃酸II）。
[0005]本专利技术的技术方案：一种基于金属有机框架材料的分散固相萃取结合高效液相色谱
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二极管阵列技术实现鱼腥草中2种马兜铃酸类化合物（马兜铃酸I、马兜铃酸II）同时检测的分析方法。鱼腥草中2种马兜铃酸类化合物（马兜铃酸I、马兜铃酸II）用甲醇超声提取，采用金属有机框架材料(MIL
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101(Fe))分散固相萃取马兜铃酸类化合物，然后用含0.1~1.0%（v/v）冰醋酸的丙酮溶液洗脱，将洗脱液旋转蒸发至干，甲醇复溶，采用HPLC
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DAD检测。
[0006]本专利技术主要包括以下几个步骤：金属有机框架材料MIL
‑
101(Fe)的制备；液相色谱条件；马兜铃酸I (AA
‑
I)和马兜铃酸II(AA
‑
II)的同时检测；样品前处理；样品的检测。
[0007]一种基于金属有机框架材料MIL
‑
101(Fe)，采取分散固相萃取法，结合高效液相色谱技术检测鱼腥草中马兜铃酸的方法，其特征在于，主要包括以下几个步骤：(1) 金属有机框架材料MIL
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101(Fe)的制备称取0.622~1.106 g对苯二甲酸 (H2BDC)分散于40~70 mL N, N
‑
二甲基甲酰胺(DMF)中，搅拌10~30 min，加入2.026~3.244 g六水合氯化铁(FeCl3·
6H2O)，继续搅拌30~60 min，然后将溶液转移至100 mL聚四氟乙烯高压釜中，110~130℃下加热10~24 h。8000~12000 rpm离心10 min，弃去上清液，依次用DMF和甲醇洗涤产物，60~70℃真空干燥12 h后，
得到产物。
[0008](2) 液相色谱条件色谱柱：C18柱（4.6 mm
ꢀ×
250 mm
×
5 μm）；柱温：25℃；进样体积：10 μL；流动相：乙腈
‑
0.1%乙酸水溶液（60:40，v/v）；流速：1 mL/min；检测波长：254 nm。
[0009](3) 马兜铃酸I (AA
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I)和马兜铃酸II(AA
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II)的同时检测以甲醇为溶剂，配制一系列质量浓度的AA
‑
I和AA
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II混合标准溶液，在上述液相色谱条件下进行测定，以各组分峰面积Y对质量浓度X进行线性回归，AA
‑
I和AA
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II在0.05 ~ 20 mg/L范围内线性关系良好（R2≥0.9999），检出限（LOD）分别为0.007 mg/L和0.014 mg/L，定量限（LOQ）分别为0.024 mg/L和0.045 mg/L。
[0010](4) 样品前处理将干鱼腥草样品粉碎过80~100目筛，称取0.5 g（精确至0.001 g）的鱼腥草粉末样品，加入10 mL甲醇，超声30 min，6000~10000 rpm离心10 min，取上层清液，将20~100 mg MIL
‑
101(Fe)分散在1 mL上清液中，涡旋振荡10~40 min，8000~12000 rpm离心10 min，弃去上清液，加入含0.1~1.0%（v/v）冰醋酸的丙酮3~10 mL，超声10~40 min，8000~12000 rpm离心10 min，取2.4~5.6 mL上清液至25 mL圆底烧瓶中，35~45℃旋转蒸发至干，再加入1 mL甲醇复溶，过0.22 μm有机滤膜，供HPLC
‑
DAD分析。
[0011](5) 样品的检测。
[0012]取0.5 g样品，分别添加高、中、低三个浓度水平的AA
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I和AA
‑
II混合标准溶液，按上述样品前处理方法处理样品后，进行液相色谱分析，计算样品加标回收率。
[0013]本专利技术的有益效果：本专利技术设计了一种基于金属有机框架材料(MIL
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101(Fe))分散固相萃取结合高效液相色谱技术同时检测鱼腥草中马兜铃酸I 和马兜铃酸II的方法。本专利技术制备的金属有机框架材料(MIL
‑
101(Fe))对目标检测物(AA
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I和AA
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II)具有良好的吸附和富集作用，基于该材料建立的鱼腥草中马兜铃酸(AA
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I和AA
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II)的检测方法准确可靠且灵敏度高，为鱼腥草药材的安全评估提供技术手段。
附图说明
[0014]图1 实施例1制备的MIL
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101(Fe)的XRD谱图；图2 实施例1制备的MIL
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101(Fe)的扫描电镜图；图3 实施例1制备的MIL
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101(Fe)孔径分布图；图4 实施例2的AA
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I和AA
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II的色谱分离图：1. AA
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II（1 mg/L）；2. AA
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I（1 mg/L）。
具体实施例
[0015]实施例1称取1.100 g H2BDC，分散于70 mL DMF中，搅拌20 min，加入2.432 g FeCl3·
6H2O，继续搅拌30 min，然后将溶液转移至100 mL聚四本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于金属有机框架材料MIL
‑
101(Fe)，采取DSPE法，结合HPLC
‑
DAD技术，检测鱼腥草中马兜铃酸的方法，其特征在于，主要包括以下几个步骤：(1) 金属有机框架材料MIL
‑
101(Fe)的制备；(2) 液相色谱条件；(3) 马兜铃酸I (AA
‑
I)和马兜铃酸II(AA
‑
II)的同时检测；(4) 样品前处理；(5) 样品的检测。2.一种基于金属有机框架材料MIL
‑
101(Fe)，采取分散固相萃取法，结合高效液相色谱技术检测鱼腥草中马兜铃酸的方法，其特征在于，主要包括以下几个步骤：(1) 金属有机框架材料MIL
‑
101(Fe)的制备称取0.622~1.106 g对苯二甲酸 (H2BDC)分散于40~70 mL N, N
‑
二甲基甲酰胺(DMF)中，搅拌10~30 min，加入2.026~3.244 g六水合氯化铁(FeCl3·
6H2O)，继续搅拌30~60 min，然后将溶液转移至100 mL聚四氟乙烯高压釜中，110~130℃下加热10~24 h；8000~12000 rpm离心10 min，弃去上清液，依次用DMF和甲醇洗涤产物，60~70℃真空干燥12 h后，得到产物；(2) 液相色谱条件色谱柱：C18柱（4.6 mm
ꢀ×
250 mm
×
5 μm）；柱温：25℃；进样体积：10 μL；流动相：乙腈
‑
0.1%乙酸水溶液（60:40，v/v）；流速：1 mL/min；检测波长：254 ...

【专利技术属性】
技术研发人员：万益群，程睿，郭岚，毛雪金，刘翻，
申请(专利权)人：南昌大学，
类型：发明
国别省市：