【技术实现步骤摘要】
多组织中胆汁酸的液相色谱高分辨质谱定性定量检测方法
[0001]本专利技术属于药物分析领域,具体涉及一种多组织中胆汁酸的液相色谱高分辨质谱定性定量检测方法。
技术介绍
[0002]BAs是在肝脏中从胆固醇合成而来的两亲性甾醇分子,作为胆汁主要成分之一排入胆汁。BAs(氨基酸
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酰基
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结合初级胆汁酸、胆酸[CA]、鹅去氧胆酸[CDCA]和它们的次级代谢物)是由肝实质细胞分泌入小管,小管是胆汁酸生产的主要驱动力。BAs连同其他胆汁成分,全部流注小肠,起乳化和吸收脂肪、胆固醇和脂溶性维生素的作用。在到达回肠末端后,BAs几乎完全(95%)由主动吸收机制吸收,随粪便流失约的BAs由每日合成的BAs平衡。在远端小肠和结肠中,初级的BAs(CA和CDCA)经常驻细菌去结合和去羟基化,从而形成次级BAs(即去氧胆酸[DCA]和石胆酸[LCA])。这些次级BAs可以被动重吸收,构成肝肠循环总胆汁酸池的一部分。
[0003]多年来,人们认为BAs的功能在很大程度上仅限于刺激肝胆汁的流动和胆汁的排泄 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种多组织中胆汁酸的液相色谱质谱检测方法,其特征在于,所述检测方法包括液相色谱质谱分析,其中液相色谱条件中流动相A为0.05
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0.2%甲酸水,流动相B为0.05
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0.2%甲酸乙腈,梯度洗脱程序如下:0min,A:B,74
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76:24
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26,V/V;4min,A:B,74
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76:24
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26,V/V;16min,A:B,58
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62:38
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42,V/V;30min,A:B,24
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26:74
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76,V/V;31min,A:B,0
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2:98
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100,V/V;33min,A:B,0
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2:98
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100,V/V;流速为340
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360μl/min,柱温35
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45℃。2.根据权利要求1所述的液相色谱质谱检测方法,其特征在于,所述质谱分析的条件包括:采用电喷雾离子源,负离子扫描,雾化器压力为48
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52psi;碰撞能量58
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62V;毛细管电压5.2
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5.7kV;离子温度590
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610℃;质量范围m/z 50
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800Da。3.根据权利要求1所述的液相色谱质谱检测方法,其特征在于,所述液相色谱条件中进样量为2
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5μL,所述色谱柱为碳十八填料色谱柱。4.根据权利要求1所述的液相色谱质谱检测方法,其特征在于,所述检测方法还包括混合内标工作液的配制,具体包括:将CA
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D4、CDCA
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D4和LCA
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D4加甲醇,配制成各成分浓度分别为4
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6μg/ml的混合内标工作液。5.根据权利要求1所述的液相色谱质谱检测方法,其特征在于,所述检测方法还包括标准溶液的配制,具体包括将HCA、ωMCA、αMCA、TαMCA、βMCA、CDCA、DCA、UDCA、HDCA、6,7
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KLCA、7,12
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KLCA、TβMCA、TωMCA、THDCA、TUDCA、GCA、GCDCA、GDCA、GUDCA、LCA、7
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KLCA、12
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KLCA加甲醇制成各成分浓度分别为2
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320ng/ml的标准溶液1;将TCA、TCDCA、CA、TDCA加甲醇制成各成分浓度分别为10
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800ng/ml的标准溶液2。6.根据权利要求1所述的液相色谱质谱检测方法,其特征在于,...
【专利技术属性】
技术研发人员:谷旭,秦玉昌,薛敏,贾铭,韦娴,刘鸿鹤,王杰,任萃文,
申请(专利权)人:中国农业科学院饲料研究所,
类型:发明
国别省市:
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