一种具有辅助降血压功效的牛肉营养酶解液、粉及生物活性肽制造技术

本发明专利技术公开了一种具有辅助降血压作用的牛肉营养酶解液、粉及生物活性肽，涉及食品技术领域，有被开发成为商业功能性食品和食品基料的应用前景。本发明专利技术中采用定向酶解技术所制备的牛肉酶解产物，既提高了牛肉蛋白氮的生物利用度，同时又赋予了牛肉基础营养之外的辅助降血压活性。此外，本发明专利技术在牛肉酶解产物中还鉴定到1种高丰度的单肽，经体内外验证也具备高效的血管紧张素转换酶抑制活力(ACE

【技术实现步骤摘要】
一种具有辅助降血压功效的牛肉营养酶解液、粉及生物活性肽


[0001]本专利技术涉及食品
，具体涉及一种具有辅助降血压功效的牛肉营养酶解液、粉及生物活性肽。

技术介绍

[0002]高血压是21世纪人类的主要慢病之一，根据《中国心血管健康与疾病报告》，我国现今的高血压患者数量已超过3亿，并有逐年上升和年轻化的趋势。高血压及其并发症给家庭带来了巨大的经济和精神负担，降低/缓解高血压的发生/发展对于提高社会公共卫生安全具有重要的意义。目前针对高血压的有效防治手段，除了调整个人膳食与生活习惯，另一方面主要是通过药物进行干预。然而，短或长期使用降压药可能会对人体造成潜在的风险危害。例如，一些人群在服用卡托普利、依那普利和赖诺普利等药物后，会发生过敏、皮炎、头晕恶心、味觉迟钝等不良反应。相比而言，通过食源途径辅助降血压则更加凸显生物安全性。现已发现，特定的肽类物质能够以(非)竞争性结合的方式阻遏血管紧张素转化酶(ACE)的活力(ACE
‑
I作用)，抑制血管紧张素II的生成，从而减轻血管的收缩程度。以往研究者采用生物酶解、生物发酵等手段，从乳蛋白和植物蛋白中获取到了大量的ACE
‑
I活性肽。鉴于目前使用牛肉作为原料的降血压肽研究报道很少，且绝大多数只限于单肽的鉴定分离，没有考虑到牛肉价格等成本因素，实际可应用性有限。因此，本项目综合牛肉的营养和功能双重价值，兼顾了牛肉酶解产物的ACE
‑
I活力与固形物得率，开发了相关的定向酶解技术方法并获得了稳定的水解物。
专利技术内容
[0003]本专利技术目的在于针对目前存在的现状，为解决上述问题，提供一种含有ACE
‑
I生物活性肽的具有辅助降血压功效的牛肉营养酶解液、粉。
[0004]内容1：一种具有辅助降血压功效的牛肉营养酶解液、粉，制备过程包括以下步骤：
[0005]S1、选取新鲜牛肉，剔除筋膜、肥肉，切块，用绞肉机打成肉糜；
[0006]S2、将质量比1:4的牛肉糜与纯水搅拌混匀，于高速均质机中经8000
‑
12000r/min均质2
‑
3min；
[0007]S3、酶解步骤：用3M NaOH溶液将步骤S2中制备的均质液pH调至9.42，加入碱性蛋白酶粉末，酶活力单位与肉质量比为：3972U/g牛肉，置于恒温震荡水浴锅中酶解。其中，酶解温度为70℃，恒定转速110
‑
120r/min，酶解时间2.5
‑
3.5h(在酶解反应开始后的1h，再次测定均质液pH值，并重新将pH调至9.42)；
[0008]S4、酶解结束后，以95
‑
100℃煮沸4
‑
6min，终止酶解反应；
[0009]S5、酶解液经水冷却至常温后，以8000
‑
12000r/min离心10
‑
15min，取上清液；或用100目过滤网滤过未消化残渣，回收滤过液；
[0010]S6、使用旋转蒸发仪在
‑
0.1MPa、50
‑
60℃条件下以100
‑
120r/min将酶解液浓缩至
原溶液的30
‑
40％体积；
[0011]S7、通过高速离心喷雾干燥机，将浓缩液进行喷雾干燥，获得牛肉肽粉。干燥工艺参数：进风温度200
‑
220℃，出风温度80
‑
90℃，蠕动泵转速10r/min。
[0012]内容2：鉴定到一种ACE
‑
I生物活性肽(氨基酸序列：脯氨酸
‑
丝氨酸
‑
亮氨酸
‑
缬氨酸
‑
精氨酸
‑
甘氨酸
‑
脯氨酸
‑
精氨酸，缩写：PSLVRGPR)，该生物活性肽存在于内容1的牛肉营养酶解液、粉中。
[0013]本专利技术的有益效果：
[0014](1)
技术实现思路
1：本专利技术研制的牛肉酶解液/粉兼顾了产物的高回收率与降血压作用，且相比于牛肉块具有更高的营养生物利用价值；对比目前市售的某种牛肉蛋白肽商品，本专利技术的牛肉酶解液/粉具有非常显著的降血压优势。
[0015](2)
技术实现思路
2：在
技术实现思路
1牛肉酶解液中所鉴定获得的1种纯肽片段(PSLVRGPR)，具有更为显著的降血压生物功效。相比于Choe等(2018)发表的试验数据(使用嗜热菌蛋白酶水解牛里脊肉，其鉴定的各种肽片段的ACE
‑
I半抑制浓度在0.89
‑
24.61mM之间)，本专利技术2中所得到的单肽对ACE酶的IC
50
值为0.79mM，具有更好的ACE抑制效果。
附图说明
[0016]图1：实施例一中6种蛋白酶的牛肉酶解液及其经胃肠消化后产物的ACE
‑
I活力；
[0017]图2：实施例一中6种蛋白酶的牛肉酶解液产物冻干质量；
[0018]图3：实施例一中6种蛋白酶的牛肉酶解液SDS
‑
PAGE电泳图；
[0019]图4：实施例一中不同牛肉酶解液的感官评价得分雷达图；
[0020]图5：实施例一中不同酶底物比对酶解产物冻干质量和ACE抑制率的影响；
[0021]图6：实施例一中不同酶解时间对酶解产物冻干质量和ACE抑制率的影响；
[0022]图7：实施例一中不同酶解温度对酶解产物冻干质量和ACE抑制率的影响；
[0023]图8：实施例一中不同pH值对酶解产物冻干质量和ACE抑制率的影响；
[0024]图9：实施例二中以酶解液ACE
‑
I为响应值，有关自变量参数交互项的响应面图；
[0025]图10：实施例二中以酶解液得量为响应值，有关自变量参数交互项的响应面图；
[0026]图11：实施例三中以牛肉酶解液灌胃的SHR大鼠的血管收缩压
‑
时间变化趋势图；
[0027]图12：实施例四中牛肉酶解产物与(熟)牛肉块经胃肠模拟消化后的可溶性氮含量和非蛋白氮含量；
[0028]图13：实施例四中牛肉酶解液与(熟)牛肉块对肠细胞的营养促生长作用；
[0029]图14：实施例五中以肽片段PSLVRGPR灌胃的SHR大鼠的血管收缩压
‑
时间变化趋势图。
[0030]其中：
[0031]图1中：a，b，c，d和e表示胃肠消化前ACE抑制率的差异显著性(p＜0.05)；a
’
和b
’
表示胃肠消化后ACE抑制率的差异显著性(p＜0.05)；
[0032]图2中：a，b，c，d，e和f表示由不同蛋白酶制备的酶解液冻干得率的差异显著性(p＜0.05)；
[0033]图3中：A.牛肉蛋白样品SDS
‑
PAGE凝胶电泳；B.6种酶解液本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种具有辅助降血压功效的牛肉营养酶解液、粉，其特征在于，制备过程包括以下步骤：S1、选取新鲜牛肉，剔除筋膜、肥肉，切块，用绞肉机打成肉糜；S2、将质量比1:4的牛肉糜与纯水搅拌混匀，于高速均质机中经8000
‑
12000r/min均质2
‑
3min；S3、酶解步骤：用3M NaOH溶液将步骤S2中制备的均质液pH调至9.42，加入碱性蛋白酶粉末，酶活力单位与肉质量比为：3972U/g牛肉，置于恒温震荡水浴锅中酶解。其中，酶解温度为70℃，恒定转速110
‑
120r/min，酶解时间2.5
‑
3.5h。在酶解反应开始后的1h，再次测定均质液pH值，并重新将pH调至9.42；S4、酶解结束后，以95
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100℃煮沸4
‑
6min，终止酶解反应；S5、酶解液经水冷却至常温后，以8000
‑
12000r/min离心10
‑
15min，取上清...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨怀谷，唐道邦，李希宇，刘学铭，程镜蓉，王旭苹，林耀盛，邹金浩，
申请(专利权)人：广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所，
类型：发明
国别省市：