骨痂巨噬细胞分离用组合试剂及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种骨痂巨噬细胞分离用组合试剂及其应用，所述组合试剂主要包括A液和B液，其中：A液主要由2wt.%Ⅱ型胶原酶溶液、2.5wt.%胰蛋白酶

【技术实现步骤摘要】
骨痂巨噬细胞分离用组合试剂及其应用


[0001]本专利技术属于细胞分离
，具体为一种骨痂巨噬细胞分离用组合试剂及其应用。

技术介绍

[0002]巨噬细胞，最初由Metchnikoff教授发现和命名，是人体中可塑性极强的固有免疫细胞，存在于所有的组织中并在功能上呈现出多样性。不同组织的巨噬细胞各不相同，如小胶质细胞、破骨细胞、库普弗细胞和支气管肺泡巨噬细胞都具有各自的基因转录谱和生物学功能。巨噬细胞在机体发育、内环境稳态、组织修复和免疫调节方面都发挥着重要的作用。巨噬细胞是机体抵御感染的第一道防线，是固有免疫的重要组成部分，它与其他固有免疫细胞，如中性粒细胞，固有淋巴细胞和自然杀伤细胞等协同发挥作用。此外，巨噬细胞是协调慢性炎症和相关病理过程中的关键细胞，具有对不同组织微环境的适应和对不同致病性损伤的反应能力。更清晰地认识巨噬细胞的生物学功能以及具体机制将有助于解析人类多种疾病的病理生理机制以及开发潜在治疗靶点。
[0003]近年来，越来越多的研究发现，巨噬细胞对于骨愈合至关重要，缺乏巨噬细胞将严重抑制膜内成骨和软骨内成骨。在骨折后本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种巨噬细胞分离用组合试剂，其特征在于，主要包括A液和B液，其中：A液主要由2wt.％Ⅱ型胶原酶溶液、2.5wt.％胰蛋白酶
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EDTA溶液和RPMI 1640培养基组成，所述2wt.％Ⅱ型胶原酶溶液、2.5wt.％胰蛋白酶
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EDTA溶液体积比为1～3：1～3，所用溶剂均为无钙镁PBS缓冲液，所述2wt.％Ⅱ型胶原酶溶液、2.5wt.％胰蛋白酶
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EDTA溶液的溶液总量与RPMI 1640培养基体积比为1：3；B液：无钙镁PBS缓冲液中加入2wt.％的血清。2.根据权利要求1所述巨噬细胞分离用组合试剂，其特征在于，所述A液还包括2wt.％BSA溶液，所述2wt.％Ⅱ型胶原酶溶液、2.5wt.％胰蛋白酶
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EDTA溶液与2wt.％BSA溶液体积比为100～300：100～300：50～200。3.根据权利要求2所述巨噬细胞分离用组合试剂，其特征在于，所述A液还包括2wt.％BSA溶液，所述2wt.％Ⅱ型胶原酶溶液、2.5wt.％胰蛋白酶
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EDTA溶液与2wt.％BSA溶液体积比为200：200：50～200。4.根据权利要求3所述巨噬细胞分离用组合试剂，其特征在于，所述A液还包括2wt.％BSA溶液，所述2wt.％Ⅱ型胶原酶溶液、2.5wt.％胰蛋白酶
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EDTA溶液与2wt.％BSA溶液体积比为200：200：100。5.一种巨噬细胞分离用组合试剂，其特征在于，所述组合制剂按比例配制，包括：A液:100
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300μL 2wt.％Ⅱ型胶原酶溶液，100
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300μL 2.5wt.％胰蛋白酶
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EDTA溶液和50
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200μL 2wt.％BSA溶液，上述溶液总量为500μL且溶剂均为无钙镁PBS缓冲液，1500μL RPMI 1640培养基，所述培养基含双抗无血清；B液:无钙镁PBS缓冲液中加入2wt.％的血清。6.根据权利要求5所述巨噬细胞分离用组合试剂，其特征在于，具体组成为：A液:200μL 2wt.％Ⅱ型胶原酶溶液，200μL 2.5wt.％胰蛋白酶
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EDTA溶液和100μL 2wt.％BSA溶液，上述溶液的溶剂均为无钙镁PBS缓冲液，1500μL RPMI 1640培养基，所述培养基含双抗无血清；B液:无钙镁PBS缓...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵书杰，郑子洋，李寅，赵轩，殷国勇，
申请(专利权)人：南京医科大学，
类型：发明
国别省市：