基于photo-ATRP信号放大策略的ALP活性检测试剂盒及其使用方法技术

本发明专利技术公开了基于photo

【技术实现步骤摘要】
基于photo
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ATRP信号放大策略的ALP活性检测试剂盒及其使用方法


[0001]本专利技术涉及一种基于光介导原子转移自由基聚合反应(photo
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ATRP)信号放大策略的碱性磷酸酶(ALP)活性检测试剂盒及其使用方法，属于生物分析


技术介绍

[0002]碱性磷酸酶(ALP)是一种广泛存在于原核生物和真核生物中的同源二聚体金属蛋白酶，其结构中的锌原子和镁原子在ALP去磷酸化作用中起着至关重要的作用。在碱性条件下，ALP可催化蛋白质、核酸及小分子中磷酸单酯结构的水解。因此，ALP在细胞分裂、成骨、矿化、解毒等生理功能中扮演着重要的角色。研究表明，ALP活性异常与多种疾病密切相关，例如血清中ALP活性升高通常与胆道梗阻、成骨细胞骨肿瘤、骨软化、类白血病反应或淋巴瘤等疾病相关；相反，一些代谢性疾病，如威尔逊病，慢性粒细胞白血病等则会对ALP活性造成病理性抑制，使其活性低于正常范围。因此，ALP活性检测对相关疾病的诊断及治疗具有十分重要的意义。目前，ALP的检测方法主要包括色谱法、表面增强拉曼散射法、化本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于photo
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ATRP信号放大策略的ALP活性检测试剂盒，其特征在于，包括以下原料：电极、MPA、EDC、NHS、O
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磷酸乙醇胺、BIBB、DMSO、EY、Me6TREN、FMMA、LiClO4。2.根据权利要求1所述的ALP活性检测试剂盒，其特征在于，使用时，将部分原料配制为溶液，其中，MPA溶液浓度为10mM，EDC/NHS混合溶液中EDC浓度为20mM，NHS浓度为5mM，O
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磷酸乙醇胺溶液浓度为10mM，BIBB溶液浓度为10mM，EY溶液浓度为5mM，Me6TREN溶液浓度为10mM，FMMA溶液浓度为10mM，LiClO4溶液浓度为1M。3.一种如权利要求1所述ALP活性检测试剂盒的使用方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)MPA修饰将金电极浸泡在MPA溶液中，在25～37℃下孵育2～8h；(2)MPA羧基的活化与修饰磷酸乙醇胺将步骤(1)所得电极浸泡在EDC/NHS混合溶液中，在37℃下孵育0.5～1h，之后将电极浸泡在O
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磷酸乙醇胺溶液中，在37℃下孵育1～2h；(3)ALP脱磷酸根和BIBB修饰将待检测溶液滴在步骤(2)所得电极表面，在37℃下孵育1～2h，之后将电极浸泡在BIBB溶液中，在37℃下孵育0.5～2h；(4)光介导ATRP反应将步骤(3)所得电极浸...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨怀霞，郭亮，张亚萍，陈璐瑶，张雨婷，卢静，郭文锋，司富春，
申请(专利权)人：河南中医药大学，
类型：发明
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