【技术实现步骤摘要】
一种基于CRISPR/Cas12a系统检测沙门氏菌的生物传感器
[0001]本专利技术属于传感器
，特别涉及一种核酸适配体检测沙门氏菌的生物传感器。
技术介绍
[0002]由致病菌引起的水媒和食源性疾病因其高发病率和高死亡率而成为全球公共卫生关注的问题。在中国，约80%的食源性病原体暴发是由鼠伤寒沙门氏菌引起的。鼠伤寒沙门氏菌是引起人类胃肠道感染的一种重要的食源性病原体，其感染症状通常包括发热、恶心、呕吐、腹泻等。伤寒沙门氏菌为10
3 CFU/mL，可导致严重的肠胃炎、伤寒甚至死亡。感染的主要途径是摄入受污染的食品，特别是鸡蛋、肉类、家禽和牛奶。目前，快速检测是控制污染的关键步骤之一食品中的鼠伤寒沙门氏菌污染。目前已建立了纸基导电免疫传感器（PAD）、电阻式温度传感器、石英晶体微天平（QCM）和表面增强拉曼散射（SERS）等检测鼠伤寒沙门氏菌的方法。然而，每一种仪器都有其耗时、费力、专业性强、灵敏度低等缺点。因此，开发快速、低成本、高灵敏度和选择性的快速检测沙门氏菌是预防感染、及时诊断和治疗显得尤为重要。
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种检测沙门氏菌的生物传感器，其特征在于，包括a）核苷酸序列如SEQ ID NO: 1
‑
5所示的适配体Apt、互补链T、发夹H、模板探针TP、连接探针LP共5条oligo DNA，核苷酸序列如SEQ ID NO: 6所示的crRNA，报告探针FQ，和b）CRISPR/Cas12a，T4连接酶，phi29 DNA聚合酶，Zn
2+
；所述模板探针TP的5
’
端磷酸化；所述发夹H为仅第23位为核糖核苷酸；所述报告探针FQ的核苷酸序列为TTATT，其5
’
端和3
’ꢀ
端分别连接报告基团和猝灭基团。2.根据权利要求1所述的生物传感器，其特征在于，所述报告基团和猝灭基团选自FAM和BHQ或ROX和BHQ。3. 根据权利要求1所述的生物传感器，其特征在于，所述模板探针TP和连接探针LP由成环的核苷酸序列如SEQ ID NO: 4所述的环状模板CT代替，且不含T4连接酶；优选地，所述环状模板CT的制备方法如下：等摩尔的模板探针TP和连接探针LP在缓冲溶液中于95℃下孵育5min，冷却至室温后，加入T4连接酶，16℃下孵育过夜，然后在65℃下10min灭活酶，加入Exo I酶、Exo III酶，在37℃下消...
【专利技术属性】
技术研发人员：李倩茹，刘素，黄加栋，王玉，郭志强，张清心，李静静，徐婉晴，朱志学，朱镜儒，姚玉颖，李宗强，
申请(专利权)人：济南大学，
类型：发明
国别省市：
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