佐剂组合物及其制备方法技术

本发明专利技术涉及一种新的能够增强抗原免疫响应的免疫复合物，该免疫复合物包含聚核糖肌苷

【技术实现步骤摘要】
佐剂组合物及其制备方法


[0001]本专利技术涉及生物免疫制剂及其制备方法，更具体地，涉及用于增强免疫响应的生物制剂及其制备方法，用于促进和增强宿主体内的免疫反应。

技术介绍

[0002]机体的免疫系统具有产生特异性和非特异性免疫力的作用。非特异性免疫力是指通过巨噬细胞或颗粒细胞的吞噬作用以吞噬外来颗粒或抗原，或者通过天然杀伤细胞的作用来清除机体内异常细胞。特异性免疫反应是以B细胞和T细胞的特异性反应为基础，这些系统主要是在被特定抗原所活化后获得他们的反应性，而且在未来暴露于该特定抗原时展现出免疫记忆性。利用该机理发展出的疫苗就是通过免疫特异性和记忆性来保护机体对抗有害病原体的有效机制。
[0003]通常，B细胞和T淋巴细胞在他们的细胞表面上有针对特定抗原的特定受体，能够产生特异性免疫力。为了寻找安全有效的疫苗，重组、纯化及合成等技术被用以改善抗原的品质和特异性。同时有效佐剂也成为了提高免疫原性的一个发展方向，有效佐剂正成为现代疫苗的一种必要成份。
[0004]聚核苷酸复合物已被研究用作佐剂等多种用途，美国专利3906092公开了含有聚核苷酸或聚核苷酸复合物的疫苗增强佐剂型疫苗抗体反应；但研究表明：聚肌核苷酸
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聚胞核苷酸(PIC)在用于猴和人体时并没有效果，PIC进入体内后不稳定。据此，有多种方式来改进PIC的不足。
[0005]Houston等人通过PIC与poly-L-赖氨酸氢嗅酸盐构建复合物(聚肌核苷酸聚胞核苷酸poly-L-离胺酸羧基-甲基纤维素复合物)，作为一种有效的佐剂，来增加初级抗体反应而无需其他佐剂的辅助。
[0006]中国专利93105862.7，通过卡那霉素、钙离子与聚肌核苷酸-聚胞核苷酸形成复合物，可以作为人和哺乳动物的有效安全的疫苗佐剂。
[0007]中国专利CN101166559A，公开了包含聚核苷酸佐剂、一种抗生素以及一个正价离子的佐剂组合物，其中对聚核苷酸佐剂组合物中的分子量做了进一步限定，限定为至少 66000道尔顿。该聚核苷酸佐剂和抗原物质相结合可以有效的引起特异体液免疫反应，从而增进保护性免疫力。
[0008]中国专利CN103405762A，公开了以聚肌核苷酸-聚胞核苷酸为主的佐剂，该佐剂含有抗生素和阳离子，并进一步限定聚核苷酸佐剂组合物分子量介于66000-1200000道尔顿，且大小介于6.4S至24.0S的分子大小范围。
[0009]中国专利CN104857016A，公开了鉴定用于治疗癌症的化合物的方法，通过聚乙烯亚胺聚阳离子与聚肌核苷酸-聚胞核苷酸的复合来进行癌症的治疗，其中聚乙烯亚胺阳离子发挥运载体的作用。
[0010]由此可见，在聚肌核苷酸-聚胞核苷酸佐剂的研究方面，集中于对其改进的研究颇多，提高免疫原性，激发机体的免疫反应依然是研究的重点，以满足疫苗产品的需求。

技术实现思路

[0011]本专利技术基于对聚核苷酸佐剂的常年使用和研究的基础上，一方面提出一种新的能够增强抗原免疫响应的免疫复合物，该免疫复合物包含聚核糖肌苷-聚核糖胞苷酸(PIC) 和聚乙二醇(PEG)。聚乙二醇增加了聚核糖肌苷与聚核糖胞苷酸的配对反应，增色效应和免疫效应都呈现显著增加。本专利技术的免疫复合物可显著增强抗原的免疫响应性从而增强机体的特异性抗体增强反应和非特异性免疫反应。在制备过程中，不需要对免疫复合物的分子量做进一步处理，实现了免疫复合物制备工艺简单，降低能耗的优势。
[0012]进一步，本专利技术的增强抗原免疫响应的免疫复合物优选含有含阳离子稳定剂，所述阳离子稳定剂包括脂质体、赖氨酸、丝氨酸、硫酸氨基葡萄糖、盐酸氨基葡萄糖、壳聚糖、壳聚糖硫酸盐、壳聚糖盐酸盐等，阳离子稳定剂的浓度选择0.01-5％(g/L)，优选0.05-1％(g/L)。
[0013]进一步，本专利技术的增强抗原免疫响应的免疫复合物优选含有正价离子，所述正价离子可以为一价阳离子或二价阳离子如钙离子、钠离子、钾离子、镉离子、锂离子、镁离子、铯离子、碘离子、铁离子或锌离子等。该正价离子可以呈适当的盐或有机复合物的形式，包括但不局限于氯化物、氟化物、氢氧化物、磷酸盐或硫酸盐。当该正价离子是钙离子时，则钙离子的呈现形式可以是碳酸钙、氯化钙、氟化钙、氢氧化钙、磷酸钙或硫酸钙的形式。正价离子的浓度选择0.05mM-1.0mM，优选0.1mM-0.8mM，进一步优选0.1mM-0.5mM
[0014]进一步，本专利技术的增强抗原免疫响应的免疫复合物优选含有或不含有缓冲体系，所述缓冲体系是药学领域常规的缓冲体系，如氯化钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠缓冲体系。
[0015]第二方面，本专利技术提供的增强抗原免疫响应的免疫复合物可以用作免疫佐剂组合物，用于诱导增强免疫反应和改变免疫反应类型，特别是诱发对于抗原物的免疫反应。
[0016]第三方面，本专利技术提供一种免疫原组合物，其包括本专利技术的佐剂组合物(增强抗原免疫响应的免疫复合物)以及抗原物质或疫苗，佐剂组合物能够显著诱发机体对于抗原物的免疫反应。
[0017]第四方面，本专利技术提供一种免疫套装产品，其包含本专利技术的佐剂组合物和免疫原性物质。
[0018]第五方面，本专利技术提供免疫宿主的方法，将本专利技术的免疫原组合物给予宿主，以促进宿主对于抗原物质的免疫反应。该宿主可以是人或动物，所述动物包括牛、猪、羊、狗、猫、马、鸡、鸭、鹅、火鸡等可以给予产生免疫反应的生命体。给予的过程可经肌肉、腹腔、静脉或皮下注射给予或经口服给予或经由呼吸道吸入来给予。在其他方式中，该免疫原组合物可经由直肠、阴道、鼻、口、眼、局部、透皮或皮内来给予。
[0019]第六方面，本专利技术提供一种制备本专利技术免疫复合物的方法，该方法包括如下步骤：
[0020]1、将聚乙二醇溶于溶剂体系中；
[0021]2、将聚核糖肌苷酸溶于步骤1的溶液中，充分溶解；
[0022]3、将聚核糖胞苷酸溶于步骤2的溶液中，充分溶解。
[0023]优选进一步包括：
[0024]4、在上述充分溶解的溶液中，添加阳离子稳定剂进行充分溶解；
[0025]5、在上述充分溶解的溶液中，进一步优选添加正价离子进行充分溶解，获得本专利技术的增强抗原免疫响应的免疫复合物。
[0026]优选进一步包括：
[0027]在步骤5的溶液中加入抗原物质获得本专利技术的免疫原组合物。
[0028]或者，
[0029]步骤5的溶液与抗原物质机械性地分别盛装，获得本专利技术的免疫套装产品。
[0030]第七方面，本专利技术提供免疫复合物在制备用以诱导宿主发生免疫反应的生物制品中的用途。所述生物制品优选为疫苗。进一步所述生物制品可以进一步包含制剂学上可接受的载体和/或赋形剂。
具体实施方式
[0031]本专利技术涉及用在人类、非人类动物或细胞培养物中引起和/或促进免疫反应的免疫原组合物和方法，该免疫反应可为体液和/或细胞免疫反应。本专利技术免疫原组合物包含抗原物质和佐剂组合物。该佐剂组合物的存在会促进或改变对于该抗原物本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种能够增强抗原免疫响应的免疫复合物，该免疫复合物包含聚核糖肌苷-聚核糖胞苷酸(PIC)和聚乙二醇(PEG)。2.如权利要求1所述的免疫复合物，其进一步包含阳离子稳定剂，所述阳离子稳定剂包括脂质体、赖氨酸、丝氨酸、硫酸氨基葡萄糖、盐酸氨基葡萄糖、壳聚糖、壳聚糖硫酸盐、壳聚糖盐酸盐。3.如权利要求1-2任一项所述的免疫复合物，其进一步包含正价离子，所述正价离子可以为一价阳离子或二价阳离子如钙离子、钠离子、钾离子、镉离子、锂离子、镁离子、铯离子、碘离子、铁离子或锌离子。4.如权利要求1-3任一项所述的免疫复合物，其进一步包含缓冲体系，所述缓冲体系是药学领域常规的缓冲体系，如氯化钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠缓冲体系。5.一种免疫原组合物，其包含权利要求1-4任一项所述的免疫复合物和抗原物质或疫苗。6.如权利要求5所述的免...

【专利技术属性】
技术研发人员：李润，
申请(专利权)人：北京快乐星生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：