孕甾烷型的C21-甾体类化合物在制备抗炎药物中的应用制造技术

本发明专利技术涉及药物技术领域，公开了孕甾烷型的C21

【技术实现步骤摘要】
孕甾烷型的C21
‑
甾体类化合物在制备抗炎药物中的应用


[0001]本专利技术涉及药物
，具体来说涉及孕甾烷型的C21
‑
甾体类化合物在制备抗炎药物中的应用。

技术介绍

[0002]隔山消(基原植物：耳叶牛皮消Cynanchum auriculatumRoyle ex Wight)的干燥块根。秋季采收，洗净，干燥，亦为我国贵州省少数民族用药，常用于虚损劳伤，痢疾，疳积，饱胀胃痛，白带，疮癣。但是土家医认为本品具有健胃消积，解毒消肿、抗炎镇痛之功效(叶定江，原思通.中药炮制学辞典.上海:上海科学技术出版社(第1版)，2005∶247～248)，刘刚等对隔山消及其不同炮制品的抗炎作用进行了研究，表明隔山消及两种炮制品均有一定的抗炎作用，两种炮制品的抗炎效果比生品有所增强(刘刚，朱小珊，陈金利，邓旭坤，梅之南.隔山消及其不同炮制品对小鼠的抗炎作用[J].中药药理与临床.2011,27(3)：82
‑
84.)。另有文献报道隔山消可以治疗慢性萎缩性胃炎(李文胜，屈亚莉，屈克义，朱炼，郭莲军.复方隔山消颗粒对大鼠慢性萎缩性胃炎的治疗作用[J].中国中西医结合消化杂志.2006,(6)：363
‑
364,368.)。
[0003]鉴于隔山消中抗炎活性成分尚未阐明，我们决定对隔山消中主要化学成分进行分离纯化及鉴定，然后通过构建的LPS诱导小鼠炎症模型对其中化学实体进行活性评价，希望发现可以作为抗炎药物的候选化学实体。

技术实现思路

[0004]本专利技术提供了孕甾烷型C21
‑
甾体类化合物在制备抗炎药物中的新应用。
[0005]本专利技术的技术方案如下：
[0006]本专利技术提供孕甾烷型C21
‑
甾体类化合物在制备抗炎药物中的应用，所述孕甾烷型C21
‑
甾体类化合物的结构式如式I所示：
[0007][0008]其中，R选自氢、
[0009]本专利技术中，所述化合物具有抑制炎症细胞因子的作用。
[0010]作为一种实施方式，所述炎症细胞因子包括IL
‑
6和TNF
‑
α。
[0011]作为一种实施方式，所述化合物的体外有效浓度为30
‑
80μmol/L，进一步优选为40
‑
60μmol/L。在上述浓度下，化合物能够有效抑制炎症细胞因子，且对细胞无毒副作用。
[0012]作为一种实施方式，当R为氢时，所述化合物为去乙酰基萝藦苷元，CAS号：3513
‑
04
‑
0。
[0013]作为一种实施方式，当R为时，所述化合物为开德苷元，CAS号：38395
‑
01
‑
6。
[0014]本专利技术对上述化合物的来源没有特殊限定，可以商业购买，也可以从隔山消中提取分离得到。
[0015]作为一种实施方式，上述化合物的提取方法包括：将隔山消粉碎，乙醇回流提取，所得提取物在酸中水解，乙酸乙酯萃取，硅胶柱层析梯度洗脱分离，得到所述化合物。
[0016]优选的，所述梯度洗脱的洗脱剂为不同体积配比的石油醚和丙酮，优选洗脱剂中石油醚和丙酮的体积比分别为：1：0、20：1、10：1、5：1、1：1和0：1，其中0代表没有该物质，为石油醚或丙酮的单品。本专利技术中，体积比为1：1的石油醚和丙酮洗脱部分分离得到乙酰基萝藦苷元，体积比为5：1的石油醚和丙酮洗脱部分分离得到开德苷元。
[0017]作为一种实施方式，所述药物包括上述化合物及其药用盐中的任意一种或几种，以及药学上可接受的辅料。
[0018]作为一种实施方式，所述药物为注射液、片剂、粉剂、颗粒剂、丸剂、胶囊、口服液、膏剂、霜剂或喷剂。
[0019]与现有技术相比，本专利技术的优点在于：
[0020]本专利技术的孕甾烷型C21
‑
甾体类化合物去乙酰基萝藦苷元和开德苷元对脂多糖诱导的小鼠原代腹腔巨噬细胞炎症细胞因子有较好的抑制作用，具有一定抗炎活性，对细胞无毒性，为抗炎药物的研发提供新的选择。
附图说明
[0021]图1为化合物对LPS诱导的小鼠腹腔巨噬细胞释放TNF
‑
α的影响。
[0022]图2为化合物对小鼠腹腔巨噬细胞活力的影响。
具体实施方式
[0023]下面将结合本专利技术的实施例，对本专利技术的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0024]下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
[0025]下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
[0026]下述实施例中所有实验结果采用GraphPad Prism 8.0.2软件进行统计学分析，所有数值以均数
±
标准差表示，采用单因素方差分析、双尾无配对t检验进行统
计学分析并作图。#,p>0.05，无统计学差异；*,p<0.05，有统计学差异；**,p<0.01，有显著统计学差异；***,p<0.001，有非常显著统计学差异。
[0027]实施例1
[0028]去乙酰基萝藦苷元和开德苷元的制备
[0029]耳叶牛皮消(C.auricutalum Royle ex Wight.)干燥块根(1.0kg)粉碎后用95％乙醇回流提取3
×
2.5L次，时间分别为：5小时、4小时、3小时，回收乙醇，得膏状提取物0.21kg；
[0030]将膏状提取物用H2O/CH3OH(2：1,15L)溶解，然后加入浓硫酸溶解在10L水中配成10％H2SO4，加热回流使其水解，回流2小时后，逐步加入10％氢氧化钠调节pH＝7.0，减压回收甲醇得水解产物；
[0031]然后用乙酸乙酯进行萃取，减压回收萃取溶剂得到乙酸乙酯萃取部分浸膏(约65g)；
[0032]将乙酸乙酯萃取部分用二氯甲烷：甲醇体积比1：1(36mL)溶解后，使其吸附于硅胶(40
‑
80目)上，将吸附于硅胶的样品采用硅胶(200
‑
300目，3Kg)柱层析进行梯度洗脱分离：Fr(fraction)I部分石油醚(10L)，FrII部分石油醚/丙酮(体积比)＝20：1(10L)，FrIII部分石油醚/丙酮(体积比)＝10：1(10L)，FrIV石油醚/丙酮(体积比)＝5：1(10L)，FrV石油醚/丙酮(体积比)＝1：1(10L)，FrVI丙酮(10L)，洗脱组分以薄层层析(TLC)检测(通过UV
–
254和365nm观察、碘蒸气显色、5％硫酸
‑
乙醇溶液烘烤显色)本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.孕甾烷型C21
‑
甾体类化合物在制备抗炎药物中的应用，其特征在于，所述孕甾烷型C21
‑
甾体类化合物的结构式如式I所示：其中，R选自氢、2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述化合物具有抑制炎症细胞因子的作用。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述炎症细胞因子包括IL
‑
6和TNF
‑
α。4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述化合物的体外有效浓度为30
‑
80μmol/L。5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，当R为氢时，所述化合物为去乙酰基萝藦苷元，从隔山消中提取分离得到。6.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，当R为...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄烈军，周红，郝小江，罗静，陈亮，黄雅思，金军，樊一敏，蹇军友，顾玮，苑春茂，石京山，
申请(专利权)人：遵义医科大学，
类型：发明
国别省市：