一种液基细胞保存液及其制备方法和应用技术

本发明专利技术属于病理检测药剂制备技术领域，具体涉及一种液基细胞保存液及其制备方法和应用。本发明专利技术提供了一种液基细胞保存液，以质量百分含量计，包括如下组分：羧甲基纤维素或羧甲基纤维素衍生物0.05％～0.2％、肽聚糖0.01％～0.1％、羧甲基壳聚糖0.01％～1.0％、酰胺二肽0.1％～0.5％、2

【技术实现步骤摘要】
一种液基细胞保存液及其制备方法和应用


[0001]本专利技术属于检测试剂制备
，具体涉及一种液基细胞保存液及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]世卫组织(WHO)推荐的早期发现癌变的方法，是“脱落细胞学检测”。此方法是将人体各部位的分泌物(如痰液等)、体液(如胸、腹水、脑脊液等)、代谢物(如尿液)以及人为提取的细胞(如刷取的宫颈细胞、细针穿刺样本、各类刷洗液等)中的脱落下的细胞进行有效收集，然后在显微镜下进行形态比对，发现病变。除了宫颈癌外，脱落细胞学技术也可应用于肺癌、膀胱癌、肾癌、食道癌、胃癌等多种肿瘤的早筛、诊断。
[0003]1996年美国FDA批准了第一代液基薄层细胞制片技术应用于妇科宫颈癌早期筛查，可以去除杂质、保存细胞形态和有效搜集细胞，极大提高诊断率。1999年液基细胞学技术正式进入中国，目前是国际上应用最广泛的一种脱落细胞筛查技术。
[0004]液基细胞学的关键技术部分，就是保存液。目前，虽然此类保存液技术的实施方案很多，但存在着处理粘液不彻底、红细胞残片残留、保存液功能单一、需要辅助试剂等诸多需要改进的问题。
[0005]很明显，液基细胞保存液技术，仍需要不断创新，不断优化，不断提升，不断探索出创新技术方案。

技术实现思路

[0006]基于上述技术问题本专利技术的目的在于提供一种液基细胞保存液及其制备方法和应用。本专利技术提供的液基细胞保存液可快速有效去除细胞样本中的粘液、红细胞和细胞碎片，使有效细胞密集均匀分布。
[0007]为了实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：
[0008]本专利技术提供了一种液基细胞保存液，以质量百分含量计，包括如下组分：羧甲基纤维素或羧甲基纤维素衍生物0.05％～0.2％、肽聚糖0.01％～0.1％、羧甲基壳聚糖0.01％～1.0％、酰胺二肽0.1％～0.5％、2
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丙醇5％～40％、磷酸二氢钾0.02％～0.05％、磷酸氢二钠0.1％～0.5％、氯化钠0.5％～1.0％、氯化钾0.01％～0.05％和余量的水。
[0009]优选的，所述液基细胞保存液包括如下组分：羧甲基纤维素或羧甲基纤维素衍生物0.1％、肽聚糖0.025％、羧甲基壳聚糖0.05％、酰胺二肽0.25％、2
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丙醇10％、磷酸二氢钾0.04％、磷酸氢二钠0.26％、氯化钠0.8％、氯化钾0.02％和余量的水。
[0010]优选的，所述羧甲基纤维素衍生物包括改性羧甲基纤维素或羧甲基纤维素盐。
[0011]本专利技术还提供了上述技术方案所述的液基细胞保存液的制备方法，包括：将所述羧甲基纤维素或羧甲基纤维素衍生物与肽聚糖和羧甲基壳聚糖混合，得到第一混合溶液；
[0012]将所述第一混合溶液与磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、氯化钠、氯化钾和酰胺二肽混合，得到第二混合溶液；
[0013]将所述第二混合溶液与2
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丙醇混合，得到所述液基细胞保存液。
[0014]优选的，得到所述第一混合溶液前，还包括搅拌和静置。
[0015]优选的，所述搅拌和静置的次数均为2次；每次静置的时间均为24h。
[0016]本专利技术还提供了上述技术方案中的液基细胞保存液在制备用于检测细胞样本的试剂盒中的应用。
[0017]有益效果：
[0018]本专利技术提供了一种液基细胞保存液，以质量百分含量计，包括如下组分：羧甲基纤维素或羧甲基纤维素衍生物0.05％～0.2％、肽聚糖0.01％～0.1％、羧甲基壳聚糖0.01％～1.0％、酰胺二肽0.1％～0.5％、2
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丙醇5％～40％、磷酸二氢钾0.02％～0.05％、磷酸氢二钠0.1％～0.5％、氯化钠0.5％～1.0％、氯化钾0.01％～0.05％和余量的水。
[0019]本专利技术创新性的将羧甲基纤维素或羧甲基纤维素衍生物、肽聚糖、羧甲基壳聚糖(CMCS)应用于液基细胞保存液中，且上述三者溶于水后，形成一定粘度的高分子聚合物溶液，可以清除粘液和细胞碎片等杂质；结合酰胺二肽去除红细胞的作用，2
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丙醇、磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、氯化钠和氯化钾所具备的固定细胞形态、维持保存液pH值及渗透压的作用，可以达到快速有效去除细胞样本中粘液、红细胞和细胞碎片杂质的作用，保证有效细胞密集均匀分布。
[0020]其次，本专利技术提供的液基细胞保存液不仅可以处理宫颈和宫颈内膜等妇科样本，同时可以处理包括痰液、尿液、胸腹水、脑脊液、心包积液、腹腔冲洗液、肺泡灌洗液、细针穿刺和胆汁在内的众多非妇科样本，适用样本类型广泛。
附图说明
[0021]为了更清楚地说明本专利技术实施例中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍。
[0022]图1为采用实施例1中液基细胞保存液处理后的宫颈细胞制片效果图；
[0023]图2为采用实施例2中液基细胞保存液处理后的血性胸水制片效果图；
[0024]图3为采用实施例3中液基细胞保存液处理后的浓痰制片效果图；
[0025]图4为采用实施例4中液基细胞保存液处理后的甲状腺穿刺样本制片效果图；
[0026]图5为采用实施例5中液基细胞保存液处理后的乳腺穿刺样本制片效果图；
[0027]图6为采用实施例6中液基细胞保存液处理后的尿液样本制片效果图；
[0028]图7为采用实施例7中液基细胞保存液处理后的脑脊液样本制片效果图。
具体实施方式
[0029]本专利技术提供了一种液基细胞保存液，以质量百分含量计，包括如下组分：羧甲基纤维素或羧甲基纤维素衍生物0.05％～0.2％、肽聚糖0.01％～0.1％、羧甲基壳聚糖(CMCS)0.01％～1.0％、酰胺二肽0.1％～0.5％、2
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丙醇5％～40％、磷酸二氢钾0.02％～0.05％、磷酸氢二钠0.1％～0.5％、氯化钠0.5％～1.0％、氯化钾0.01％～0.05％和余量的水。
[0030]以质量百分含量计，本专利技术提供的液基细胞保存液包括0.05％～0.2％的羧甲基纤维素或羧甲基纤维素衍生物，更优选为0.08％～0.18％，进一步优选为0.1％～0.15％，在本专利技术在实施例中，将所述羧甲基纤维素的质量百分含量具体设置为0.05％、0.1％、
0.2％和0.15％，但是不能仅将其认定为本专利技术的全部保护范围。
[0031]本专利技术所述的羧甲基纤维衍生物优选包括改性羧甲基纤维素或羧甲基纤维素盐。本专利技术所述的羧甲基纤维素及制备所述纤维素衍生物的羧甲基纤维素的粘性优选为600～1000mpa.s，更优选为800mpa.s。本专利技术对所述羧甲基纤维素盐没有特殊限定，任何羧甲基纤维素盐均可，如羧甲基纤维素钠。
[0032]本专利技术所述的改性羧甲基纤维素羧甲基纤维素的制备方法优选包括以水溶解羧甲基纤维素，依次与氢氧化钠和冰醋酸混合，静置，得到所述改性羧甲基纤维素。
[0033]本专利技术优选以水溶解羧甲基纤维素，得到羧甲基纤维素溶液。在本专利技术中，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种液基细胞保存液，其特征在于，以质量百分含量计，包括如下组分：羧甲基纤维素或羧甲基纤维素衍生物0.05％～0.2％、肽聚糖0.01％～0.1％、羧甲基壳聚糖0.01％～1.0％、酰胺二肽0.1％～0.5％、2
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丙醇5％～40％、磷酸二氢钾0.02％～0.05％、磷酸氢二钠0.1％～0.5％、氯化钠0.5％～1.0％、氯化钾0.01％～0.05％和余量的水。2.根据权利要求1所述的液基细胞保存液，其特征在于，包括如下组分：羧甲基纤维素或羧甲基纤维素衍生物0.1％、肽聚糖0.025％、羧甲基壳聚糖0.05％、酰胺二肽0.25％、2
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丙醇10％、磷酸二氢钾0.04％、磷酸氢二钠0.26％、氯化钠0.8％、氯化钾0.02％和余量的水。3.根据权利要求1或2所述的液基细胞保存液，其特征在...

【专利技术属性】
技术研发人员：戴鹏，马雪松，余刚，
申请(专利权)人：灵知蓝诺北京生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：