一种用于骨髓瘤诊断的生物标志物、其应用及骨髓瘤诊断试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种用于骨髓瘤诊断的生物标志物、其应用及骨髓瘤诊断试剂盒，用于骨髓瘤诊断的生物标志物为NF

【技术实现步骤摘要】
一种用于骨髓瘤诊断的生物标志物、其应用及骨髓瘤诊断试剂盒


[0001]本专利技术属于生物医学领域，具体涉及一种用于骨髓瘤诊断的生物标志物、其应用及骨髓瘤诊断试剂盒。

技术介绍

[0002]多发性骨髓瘤(Multiple Myeloma，MM)，又称浆细胞骨髓瘤，是一种起源于B细胞系的血液系统恶性肿瘤。其主要的病理学特点为骨髓中恶性浆细胞积累，并产生异常的免疫球蛋白，导致血液或尿中可检测到异常免疫球蛋白水平升高而正常的免疫球蛋白合成减少，异常免疫球蛋白不参与免疫反应并抑制适应性免疫系统。多发性骨髓瘤多见于中老年人，但任何年龄均可发病，且发病初期没有明显症状。随着骨髓瘤的进展，会导致严重的后果，包括反复感染、骨痛、骨质疏松、病理性骨折、高钙血症、骨髓衰竭和肾功能不全等。
[0003]由于骨髓瘤在发病初期没有明显症状，导致较难在疾病早期发现与治疗，从而错过最佳的治疗时间；同时，骨髓瘤本身的高度异质性导致MM的诊断复杂化，对患者及其家庭造成较大的经济负担。因此，开发一种新型有效的骨髓瘤诊断方法具有极其重要的意义。

技术实现思路

[0004]本专利技术旨在至少解决上述现有技术中存在的技术问题之一。为此，本专利技术提出一种用于骨髓瘤诊断的生物标志物，能够对于骨髓瘤进行快速有效的诊断。
[0005]本专利技术的第一个方面，提供了一种用于骨髓瘤诊断的生物标志物，所述生物标志物为NF
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κB non
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Rel亚基RPS3，其氨基酸序列如SEQ ID No.1或SEQ ID No.2所示。
[0006]本专利技术的第二个方面，提供了上述生物标志物在制备骨髓瘤诊断试剂中的应用。
[0007]在本专利技术的一些实施方式中，所述骨髓瘤为多发性骨髓瘤。
[0008]在本专利技术的一些实施方式中，所述骨髓瘤诊断试剂能够定性或定量地检测RPS3的表达。
[0009]在本专利技术中，定性或定量地检测RPS3的表达包括定性地检测RPS3的表达、定量地检测RPS3蛋白的含量以及检测RPS3 mRNA的水平。
[0010]在本专利技术的一些优选的实施方式中，所述定性或定量地检测RPS3的表达量包括：通过免疫组化法定性地检测RPS3的表达；和/或通过Western Blot法定量地检测RPS3蛋白的含量；和/或通过qPCR检测RPS3 mRNA的水平。
[0011]本专利技术的第三个方面，提供了一种骨髓瘤诊断试剂盒，所述试剂盒包含检测RPS3表达量的试剂。
[0012]在本专利技术的一些实施方式中，所述检测RPS3表达量的试剂包含与RPS3进行特异性结合的抗体。
[0013]在本专利技术的一些优选的实施方式中，所述抗体包括如SEQ ID No.3所示的氨基酸序列。
[0014]在本专利技术的一些实施方式中，所述检测RPS3表达量的试剂包含检测RPS3 mRNA水平的引物和/或探针。
[0015]在本专利技术的一些优选的实施方式中，所述引物的核苷酸序列如SEQ ID No.4和/或SEQ ID No.5所示；和/或所述探针的核苷酸序列如SEQ ID No.6所示。
[0016]具体的引物的序列如下：
[0017]hRPS3
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RT
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F:GCCAAAGGCTGCGAGGTTGTGGTGTCTG(SEQ ID NO.4)，
[0018]hRPS3
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RT
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R:GCGGCTCTGGCTTCCCACCCTTCTGTTC(SEQ ID NO.5)。
[0019]在本专利技术的一些更优选的实施方式中，还包括内参引物，所述内参引物的核苷酸序列为SEQ ID No.7和SEQ ID No.8，具体序列信息如下：
[0020]GAPDH
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RT
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F:GGAGCGAGATCCCTCCAAAAT(SEQ ID No.7)，
[0021]GAPDH
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RT
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R:GGCTGTTGTCATACTTCTCATGG(SEQ ID No.8)。
[0022]本专利技术公开了一种用于骨髓瘤诊断的生物标志物、其应用及骨髓瘤诊断试剂盒，至少具有以下有益效果：本专利技术的生物标志物RPS3在骨髓瘤患者体内高表达，与未患骨髓瘤人群的RPS3表达量相比具有显著性差异，能够有效用于骨髓瘤患者的诊断；同时，本专利技术根据该生物标志物开发了相应的骨髓瘤诊断试剂盒，通过对RPS3表达和/或其mRNA的检测，能够有效检测骨髓瘤，该诊断试剂盒对于骨髓瘤诊断具有高灵敏度和特异性。
附图说明
[0023]下面结合附图和实施例对本专利技术做进一步的说明，其中：
[0024]图1为本专利技术实施例1中NCBI的GEO数据库骨髓瘤研究项目(GSE5900)中NF
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κB non
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Rel亚基RPS3表达量数据分析的箱型图；
[0025]图2为本专利技术实施例1中NCBI的GEO数据库骨髓瘤研究项目(GSE6477)中NF
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κB non
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Rel亚基RPS3表达量数据分析的箱型图；
[0026]图3为本专利技术实施例2中诊断试剂盒对样本中RPS3相关mRNA表达量检测的柱状图；
[0027]图4为本专利技术实施例3中诊断试剂盒对样本中RPS3蛋白检测的Western Blot凝胶电泳结果图；
[0028]图5为本专利技术实施例4中诊断试剂盒对样本中RPS3蛋白检测的免疫组化细胞成像结果图。
具体实施方式
[0029]以下将结合实施例对本专利技术的构思及产生的技术效果进行清楚、完整地描述，以充分地理解本专利技术的目的、特征和效果。显然，所描述的实施例只是本专利技术的一部分实施例，而不是全部实施例，基于本专利技术的实施例，本领域的技术人员在不付出创造性劳动的前提下所获得的其他实施例，均属于本专利技术保护的范围。实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法；所使用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到的试剂和材料。
[0030]在本专利技术的实施例中，NF
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κB non
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Rel亚基RPS3的蛋白氨基酸序列包括如下两种：
[0031](1)>sp|P23396|RS3_HUMAN 40S ribosomal protein S3 OS＝Homo sapiens OX＝9606GN＝RPS3 PE＝1 SV＝2，其氨基酸序列(记作SEQ ID No.1)为：
[0032]MAVQISKKRKFVADGIFKAELNEFLTRELAEDGYSGVEVRVTPTRTEIIILATRTQNVLGEKGRRIRELTAVVQKRFGFPEGSVELYAEKVATRGLCAIAQAESLRYKLLGGLAVRRACYGVLRFIMESGAKGCEVVVSGKLRGQRAKSMKFVDGLMIHSGDPVNYYVD本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于骨髓瘤诊断的生物标志物，其特征在于，所述生物标志物为NF
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κBnon
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Rel亚基RPS3，其氨基酸序列如SEQ ID No.1或SEQ ID No.2所示。2.根据权利要求1所述的生物标志物在制备骨髓瘤诊断试剂中的应用。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述骨髓瘤为多发性骨髓瘤。4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述骨髓瘤诊断试剂能够定性或定量地检测RPS3的表达。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述定性或定量地检测RPS3的表达包括：通过免疫组化法定性地检测RPS3的表达；和/或通过Western Blot法定量地检测RPS3蛋白的含量；...

【专利技术属性】
技术研发人员：施菊妹，陈格格，高学洁，冯麒麟，吴晓松，
申请(专利权)人：上海市第十人民医院，
类型：发明
国别省市：