γ谷氨酰转肽酶抑制剂GGsTop在制备治疗哮喘急性发作和难治性哮喘药物中的应用制造技术

本发明专利技术涉及γ谷氨酰转肽酶抑制剂GGsTop在制备治疗哮喘急性发作和难治性哮喘药物中的应用，可有效解决哮喘急性发作和难治性哮喘新的用药问题。使用革兰氏阴性细菌的细胞壁组分脂多糖和过敏原，建立哮喘急性发作和难治性哮喘的动物模型，在LPS和过敏原联合诱导小鼠哮喘急性发作和难治性哮喘模型的基础上，加入GGsTop治疗，通过检测小鼠气道高反应性、肺部组织炎症、支气管肺泡灌洗液和炎症因子等指标判定治疗效果，实现γ谷氨酰转肽酶抑制剂GGsTop在制备治疗哮喘急性发作和难治性哮喘药物中的应用。本发明专利技术γ谷氨酰转肽酶抑制剂GGsTop能够显著缓解哮喘急性发作程度，有效控制难治性哮喘，并且能够替代糖皮质激素，降低长期临床应用糖皮质激素的毒副作用。长期临床应用糖皮质激素的毒副作用。长期临床应用糖皮质激素的毒副作用。

【技术实现步骤摘要】
γ
谷氨酰转肽酶抑制剂GGsTop在制备治疗哮喘急性发作和难治性哮喘药物中的应用


[0001]本专利技术涉及医药领域，特别是一种γ谷氨酰转肽酶抑制剂GGsTop在制备治疗哮喘急性发作和难治性哮喘药物中的应用。

技术介绍

[0002]哮喘是常见的慢性呼吸道炎症性疾病，其主要特征是气道堵塞和支气管痉挛，患者临床表现以呼吸困难和喘息反复发作为主。哮喘是由复杂的环境和遗传因素共同作用引起，患者的临床表现通常出现广泛而多变的可逆性呼气气流受限，导致反复发作的喘息、气促、胸闷和（或）咳嗽等症状，强度随时间变化，多在夜间和（或）清晨发作、加剧，如诊治不及时，随病程的延长可产生气道不可逆性缩窄和气道重塑，严重影响人们的身心健康和生活质量。
[0003]目前，治疗急发性哮喘（急性发作期）和难治性哮喘，是采用抗炎药物（糖皮质激素等）和支气管扩张剂药物（β2
‑
肾上腺素能受体激动剂等）为治疗的主要药物。大部分病人病情可以得到缓解，但是大约10%的患者对糖皮质激素的反应较差，表现出类固醇抗性，病情加重频繁。虽然哮喘治疗取得了一定的进展，但是哮喘患者仍然要面临哮喘急性发作的问题。病情加重的病人往往面临气管重塑增加、肺部炎症升高，严重者可致命，且常伴有对抗炎药物和支气管扩张药物的抵抗。哮喘急性发作的诱因很多，最常见的是环境过敏原暴露和上呼吸道细菌或病毒感染。研究表明革兰氏阴性细菌的细胞壁组分脂多糖（LPS，也称内毒素）与哮喘急性发作以及类固醇抵抗性相关。而常规的糖皮质激素疗法很难控制这种急性发作的发作，因此急需发现和探索新的治疗药物。
[0004]γ谷氨酰转肽酶（GGT）是一类膜结合性高糖基化酶，广泛存在于细菌、酵母、植物和动物等生物体中，能够水解谷胱甘肽（GSH）和其他γ谷氨酰化合物，参与到机体的物质代谢过程。在哺乳动物体内，GGT在多个组织器官中均有表达并发挥作用，GGT表达或活性的异常往往伴随着疾病的发生，且与受其调控的GSH的储量密切相关。
[0005]GGsTop是一种新型的、高选择性的和不可逆的γ谷氨酰转肽酶（GGT）抑制剂，化学名称为(s)
ꢀ‑2‑
Amino
‑4‑
((3
‑
(carboxymethyl)phenoxy)(methoxy)phosphoryl) butanoic acid，资料表明，GGT在血浆谷胱甘肽（GSH）和其s
‑
结合物的代谢过程中起着重要作用，通过水解和/或肽基转移作用来切断γ谷氨酰胺键。GGT存在于肺中，是一种与表面活性剂磷脂相关的水溶性酶，控制LLF（肺内衬液）中谷胱甘肽胞外库的平衡。在人类酶中，Cys
‑
Gly结合位点上的特异性残基通过与C端羧基相互作用，在识别受体分子的Cys
‑
Gly部分中发挥重要作用，但半胱氨酸侧链和Cys
‑
Gly的酰胺键下不能被显著识别。实验发现，在一系列用于构效关系研究的类似物中，GGsTop有效抑制GGT。对GGsTop引起的大肠杆菌和人类GGT灭活率进行了研究，GGsTop对这两个物种的GGT表现出有效的抑制作用，此外，测定GGsTop对人类GGT的动力学参数，其Ki值为0.17mM，在1L
‑
13模型中，给出1L
‑
13和GGsTop的小鼠表现出肺炎症反应，类似于单独给予1L
‑
13的小鼠的反应，然而，相对于1L
‑
13组，1L
‑
13和GGsTop组缓
解甲胆碱诱导的气道高反应性、抑制Muc5ac和Muc5b基本的诱导、减少上层细胞粘液在气道的积累以及提高4倍的LLF谷胱甘肽含量，LLF谷胱甘肽相应的增加可以保护肺部气道上皮细胞免受哮喘病相关炎症的氧化损伤。
[0006]实验表明，GGsTop作为GGT的酶活性抑制剂，能有效降低口腔黏膜炎和缺血再灌注损伤的严重程度。有研究发现，在白介素13（IL
‑
13）诱导的急性呼吸道炎症模型中，GGsTop可以有效缓解IL
‑
13诱导的气道高反应性、降低气道粘液的产生。但是，目前尚无GGsTop在哮喘急性发作和难治性哮喘治疗应用的公开报道。

技术实现思路

[0007]针对上述情况，为克服现有抗炎药物（糖皮质激素等）和支气管扩张剂药物（β2
‑
肾上腺素能受体激动剂等）治疗哮喘急性发作和难治性哮喘效果不佳的缺陷，本专利技术之目的就是提供一种γ谷氨酰转肽酶抑制剂GGsTop在制备治疗哮喘急性发作和难治性哮喘药物中的应用，可有效解决哮喘急性发作和难治性哮喘新的用药问题。
[0008]本专利技术解决的技术方案是，一种γ谷氨酰转肽酶抑制剂GGsTop在制备治疗哮喘急性发作和难治性哮喘药物中的应用，γ谷氨酰转肽酶抑制剂GGsTop分子结构式见图1所示，使用革兰氏阴性细菌的细胞壁组分脂多糖（LPS，也称内毒素）和过敏原，建立哮喘急性发作和难治性哮喘的动物模型，在LPS和过敏原联合诱导小鼠哮喘急性发作和难治性哮喘模型的基础上，加入GGsTop治疗，通过检测小鼠气道高反应性、肺部组织炎症、支气管肺泡灌洗液和炎症因子等指标判定治疗效果，以证明GGsTop具有治疗哮喘急性发作和难治性哮喘的功效，实现γ谷氨酰转肽酶抑制剂GGsTop在制备治疗哮喘急性发作和难治性哮喘药物中的应用。
[0009]本专利技术γ谷氨酰转肽酶抑制剂GGsTop能够显著缓解哮喘急性发作程度，有效控制难治性哮喘，并且能够替代糖皮质激素，降低长期临床应用糖皮质激素的毒副作用，是防治哮喘加重药物上的创新。GGsTop有α碳原子和磷原子两个手性中心，存在四个立体异构体，所有这样的异构体及其混合物都包括在本专利技术的范围内。
附图说明
[0010]图1为本专利技术的γ谷氨酰转肽酶抑制剂GGsTop分子结构式图。
[0011]图2为本专利技术小鼠支气管气道高反应性（AHR），气道对乙酰甲胆碱剂量增加的抵抗力，以相对于基线的百分比变化表示图。
[0012]图3为本专利技术小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）细胞总数计数图。
[0013]图4为本专利技术小鼠支气管气道高反应性（AHR）曲线图（A为气道对乙酰甲胆碱剂量增加的抵抗力，以相对于基线的百分比变化表示，B
‑
E为BALF中淋巴细胞、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、巨噬细胞计数）。
[0014]图5为本专利技术小鼠肺组织评分示意图[A评估肺组织学（400X），B对组织病理学（嗜酸性粒细胞和炎症）评分，C对PAS（粘液分泌）评分]。
[0015]图6为本专利技术小鼠实时荧光定量PCR检测小鼠肺组织相关基因mRNA表达水平图。
[0016]图7为本专利技术小鼠为骨髓中嗜酸性粒细胞和中性粒细胞计数图。
[0017]图8为本专利技术小鼠外周血中淋巴细胞百分比示意图。
[0018]图9为本专利技术小鼠外周血中嗜酸性粒细胞百分比示意图。
[0019]图10为本专利技术小鼠外周血中中性粒本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种γ谷氨酰转肽酶抑制剂GGsTop在制备治疗...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨明，张莉蓉，韩立友，李付广，
申请(专利权)人：杨明，
类型：发明
国别省市：