BrMYC3-2基因过表达在植物生长中的应用制造技术

本发明专利技术公开了BrMYC3

【技术实现步骤摘要】
BrMYC3
‑
2基因过表达在植物生长中的应用
[0001]本申请为申请号2021106169329、申请日2021年06月03日、专利技术名称“BrMYC2/3/4基因不同拷贝在植物生长中的应用”的分案申请。


[0002]本专利技术涉及植物基因工程
，具体涉及BrMYC3
‑
2基因过表达在植物生长中的应用。

技术介绍

[0003]白菜(Brassica rapa ssp.pekinensis)属十字花科(Cruciferae)芸薹属(Brassica)叶用蔬菜，又称
‘
结球白菜
’
、
‘
黄芽菜
’
，原产我国华北，有着悠久的栽培历史，现各地广泛栽培，是十字花科芸薹属栽培面积最大的叶用蔬菜。白菜不仅种类繁多，并且具有耐低温，口感脆嫩等特点，还含有丰富的矿物质、类胡萝卜素和硫苷。白菜中含有丰富的硫苷，因其独特的风味和重要次生代谢产物硫苷及其水解产物的抗病虫能力、防癌抗癌、抗氧化作用而引起植物学、医学、生物学、食品等众多学科研究人员的关注。
[0004]MYC2/3/4转录因子作为bHLH IIIe家族中的重要成员在茉莉酸介导的生物代谢调控活动中扮演重要角色，目前对MYC2/3/4转录因子功能的研究多以模式植物拟南芥为主。虽然白菜与拟南芥拥有共同祖先，但由于其异源三倍体基因组的复杂性，一定程度上影响了硫苷的防御功能在白菜中的应用，有必要深入了解BrMYC2/3/4在植物生长发育及吲哚族硫苷代谢中的功能分化。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是提供BrMYC3
‑
2基因过表达在植物生长中的应用，以解决现有技术的不足。
[0006]本专利技术采用以下技术方案：
[0007]BrMYC3
‑
2基因过表达在促使植物延迟开花，增加植物种子产量中的应用，BrMYC3
‑
2基因编号为BraA06g041690.3C，所述植物为拟南芥。
[0008]本专利技术的有益效果：
[0009]本专利技术发现了BrMYC3
‑
2基因可应用于促使植物延迟开花，增加植物种子产量，所述植物为拟南芥。
[0010]本专利技术为白菜改良育种提供了新的基因资源，从而推进白菜育种进程。
附图说明
[0011]图1是植物表达载体pCAMBIA2302载体的构建过程。
[0012]图2是植物表达载体pCAMBIA2301载体nptII扩增测序比对结果；(A)pCAMBIA2301载体nptII扩增测序DNA比对结果；(B)pCAMBIA2301载体nptII扩增测序氨基酸比对结果。
[0013]图3是植物表达载体pCAMBIA2302酶切检测；缩写：Lane M，DNA marker；Lane H，
ddH2O。
[0014]图4是植物表达载体pCAMBIA2302载体质粒测序比对结果。
[0015]图5是白菜总RNA电泳条带。
[0016]图6是过表达载体的PCR电泳结果分析；(A)p2302MYC4
‑
1过表达载体；(B)从左至右的过表达载体是：p2302MYC3
‑
2，p2302MYC4
‑
2，p2302MYC3
‑
1，p2302MYC2；缩写：Lane M，DNA marker；Lane H，ddH2O。
[0017]图7是p2302MYC2/3/4过表达载体转大肠杆菌菌液PCR产物测序比对结果。
[0018]图8是T3代BrMYC2/3/4转基因拟南芥株系的种子生长指标；(A)成熟种子的表型；(B)解剖的成熟角果的表型；(C)种子长度的对比；(D)种子宽度的对比；(E)千粒重的对比；(F)每个长角果种子数的对比；测试的转基因株系分别是Ctrl、BrMYC2
OE
、BrMYC3
‑1OE
、BrMYC3
‑2OE
、BrMYC4
‑1OE
、BrMYC4
‑2OE
；随机选择各基因型生长状态健康且较一致的种子和长角果，并在相同条件下拍照；数据显示为来自三个独立生物学重复的平均值
±
SD；使用方差分析进行统计分析，然后进行Tukey的多重比较检验(p<0.05)；比例尺＝500μm。
[0019]图9是T3代BrMYC2/3/4转基因拟南芥株系的单株种子总重和千粒重。
[0020]图10是T3代BrMYC2/3/4转基因拟南芥株系的根和下胚轴长度；(A)6天大的幼苗的表型；(B)根长度的对比；(C)下胚轴长度的对比；转基因株系分别是Ctrl、BrMYC2
OE
、BrMYC3
‑1OE
、BrMYC3
‑2OE
、BrMYC4
‑1OE
、BrMYC4
‑2OE
；数据显示为来自三个独立生物学重复的平均值
±
SD；使用方差分析进行统计分析，然后进行Tukey的多重比较检验(p<0.05)；比例尺＝1cm。
[0021]图11是T3代BrMYC2/3/4转基因拟南芥株系营养阶段转变时间差异；(A)28天大的转基因拟南芥表型；(B)叶片表型，数字显示的是出现表皮毛的第一片莲座叶叶位；(C)短时间内转基因拟南芥的叶片生长速率；种植后第12、16、20、24和28天对叶数进行统计；转基因株系分别是Ctrl、BrMYC2
OE
、BrMYC3
‑1OE
、BrMYC3
‑2OE
、BrMYC4
‑1OE
、BrMYC4
‑2OE
；数据显示为来自三个独立生物学重复的平均值
±
SD；使用方差分析进行统计分析，然后进行Tukey的多重比较检验(p<0.05)；比例尺＝1cm。
[0022]图12是T3代BrMYC2/3/4转基因拟南芥株系的株高和开花时间；(A)3周大拟南芥的表型；(B)抽薹时间；(C)抽薹时的莲座叶片数量；(D)7周大拟南芥的表型；(E)植株高度；(F)分枝数枝数量；转基因株系分别是Ctrl、BrMYC2
OE
、BrMYC3
‑1OE
、BrMYC3
‑2OE
、BrMYC4
‑1OE
、BrMYC4
‑2OE
；数据显示为来自三个独立生物学重复的平均值
±
SD；使用方差分析进行统计分析，然后进行Tukey的多重比较检验(p<0.05)；比例尺＝1cm。
[0023]图13是T3代BrMYC2/3/4转基因拟南芥株系莲座叶的冻干粉在PDA上对核盘菌生长的抑制情况；从左到右分别是：ddH2O，Ctrl、BrMYC2
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.BrMYC3
‑
2基因过表达在促使植物延迟开花，增加植物种子产量中的应用，BrMY...

【专利技术属性】
技术研发人员：臧运祥，滕芝妍，
申请(专利权)人：浙江农林大学，
类型：发明
国别省市：