【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗VEGF蛋白组合物及其制备方法
[0001]序列表
[0002]本申请含有序列表，所述序列表已以ASCII格式以电子方式提交并且特此通过引用整体并入。所述ASCII副本创建于2020年8月13日，命名为070816
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02301_SL.txt并且大小为134,385字节。
[0003]相关申请的交叉引用
[0004]本申请要求2020年8月13日提交的美国临时专利申请第63/065,012号的优先权和权益，所述专利申请的内容通过引用整体并入本文。
[0005]本专利技术大体上涉及抗VEGF组合物及其制备方法。
技术介绍
[0006]基于蛋白质的生物药物组合物已成为用于研究、治疗眼科疾病、癌症、自身免疫疾病、感染以及其他疾病和病症的重要产品。生物医药代表医药行业增长最快的产品领域之一。
[0007]已识别出一类对血管内皮细胞具有选择性的细胞衍生的二聚促分裂原，并将其命名为血管内皮细胞生长因子(VEGF)。
[0008]持续的血管生成(angiogenesis)...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种产生阿柏西普的方法，所述方法包括：(a)产生在化学成分确定的培养基(CDM)中培养的细胞的澄清收获物；(b)使用亲和色谱柱结合来自所述澄清收获物的阿柏西普，所述亲和色谱柱包含能够与所述阿柏西普结合或相互作用的多肽，其中所述多肽是抗体、融合蛋白、ScFv或其片段；(c)洗脱步骤(b)的所述阿柏西普，形成亲和洗脱液；任选地，(d)使(c)的所述洗脱的阿柏西普经历第二色谱捕获步骤；以及(e)收集流通级分，其中所述流通级分具有阿柏西普。2.如权利要求1所述的方法，其中能够与所述阿柏西普结合或相互作用的所述多肽包含选自SEQ ID NO.:72、SEQ ID NO.:73、SEQ ID NO.:74、SEQ ID NO.:75、SEQ ID NO.:76、SEQ ID NO.:77、SEQ ID NO.:78、SEQ ID NO.:79和SEQ ID NO.:80的分离的氨基酸序列。3.如权利要求1所述的方法，所述方法还包括使用平衡缓冲液平衡(b)的所述亲和色谱柱。4.如权利要求3所述的方法，其中所述平衡缓冲液是杜尔贝科磷酸盐缓冲盐水或Tris盐酸盐。5.如权利要求4所述的方法，其中所述平衡缓冲液具有约8.3至约8.6的pH值。6.如权利要求1所述的方法，所述方法还包括用平衡缓冲液洗涤柱(d)以获得一个或多个流通级分。7.如权利要求6所述的方法，其中所述平衡缓冲液是杜尔贝科磷酸盐缓冲盐水并具有约7.0至约8.6的pH值。8.如权利要求1所述的方法，所述方法还包括利用洗脱缓冲液经历(b)的柱以获得一个或多个洗脱级分。9.如权利要求8所述的方法，其中所述洗脱缓冲液包含pH值为约2.5的100mM甘氨酸缓冲液。10.如权利要求8所述的方法，其中所述洗脱缓冲液的pH值介于约2.0至约3.5之间。11.如权利要求8所述的方法，所述方法还包括通过添加中和缓冲液来中和所述洗脱级分。12.如权利要求11所述的方法，其中所述中和缓冲液是Tris盐酸盐。13.如权利要求1所述的方法，其中与所述澄清收获物中的宿主细胞蛋白的量相比，(c)中的宿主细胞蛋白的量显著降低了约90％、约95％、约98％或约99％。14.如权利要求1所述的方法，其中(d)的所述第二捕获色谱包括阴离子交换色谱(AEX)。15.如权利要求14所述的方法，其中所述AEX柱的所述平衡缓冲液和洗涤缓冲液的电导率均可为约1.50至约3.0mS/cm。16.如权利要求14所述的方法，其中来自(e)的所述一个或多个流通级分的阿柏西普包含少于20％的阿柏西普的总酸性种类，其中酸性种类对应于比阿柏西普的阳离子交换色谱(CEX)色谱图中的主峰更早洗脱的峰，并且其中色谱图是使用20mM 2
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