一种玉米miRNA的应用制造技术

本发明专利技术提供了一种玉米miRNA的应用，玉米miRNA命名为zma

【技术实现步骤摘要】
一种玉米miRNA的应用


[0001]本专利技术属于玉米miRNA
，具体涉及一种玉米miRNA的应用。

技术介绍

[0002]拟轮枝镰孢菌(Fusarium verticillioides)是一种能引起众多作物流行性病害的病原真菌，尤其对于玉米(Zea mays L.)的危害最为严重。玉米是我国最重要的粮食作物之一，也是重要的饲料和工业原料，其生产对我国粮食安全起着举足轻重的作用。然而，在玉米的整个生长发育过程中，常常会遭受拟轮枝镰孢菌的侵害，进而发生苗枯、茎腐、穗腐和种腐等多种病害。在玉米幼苗发育早期，感染拟轮枝镰孢菌会影响玉米的发芽率、幼苗群体的长势、植株的高度等，严重者造成幼苗枯萎死亡。在玉米发育中期，拟轮枝镰孢菌感染会造成玉米茎秆腐烂枯败，进而导致植株断裂倒伏。在玉米籽粒灌浆期，拟轮枝镰孢菌会侵染玉米籽粒或者穗轴，造成穗轴和籽粒霉变腐烂，因此严重影响玉米产量。在玉米种子贮藏期，携带拟轮枝镰孢菌的种子会霉变，或者在种子发芽后引起新一轮的幼苗、茎秆或穗子的感染。最重要的是，拟轮枝镰孢菌可产生伏马菌素(fumonisin)，这是一种真本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种玉米miRNA的应用，其特征在于，所述玉米miRNA命名为zma
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unmiR4，所述zma
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unmiR4响应拟轮枝镰孢菌Fusarium verticillioides的侵染，用于调控植株对拟轮枝镰孢菌Fusarium verticillioides的抵抗能力，所述zma
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unmiR4的成熟转录本核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。2.根据权利要求1所述的一种玉米miRNA的应用，其特征在于，所述zma
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unmiR4响应拟轮枝镰孢菌Fusarium verticillioides的侵染时，所述zma
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unmiR4的初级转录本在抗病玉米杂交系BT
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1中下调，在感病玉米自交系N6中上调；所述zma
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unmiR4的初级转录本的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。3.根据权利要求1所述的一种玉米miRNA的应用，其特征在于，所述zma
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unmiR4通过在拟南芥中异源表达，调节拟南芥对拟轮枝镰孢菌的抵抗能力。4.根据权利要求3所述的一种玉米miRNA的应用，其特征在于，所述zma
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unmiR4通过在拟南芥中异源表达的方法为：S1、用XhoI/SacI双酶切pJim19载体，在温度为37℃的条件下酶切反应6h，将酶切产物用1％琼脂糖凝胶分离，切下11Kb大小的条带，用DNA凝胶回收试剂盒回收产物，得到XhoI/SacI双酶切pJim19载体的回收产物；所述酶切反应的体系为：XhoI酶1μL，SacI酶1μL，Cutsmart buffer 5μL,pJim19载体10μL,灭菌超纯水补至50μL；S2、以玉米自交系B73的cDNA文库为模板，进行PCR扩增，克隆zma
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unmiR4的初级转录本，将扩增产物用1％琼脂糖凝胶分离，切下498bp大小的条带，用DNA凝胶回收试剂盒回收PCR产物，得到PCR回收产物，即为zma
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unmiR4的初级转录本；所述PCR扩增的体系为：2
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KOD Mix 10μL，特异性引物F1μL、特异性引物R1μL、玉米自交系B73的cDNA文库1μL，灭菌超纯水补至20μL；所述特异性引物F的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示，所述特异性引物R的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示；所述PCR扩增的程序为：98℃预变性10min；98℃变性10s，55℃退火10s，68℃延伸40s，扩增40个循环；68℃延伸10min；S3、利用同源重组方法将zma
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unmiR4的初级转录本连接至pJim19载体的XhoI/SacI之间，在温度为50℃的条件下连接反应25min，得到连接产物，将所述连接产物转化到大肠杆菌中，扩增繁殖，利用质粒提取试剂盒，得到pJim19
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zma
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unmiR4载体质粒；所述zma
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unmiR4的初级转录本的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示；所述pJim19
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zma
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unmiR4载体质粒能表达所述zma
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unmiR4的成熟转录本的核苷酸序列；所述连接...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐玉芳，张会勇，李涛，汪仁洁，
申请(专利权)人：河南农业大学，
类型：发明
国别省市：