CE-SDS方法优化及其在抗体纯度检测中的应用技术

本发明专利技术公开了一种优化的CE

【技术实现步骤摘要】
CE
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SDS方法优化及其在抗体纯度检测中的应用


[0001]本方法涉及生物
，具体涉及一种优化的CE
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SDS纯度检测方法及其在单克隆抗体纯度检测中的应用。

技术介绍

[0002]抗体纯度是抗体生产过程中的重要指标，SEC
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HPLC(分子筛排阻层析高效液相色谱)和CE
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SDS(十二烷基硫酸钠毛细管凝胶电泳)是目前最常用于纯度检测的两种方法。其中，SEC
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HPLC是检测抗体在非还原非变性条件下的纯度，具有高通量、重复性好等优点；考虑到抗体本身是由两条重链和两条轻链组成的异源四聚体，只凭借SEC
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HPLC的方法无法对抗体结构的完整性作出准确判断，因此，CE
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SDS在近几年也被广泛应用于抗体纯度的检测。
[0003]CE
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SDS是一种在变性条件下检测抗体纯度的方法，方法原理与SDS
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PAGE(十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳)类似，但与SDS
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...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种优化的CE
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SDS纯度检测方法，包括如下步骤：1).样品处理液的配置：分别配置非还原样品处理液和还原样品处理液；所述非还原样品处理液为：20μL样品缓冲液与2μLIAM储液和1μL SDS储液混合；所述还原样品处理液为：20μL样品缓冲液与1.2μL DTT储液混合；所述IAM储液浓度为0.5M，所述SDS储液浓度为10％(w/v)，所述DTT储液浓度为1M；2).将步骤1)所制备的样品处理液与样品混合，具体包括以下步骤：a.将21μL非还原处理液与3μL抗体溶液混合制得非还原混合样品，b.将21μL还原处理液与3μL抗体溶液混合制得还原混合样品；3).加热处理步骤2)所制备的混合样品；4).加热样品的稀释：在步骤3)加热处理过的混合样品中分别加入去离子水；5)上样和数据分析。2.如权利要求1所述的检测方法，其中，步骤1)中IAM、SDS和DTT储液均使用0.22μm滤膜进行过滤处理。3.如权利要求1所述的检测方法，其中，步骤2)中所述抗体为单克隆抗体。4.如权利要求1所述的检...

【专利技术属性】
技术研发人员：李静雯，张瑜，张为杰，王卓智，顾继杰，陈智胜，
申请(专利权)人：上海药明生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：