一种基于印迹MOFs探针高灵敏快速检测农残的方法技术

本发明专利技术属于农产品安全检测技术领域，涉及一种基于印迹MOFs探针高灵敏快速检测农残的方法。首先构建了基于MOFs仿酶探针的比色试纸条，采用分子印迹MOFs仿酶为比色探针，催化氧化底物使体系的颜色发生变化；以低成本滤纸为比色探针负载基底，划分为质控区、标准区和检测区；质控区可以依据待测环境的温度、湿度和光照等选择最佳的比色分析参数；标准区是通过滴加不同浓度标准品得到标准比色区域并用于建立比色分析数学模型；检测区用于实际样品的检测。通过比色试纸条即可初步判定待测样品中农残的浓度范围；进一步通过反应体系颜色信号计算其灰度值，建立比色分析模型，实现多个复杂基质样品中痕量农残的灵敏、准确、实时定量分析。分析。分析。

【技术实现步骤摘要】
一种基于印迹MOFs探针高灵敏快速检测农残的方法


[0001]本专利技术属于农产品安全检测
，具体涉及一种基于印迹MOFs探针高灵敏快速检测农残的方法。

技术介绍

[0002]农药的广泛使用有效控制了农作物生长过程中病虫害的侵害，但由于其难降解、强毒性、易残留等特点，极易在农产品、土壤、水源中富集，对生态环境、人类健康均造成了较大威胁；因而对其残留的检测至关重要。目前农残的检测方法主要有高效液相色谱法、液质联用技术等传统方法，以及近年来兴起的电化学、拉曼、荧光等快速检测方法；这些方法检测灵敏度高、结果准确，但通常需要在实验室条件下进行，存在试剂用量多、依赖于专用仪器设备，且对操作人员的技术水平要求较高，难以满足农残现场、快速检测的需求；因此，开发一种原位监测、快速便携的野外实地分析方法尤为重要。
[0003]近来，现有的农药残留比色探针检测方法存在两方面的不足，一是现有的成品化试纸条无法依据实施条件及时调节分析参数，由于比色分析方法易受温度、湿度、光照等周围环境影响，致使试纸条产生不准确的信号输出；二是当待测样品浓度过高或者过低时本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于印迹MOFs探针高灵敏快速检测农残的方法，其特征在于，步骤如下：步骤1.1：将MOFs和氨丙基三乙氧基硅溶于氨水中，得到混合溶液；然后选择一种农药标品，记为NY，加入上述混合溶液中进行第一次搅拌，搅拌后再加入硅酸乙酯进行第二次搅拌，搅拌后经离心、洗涤、干燥，得到印迹MOFs仿酶探针；步骤1.2：取普通滤纸分为A、B、C三个区域，其中A区为质控区，B区为标准区，C区为检测区；步骤1.3：将质控区分为两个质控分区，分别标记为质控分区1、质控分区2；将质控分区1从左到右按照列分为n个区域，这n个区域分别标记为H1、H2、H3……
H
n
‑1、H
n
；质控分区2也从左到右按照列分为m个区域，这m个区域分别标记为I1、I2、I3……
I
m
‑1、I
m
；其中n、m均为大于1的整数；步骤2.1：质控区的建立；步骤2.1.1：确定最适印迹MOFs仿酶探针溶液的浓度；将步骤1.1制备的印迹MOFs仿酶探针加入乙醇中，得到不同浓度印迹MOFs仿酶探针溶液依次标记为1、2，
……
、n
‑
1、n，然后将V1体积的1、2，
……
、n
‑
1、n的印迹MOFs仿酶探针溶液分别对应滴加在质控分区1的H1、H2、H3……
H
n
‑1、H
n
的区域上，待其干燥；然后取步骤1.1中的NY溶于水中，形成NY溶液；再于质控分区1的H1、H2、H3……
H
n
‑1、H
n
的区域上均滴加上V2体积的NY溶液；反应一段时间后，再于质控分区1的H1、H2、H3……
H
n
‑1、H
n
的区域上依次滴加V3体积的显色剂，其中显色剂由3,3',5,5'
‑
四甲基联苯胺、过氧化氢和pH为4.0的NaAc
‑
HAC组成；然后观察质控分区1中H1、H2、H3……
H
n
‑1、H
n
的区域的颜色变化，并获取各区域的图片及对应的RGB值，进一步计算其灰度值，灰度值最大的区域所对应的印迹MOFs仿酶探针溶液浓度即为最适印迹MOFs仿酶探针溶液浓度；步骤2.1.2：确定最适显色剂的浓度；经步骤2.1.1确定最适印迹MOFs仿酶探针溶液浓度后，再将V4体积最适浓度的印迹MOFs仿酶探针溶液依次滴加在质控分区2所对应的I1、I2、I3……
I
m
‑1、I
m
上待其干燥后，在质控分区2的I1、I2、I3……
I
m
‑1、I
m
的区域上再滴加上V5体积步骤2.1.1中的NY溶液，反应一段时间后，再于质控分区2的I1、I2、I3……
I
m
‑1、I
m
的区域上滴加上V6体积不同浓度的显色剂，其中显色剂由3,3',5,5'
‑
四甲基联苯胺、过氧化氢和pH为4.0的NaAc
‑
HAC组成；然后观察，质控分区2中I1、I2、I3……
I
m
‑1、I
m
的颜色变化，并获取各区域的图片及对应的RGB值，进一步计算其灰度值，灰度值最大的区域所对应的显色剂浓度即为最适显色剂浓度；步骤2.2：标准区的建立；将标准区从上到下分为n个区域并依次标记为E1、E2、E3、
……
E
n
‑1、E
n
；经步骤2.1.1确定最适印迹MOFs仿酶探针溶液浓度后，将V7体积最适印迹MOFs仿酶探针溶液浓度分别滴在对应的标准区E1、E2、E3、
……
E
n
‑1、E
n
表面，待其干燥后，配制不同浓度的NY溶液并将其标记为C1、C2、
……
、C
n
‑1、C
n
，然后将V8体积不同浓度的NY溶液分别滴在对应的E1、E2、E3、
……
E
n
‑1、E
n
区域，进行第一次反应；再根据步骤2.1.2中确定的最适显色剂浓度，再在E1、E2、E3、
……
E
n
‑1、E
n
区域滴加上V9体积的显色剂后进行第二次反应，从而建立标准区的标准比色卡；标准区的标准比色卡的颜色维持时间20min以上不变色；步骤2.3：获取步骤2.2的标准区的标准比色卡对应检测不同浓度NY溶液的显色图片，分析出NY溶液在不同浓度下的RGB值，根据公式(1)计算其对应的Gray值分别记为G1、G2，
G3、
……
G
n
‑1、G
n
；其中R指的是图片提取的red值，G是图片提取的green值，B指的是图片提取的blue值，Gray是灰度值；并将根据公式(1)计算的标准区的Gray值和对应NY溶液浓度m构建比色分析数学模型，得到Y＝k*m+b，其中b、k为常数；m是NY溶液浓度，单位μM；标准区NY溶液判别值记为P，P的取值区间为M*(1
‑
10％)～M*(1+10％)，其中M是标准区不同NY溶液浓度所得的灰度值的中间值；步骤2.4：检测区的建立；将检测区从左到右按列平均分为N个区域，并将N个区域，即N列的上部分别标记为样品1、样品2、样品3、
……
、样品n
‑
1、样品n；其中样品1之下的区域分别划分为11、12、13、
……1i
；样品2之下的区域分别划分为21、22、23、
……2i
；...

【专利技术属性】
技术研发人员：张新爱，皇雪月，石吉勇，邹小波，黄晓玮，李志华，郭志明，张迪，翟晓东，胡雪桃，申婷婷，
申请(专利权)人：江苏大学，
类型：发明
国别省市：