一种检测牛乳过敏原α-乳白蛋白的SERS免疫层析试纸条及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种检测牛乳过敏原α

【技术实现步骤摘要】
一种检测牛乳过敏原
α
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乳白蛋白的SERS免疫层析试纸条及其应用


[0001]本专利技术涉及一种SERS免疫层析试纸条，具体涉及一种检测牛乳过敏原α
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乳白蛋白的SERS免疫层析试纸条及其应用，属于食品安全检测


技术介绍

[0002]牛奶是维生素(维生素A、维生素B6)和矿物质(钙)的摄入来源，是幼儿生长发育所必需的营养物质，对人体骨骼、头发、皮肤和牙齿起着关键作用，是婴儿最先食用的食物之一。然而，牛奶也是儿童早期食物过敏第一个也是最常出现的原因之一。过敏原引起的过敏性疾病有两个显著特点，一是始于婴幼儿期，且对食物的过敏终生不变；二是致敏剂量存在极大的人群差异。因此，有些牛乳过敏患者会因潜在的极少量牛奶而出现过敏反应。食物中的过敏原大都是蛋白质类物质，每100毫升牛乳约含有3克蛋白质，至少包含25种不同的蛋白质，所有这些蛋白质都有可能为过敏原，目前认为α
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乳白蛋白(α
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Lactalbumin，α
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LA)是牛乳主要过敏原之一。...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检测牛乳过敏原α
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乳白蛋白的SERS免疫层析试纸条，其特征在于，依次包括底板、样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜(NC膜)和吸水垫，所述NC膜上设有检测线(T线)和控制线(C线)，其中：所述T线设置于靠近结合垫一端，其上固定有捕获抗体α
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乳白蛋白鼠单抗；所述C线设置于靠近吸附垫一端，其上固定有羊抗兔二抗；所述结合垫上喷有SERS探针，所述SERS探针由银包金纳米粒子、拉曼信标分子和检测抗体α
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乳白蛋白兔多抗偶联结合得到。2.根据权利要求1所述检测牛乳过敏原α
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乳白蛋白的SERS免疫层析试纸条，其特征在于，所述银包金纳米粒子的粒径为20
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40nm，形状为球形，选自不同银壳层厚度的银包金纳米粒子中的一种，和/或所述拉曼信标分子为拉曼信标分子4
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巯基苯甲酸(4
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MBA)，和/或所述检测牛乳过敏原α
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乳白蛋白的SERS免疫层析试纸条的宽度为3
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4mm。3.根据权利要求1所述检测牛乳过敏原α
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乳白蛋白的SERS免疫层析试纸条，其特征在于，所述拉曼信标分子与银包金纳米粒子先以共价方式偶联，再偶联到所述检测抗体α
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乳白蛋白兔多抗上得到SERS探针。4.权利要求1至3任一项所述检测牛乳过敏原α
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乳白蛋白的SERS免疫层析试纸条的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)制备银包金纳米粒子；(2)检测抗体α
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乳白蛋白兔多抗与银包金纳米粒子、拉曼信标分子结合形成SERS探针，喷于结合垫上；(3)捕获抗体α
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乳白蛋白鼠单抗划膜于NC膜上的T线处，羊抗兔二抗划膜于NC膜上的C线处；(4)样品垫、结合垫、NC膜和吸水垫依次层叠贴在所述底板上，切片组装，即得。5.根据权利要求4所述检测牛乳过敏原α
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乳白蛋白的SERS免疫层析试纸条的制备方法，其特征在于，所述银包金纳米粒子通过10mM硝酸银溶液还原制备得到，其中所述10mM硝酸银溶液的添加量为1
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5mL，和/或所述10mM硝酸银溶液的滴加速度为0.1
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0.3mL/min。6.根据权利要求4所述检测牛乳过敏原α
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乳白蛋白的SERS免疫层析试纸条的制备方法，其特征在于，所述SERS探针的制备方法包括：将银包金纳米粒子与1mM的拉曼信标分子4
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MBA混匀后，调节pH值为7.0
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9.0，于玻璃瓶内磁力搅拌8
–
12h，于6000
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8000g下离心10
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20min后去上清，重悬于水中，形成拉曼探针；然后加入检测抗体α
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乳白蛋白兔多抗，室温振荡反应2
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4h，调节pH值为8.0
–
9.0，加入牛血清白蛋白(BSA)，室温振荡8
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12h，得到SERS探针；其中：所述拉曼探针中银包金纳米粒子与4
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MBA的体积比为1000
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2000:1；和/或所述SERS探针中所述检测抗体α
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乳白...

【专利技术属性】
技术研发人员：魏新林，李靖，朱永智，徐佳，彭斓兰，魏康，王元凤，
申请(专利权)人：上海师范大学，
类型：发明
国别省市：