晶状体球蛋白αA在检测或诊断类天疱疮中的用途制造技术

本发明专利技术公开了晶状体球蛋白αA在检测或诊断类天疱疮中的用途。本发明专利技术人发现并鉴定了一个新的类天疱疮的自身抗原——晶状体球蛋白αA(Crystallin AlphaA，CRYAA)。通过对该蛋白的自身抗体进行检测能够提高对类天疱疮检测的准确性，避免假阴性的出现。基于该自身抗原的发现，本发明专利技术还提供了一种检测抗人CRYAAIgG抗体的ELISA试剂盒及其检测方法，所述的试剂盒中含有CRYAA重组蛋白包被的微孔条带，通过该试剂盒能够实现对类天疱疮患者血清中CRYAAIgG自身抗体的检测。本发明专利技术的提出为类天疱疮的检测和诊断提供了新的技术手段。疱疮的检测和诊断提供了新的技术手段。

【技术实现步骤摘要】
晶状体球蛋白
α
A在检测或诊断类天疱疮中的用途


[0001]本专利技术涉及一种新的类天疱疮的自身抗原及其用途，特别涉及一种新的类天疱疮的自身抗原——晶状体球蛋白αA(CrystallinAlphaA，CRYAA)及其检测或诊断类天疱疮中的用途。本专利技术属于医药


技术介绍

[0002]类天疱疮是一类主要影响老年人的皮肤自身免疫性水疱病，主要表现为皮肤和口腔粘膜、眼粘膜及其它粘膜的损伤。单纯依靠临床表现无法进行诊断，目前必须要依靠患者血清中自身抗体的检出才能确诊。类天疱疮已知的自身抗原包括BP180、laminin gamma 1、collagenVII、laminin
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332、integrinα6β4。由于未知的自身抗原的存在，目前大概有20％的类天疱疮无法进行精确的诊断。
[0003]近期，本专利技术人发现并鉴定了一个新的类天疱疮的自身抗原——晶状体球蛋白αA(CrystallinAlphaA，CRYAA)。本专利技术专利技术人通过正常人皮肤组织切片的免疫荧光染色，发现CRYAA主要分布本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.晶状体球蛋白αA(Crystallin Alpha A，CRYAA)在制备检测或诊断类天疱疮试剂中的用途。2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的试剂为通过ELISA方法检测人抗CRYAA抗体的试剂。3.一种用于检测或诊断类天疱疮的ELISA试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒中含有CRYAA重组蛋白包被的微孔条带。4.如权利要求3所示的ELISA试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒中还含有标准血清1、标准血清2、酶标抗体、稀释液、反应缓冲液、清洗缓冲液、酶基质液以及终止液。5.如权利要求4所述的ELISA试剂盒，其特征在于，所述的标准血清1为含0.05％w/v叠氮钠的反应缓冲液；所述的标准血清2为含有100U/ml的CRYAA IgG抗体以及0.05％w/v叠氮钠的反应缓冲液；所述的酶标抗体为辣根过氧化物酶标记的兔抗人IgG抗体；所述的反应缓冲液为含0.05％v/v Tween20和0.05％w/vNaN3的1xPBS，所述的清洗缓冲液为含0.5％v/vTween20的10xPBS；所述的酶基质液为3，3
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，5，5
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四甲级联苯胺二氢氯化物/过氧化氢(TMB/H2O2)溶液；所述的终止液为0.5N盐酸溶液。6.如权利要求3所述的ELISA试剂盒，其特征在于，所述的CRYAA重组蛋白包被的微孔条带通过以下方法制备得到：将原核表达获得纯化后的人CRYAA重组蛋白用PBS溶解，储存浓度为1mg/ml；包被前使用PBS进行1000倍稀释，使得蛋白终浓度达到1μg/ml，取96孔板进行蛋白的包被，每孔加入稀释后的1μg/ml的CRYAA重组蛋白溶液100μl，4℃进行包被12
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【专利技术属性】
技术研发人员：权利要求书二页说明书六页序列表二页附图一页，
申请(专利权)人：唐先玲，
类型：发明
国别省市：