一种快速选育糯质单倍体诱导系的双重诱导方法技术

本发明专利技术公开了一种快速选育糯质单倍体诱导系的双重诱导方法，属于玉米遗传育种技术领域。本发明专利技术公开的一种快速选育糯质单倍体诱导系的双重诱导方法，包括糯玉米诱导系F2杂交分离群体组建、高油型单倍体诱导系诱导、利用双PARMS引物扫描DH系基因型、入选DH系糯性验证及诱导率测定。本发明专利技术的“双重诱导”方法，是一种可在3年完成的诱导系选育方法，且分子标记及诱导率鉴定次数减少至1次，减少大量劳动力，提升育种效率。提升育种效率。提升育种效率。

【技术实现步骤摘要】
一种快速选育糯质单倍体诱导系的双重诱导方法


[0001]本专利技术涉及玉米遗传育种
，更具体的说是涉及一种快速选育糯质单倍体诱导系的双重诱导方法。

技术介绍

[0002]玉米双单倍体育种(DH，Doubled Haploid Breeding)技术是现代玉米育种体系的核心技术。近年来，玉米单倍体育种技术在糯玉米中实现应用，但研究基础薄弱，导致糯玉米育种缓慢低效，随着玉米单倍体诱导机理的研究深入，诱导系基因片段渗入现象已被证实，即含有诱导系基因片段的DH系会表现出非母本特性。诱导系属常规玉米范畴，若利用常规玉米诱导系诱导鲜食糯玉米，则产生的糯玉米DH系可能存在由于基因渗入而造成品质下降和血缘混乱的风险。
[0003]糯玉米的形成是由于关键基因waxy发生隐形突变导致，利用B73序列设计引物并进行PCR测序可有效识别waxy基因发生的突变类型；2017年发现的单倍体诱导关键基因ZmPLA1(GRMZM2G471240)(kelliher,et al.,2017；Liu,et al.,2017)和2019年发现的单倍体高频诱导基因ZmD本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种快速选育糯质单倍体诱导系的双重诱导方法，其特征在于，具体步骤如下：(1)糯玉米诱导系F2杂交分离群体组建，组建步骤如下：
①
组配杂交组合F1：JNX22
×
CAU5，完成“一重诱导”；
②
挑选胚与糊粉层均为紫黑色的F1籽粒自交获得F2，选择糯质且胚与糊粉层均为紫黑色的F2代籽粒种植形成F2分离群体，单株自交；分穗挑选糯质且胚与糊粉层均为紫黑色的籽粒，组建F
2:3
糯质家系群体并种植成穗行；(2)高油型单倍体诱导系诱导：利用CHOI3对F
2:3
群体进行诱导杂交，利用单倍体核磁共振自动分拣系统进行单倍体籽粒识别，含油量阈值设为3％；剔除虫蚀霉变粒和发育异常粒，使用浓度为0.06％(w/v)的秋水仙素浸泡处理单倍体籽粒并播种，加倍成功的单倍体植株自交并繁殖后形成DH群体，完成“二重诱导”；(3)利用双PARMS引物扫描DH系基因型，针对ZmPLA1和ZmDMP两个基因突变型设计双PARMS引物，使用酶标仪对PCR产物在包含2种荧光信号下进行DH系基因型扫描，筛选具备双突变的DH个体；(4)入选DH系糯性验证及诱导率测定，验证分为两步：第一步，肉眼观察及碘染色法鉴别杂交果穗籽粒是否为糯质，筛选出糯质诱导系测定诱导率；第二步，以糯质诱导系为父本，以糯玉米杂交种吉农糯7号为母本进行杂交诱导，用肉眼识别杂交当代籽粒中的拟单倍体籽粒，田间种植并剔除杂合植株，最终确定单倍体诱导率。2.根据权利要求1所述的一种快速选育糯质单倍体诱导系的双重诱导方法，其特征在于，步骤(1)
②
分穗挑选糯质的观察指标为：籽粒晾干后，相比于常规玉米的透明角质，肉眼观察为不透明、蜡质状的玉米粒。3.根据权利要求1所述的一种快速选育糯质单倍体诱导系的双重诱导方法，其特征在于，步骤(3)所述双PARMS引物序列如下：ZmP...

【专利技术属性】
技术研发人员：王薪淇，孟令聪，卢实，周德龙，周旭东，董亚琳，岳尧海，王敏，周小辉，代秀云，侯国生，李穆，郑淑波，张建新，路明，刘文国，
申请(专利权)人：吉林省农业科学院，
类型：发明
国别省市：