一种具有降血糖功效的胶原蛋白酶解物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种具有降血糖功效的胶原蛋白酶解物及其制备方法和应用，所述酶解物含有由4

【技术实现步骤摘要】
一种具有降血糖功效的胶原蛋白酶解物及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及针对2型糖尿病的生物活性肽，具体涉及一种具有降血糖功效的胶原蛋白酶解物及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]二肽基肽酶
‑
IV(DPP
‑
IV)是治疗2型糖尿病的重要靶点。目前，已被批准在临床中使用的DPP
‑
IV抑制剂主要有西格列汀、沙格列汀等。这些药物虽然能够有效调节糖尿病患者的血糖水平，但或多或少会带来一些副作用，如恶心、瘙痒和鼻咽炎等，而且还一直存在着关于长期服用是否会产生严重副作用的争议。因此，如果能从天然食物中获得具有DPP
‑
IV抑制活性的功能物质，将对人类健康带来益处。
[0003]目前，有报道某些多肽具有相对较好的DPP
‑
IV抑制活性，但如何将这些DPP
‑
IV抑制肽从胶原蛋白中释放出来，从而制备具有较强DPP
‑
IV抑制活性的胶原蛋白酶解物，仍是一个技术难点，至今还未有突破。

技术实现思路

[0004]本专利技术通过对酶解方案的优化，从鱼皮酶解分离得到具有较强DPP
‑
IV抑制活性、长度为4
‑
7个氨基酸残基的Gly
‑
Pro
‑
型肽，及富含上述多肽的鱼皮酶解物，为治疗二型糖尿病提供了更好的替代方案。
[0005]本专利技术的目的通过下述技术方案实现：
[0006]一种酶解物，含有由4
‑
7个氨基酸残基组成的Gly
‑
Pro
‑
型肽；
[0007]所述由4
‑
7个氨基酸残基组成的Gly
‑
Pro
‑
型肽，其序列通式为Gly
‑
Pro
‑
Xaa1
‑
Gly
‑
[Xaa2]r
‑
[Xaa3]s
‑
[Gly]t
；
[0008]所述的Xaa1为Ile(I)、Ala(A)、Leu(L)、Thr(T)、Val(V)、Ser(S)、His(H)、Hyp(O)或Pro(P)；
[0009]所述的r为0或1；
[0010]当r为0时，所述s、t均为0；当r为1时，所述s为0或1；
[0011]所述的Xaa2为Gly(G)、Glu(E)或Pro(P)；
[0012]所述的s为0或1；
[0013]当s为0时，所述t为0；当s为1时，所述t为0或1；
[0014]所述的Xaa3为Arg(R)、Ala(A)、Ser(S)、Val(V)、Hyp(O)或Pro(P)；
[0015]优选地，所述的由4
‑
7个氨基酸残基组成的Gly
‑
Pro
‑
型肽包括以下多肽：GPIG、GPAG、GPLG、GPTG、GPVG、GPOG、GPPG、GPAGG、GPOGE、GPIGPR、GPAGPA、GPAGPR、GPSGPR、GPVGPSG、GPAGPAG、GPHGPVG、GPSGPAG、GPAGPOG、GPOGPOG和GPOGPPG；
[0016]所述Gly
‑
Pro
‑
型肽中的氨基酸残基均为L构型；
[0017]优选地，上述由4
‑
7个氨基酸残基组成的Gly
‑
Pro
‑
型肽在酶解物中的质量占比为30
‑
45％；
[0018]所述的酶解物，是由富含胶原蛋白的动物原料酶解得到；
[0019]所述富含胶原蛋白的动物原料优选为牛、猪、羊或鱼等动物的皮、骨、软骨、牙齿、肌腿、韧带、血管、肌隔膜、肌束膜或肌细胞膜等；
[0020]所述的鱼包括罗非鱼、鲢鱼、鳕鱼、触须鱼、竹荚鱼、比目鱼、虹鳟鱼等。
[0021]上述酶解物的制备方法，包括以下步骤：
[0022](1)将经过碱处理和热处理的富含胶原蛋白的动物原料冷却至40
‑
60℃，调节体系pH值为6.0
‑
8.0，加入在非Gly残基羧基端切割的蛋白酶，酶解一段时间，灭酶；
[0023]步骤(1)所述在非Gly残基羧基端切割的蛋白酶为胰蛋白酶、碱性蛋白酶或风味蛋白酶中的一种以上，所述蛋白酶的添加量为动物原料质量的0.1
‑
2％，优选0.1
‑
1.2％；
[0024](2)步骤(1)所得酶解液，调节pH值至6.0
‑
8.0，加入在Gly残基羧基端切割的蛋白酶，酶解一段时间，灭酶，所得二次酶解液即含有所述的酶解物；
[0025]步骤(2)所述在Gly残基羧基端切割的蛋白酶为木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶或中性蛋白酶中的一种以上；所述的蛋白酶添加量为动物原料质量的0.1
‑
2％，优选0.1
‑
1.2％；
[0026]步骤(1)所述的碱处理，是将动物原料加入碱液中浸泡0.5
‑
8h，流水洗至中性；
[0027]所述的碱液为氢氧化钠溶液或氢氧化钾溶液，浓度0.01％
‑
2％。
[0028]步骤(1)所述的热处理，是将动物原料在60
‑
100℃热水中浸泡0.5
‑
12h。
[0029]步骤(1)和(2)所述的酶解优选酶解1
‑
12h；
[0030]步骤(1)和(2)所述的灭酶，是90
‑
100℃下处理5
‑
30min；
[0031]所得二次酶解液冷却至室温后离心，上清液加入吸附材料，加热处理后过滤，滤液灭菌、浓缩、喷雾干燥，得到可产业化应用的酶解物粉末；
[0032]所述的离心优选4000
‑
8000rpm离心10
‑
30min；
[0033]所述的吸附材料优选硅藻土和/或活性炭；
[0034]所述灭菌处理为高温高压瞬时灭菌；
[0035]所述浓缩为将过滤后的酶解液浓缩至固形物含量为25
‑
45％；
[0036]所述喷雾干燥的压力为0.2
‑
0.4MPa，喷雾干燥的进口温度为175
‑
195℃，喷雾干燥的出口温度为80
‑
100℃。
[0037]本专利技术酶解物的DPP
‑
IV抑制率在53
‑
68％(终浓度为1mg/mL，以蛋白含量计)，IC
50
值为600μg/mL，还具有体内降血糖活性，可用于制备治疗二型糖尿病的药物。
[0038]本专利技术相对于现有技术具有如下的优点及效果：
[0039](1)本专利技术提供本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种酶解物，其特征在于含有由4
‑
7个氨基酸残基组成的Gly
‑
Pro
‑
型肽；所述由4
‑
7个氨基酸残基组成的Gly
‑
Pro
‑
型肽，其序列通式为Gly
‑
Pro
‑
Xaa1
‑
Gly
‑
[Xaa2]
r
‑
[Xaa3]
s
‑
[Gly]
t
；所述由4
‑
7个氨基酸残基组成的Gly
‑
Pro
‑
型肽在酶解物中的质量占比为30
‑
45％；所述的酶解物，是由富含胶原蛋白的动物原料酶解得到。2.根据权利要求1所述的酶解物，其特征在于：所述的Xaa1为Ile(I)、Ala(A)、Leu(L)、Thr(T)、Val(V)、Ser(S)、His(H)、Hyp(O)或Pro(P)；所述的Xaa2为Gly(G)、Glu(E)或Pro(P)；所述的Xaa3为Arg(R)、Ala(A)、Ser(S)、Val(V)、Hyp(O)或Pro(P)。3.根据权利要求1所述的酶解物，其特征在于：所述的由4
‑
7个氨基酸残基组成的Gly
‑
Pro
‑
型肽包括以下多肽：GPIG、GPAG、GPLG、GPTG、GPVG、GPOG、GPPG、GPAGG、GPOGE、GPIGPR、GPAGPA、GPAGPR、GPSGPR、GPV...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑淋，徐琼瑶，赵谋明，赵翊君，
申请(专利权)人：广东华肽生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：