一种鉴别山乌桕蜂蜜真实性的方法技术

本发明专利技术公开了一种鉴别山乌桕蜂蜜真实性的方法，属于食品检验技术领域。本发明专利技术以山乌桕素作为特征标记物，若蜂蜜样本中含量为2.05

【技术实现步骤摘要】
一种鉴别山乌桕蜂蜜真实性的方法


[0001]本专利技术属于食品检验
，具体涉及一种鉴别山乌桕蜂蜜真实性的方法。

技术介绍

[0002]山乌桕(Sapium discolor)为大戟科乌桕属植物，又称红叶乌桕，主要生长于浙江、江西、福建、台湾、广东、广西、云南及贵州等地，常生于山坡或山谷林中，喜深厚、湿润的土壤，是我国南方各地区重要蜜源植物之一。
[0003]山乌桕通常于5月下旬始花，6月上旬至中旬为盛花期，6月下旬基本结束。群体花期长，是一年之中的主要大流蜜期，也是中蜂蜂群在一年之中最为强盛的时期，平均年单产可达10
‑
20kg/群。另外，山乌桕蜂蜜作为主要的单花蜜品种，其具有独特的营养价值和生物活性。
[0004]目前尚无有效鉴别山乌桕蜂蜜真实性的技术，并且我国尚未制定有关山乌桕蜂蜜的标准。有鉴于此，需要研制开发一种较为方便且准确、切实有效的鉴别山乌桕蜂蜜的方法。

技术实现思路

[0005]为解决
技术介绍
中的问题，本专利技术提供了一种鉴别山乌桕蜂蜜真实性的方法。专利技术人发现山乌桕素(N1,N5,N10
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(E)三香豆酰亚精胺，CAS号131086
‑
78
‑
7)在山乌桕蜂蜜中含量高且稳定，其在山乌桕蜂蜜中的含量范围是2.05
‑
36.13mg/kg，因此将山乌桕素作为特征标记物应用于山乌桕蜂蜜的鉴别。
[0006]本专利技术的目的在于提供一种鉴别山乌桕蜂蜜真实性的方法，以山乌桕素作为特征标记物，若待测蜂蜜样品中山乌桕素含量为2.05
‑
36.13mg/kg，则判断该样品为山乌桕蜂蜜，反之则判断其为其他蜂蜜或掺假山乌桕蜂蜜。
[0007]本专利技术具体是通过如下技术方案实现的：
[0008]一种鉴别山乌桕蜂蜜真实性的方法，包括以下步骤：
[0009]1)将待测蜂蜜样品溶于酸化水溶液中得到蜂蜜样品水溶液；
[0010]2)采用乙腈溶液对步骤1)所得蜂蜜样品水溶液提取，离心，收集上层乙腈提取液；
[0011]3)将步骤2)所得乙腈提取液稀释、过滤，得到上机待测溶液；
[0012]4)取步骤2)所得乙腈提取液加水稀释得到基质样品溶液，以基质样品溶液为溶剂，称取不同量的山乌桕素标准品，逐级稀释配制不同浓度的山乌桕素标准品基质工作液，通过色谱质谱联用仪进行数据采集，绘制外标曲线；
[0013]5)根据外标曲线和样品目标峰响应面积，计算样品中山乌桕素含量。
[0014]进一步地，步骤1)所述酸化水溶液pH为1
‑
4，其与待测蜂蜜样品混溶比例为1
‑
4:1，mL:g。
[0015]进一步地，步骤1)所述蜂蜜样品水溶液中还需加入氯化钠，氯化钠在蜂蜜样品水溶液中的浓度为5％
‑
15％，w/v。
[0016]进一步地，步骤3)所述稀释采用的是乙腈提取液1
‑
5倍体积的水。
[0017]进一步地，步骤3)所述过滤采用0.22μm亲水PTFE滤膜。
[0018]进一步地，步骤4)所述山乌桕素是N1,N5,N10
‑
(E)三香豆酰亚精胺。
[0019]进一步地，步骤4)所述山乌桕素标准品基质工作液浓度分别为1800、1500、1200、1000、500、200、100、50、20ng/mL。
[0020]本专利技术的有益效果是：
[0021]本专利技术提供了一种鉴别方法，能够快速准确地鉴别出待测蜂蜜是否为山乌桕蜂蜜，为控制蜂蜜质量和维持市场秩序提供了保障。
附图说明
[0022]图1为标准溶液与蜂蜜样品溶液中山乌桕素色谱图。
[0023]图2为山乌桕素基质标准曲线。
[0024]图3为质控样与加标样的总离子流图和吸收光谱图。
[0025]图4为山乌桕素与标准品二级质谱对比。
[0026]图5为山乌桕素与标准品特征光谱对比。
[0027]图6为山乌桕素质谱裂解特征。
[0028]图7为图6的局部放大图。
具体实施方式
[0029]为使本专利技术的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合实施例对本专利技术的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
[0030]实施例
[0031]1.将2g待测蜂蜜溶解于4mL pH＝2的酸化水中涡旋混匀，同时在水溶液中加入氯化钠使氯化钠浓度为10％(w/v)，得到蜂蜜样品水溶液。
[0032]2.在所得蜂蜜样品水溶液中加入3mL纯乙腈溶液涡旋混合1min，于转速5000rpm、温度4℃下离心4min，移取上层提取液，在下层溶液中再加入等体积纯乙腈溶液重复提取一次，合并两次提取液并定容至6mL。
[0033]3.将0.5mL合并的乙腈提取液与1.5mL水涡旋混合后，过0.22μm亲水PTFE滤膜于液相小瓶中，待测。
[0034]4.按照1
‑
2步骤提取后，取待测蜂蜜样品乙腈提取液0.5mL涡旋混匀为质控样品(QC)，同时取部分质控样品与水按1:3体积比稀释配制为基质样品溶液。称取一定量的山乌桕素标准品，甲醇溶解为储备液。用基质样品溶液作为溶剂，通过逐级稀释配制不同浓度的山乌桕素标准品基质工作液。山乌桕素标准品储备液浓度为400000ng/mL，工作液浓度分别为1800、1500、1200、1000、500、200、100、50、20ng/mL。
[0035]5.采用UPLC
‑
Q
‑
TOF系统对蜂蜜提取液进行测定。色谱条件为：采用HSS T3(2.1
×
100mm，1.8μm)色谱柱进行化合物分离，其中柱温为40℃。流动相A为含有0.02％甲酸水溶液，流动相B为纯乙腈，流速为0.4mL/min，进样体积5μL，按表1程序进行提取液的液相分离；质谱条件为：采用LockSpray双电喷雾离子源(ESI)，可同时采集分析物和校准化合物精确
质量数并进行全过程的质量数矫正。采集负离子模式下的质谱信息，设置参数信息如下：毛细管电压为2.5kV，样品锥电压为40V，脱溶剂气温度为20℃，离子源温度为120℃，质谱系统中的雾化、锥孔气为氮气，脱溶剂气流速为800L/h，反向锥孔气流速为50L/h，仪器启动后通过亮氨酸脑啡肽(LE，Leucine
‑
enkephalin)和甲酸钠进行质量轴的检验调谐。数据采集软件为MassLynx 4.1并设置数据采集模式为MS
E
，该模式通过高、低碰撞能量(CE,Collision Energy)的切换可以同时采集一级母离子和二级碎片离子，其中数据结构为轮廓图，质量扫描范围为50
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1200Da，单次扫描时间为0.2s，高能量碰本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种鉴别山乌桕蜂蜜真实性的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)将待测蜂蜜样品溶于酸化水溶液中得到蜂蜜样品水溶液；2)采用乙腈溶液对步骤1)所得蜂蜜样品水溶液提取，离心，收集上层乙腈提取液；3)将步骤2)所得乙腈提取液稀释、过滤，得到上机待测溶液；4)取步骤2)所得乙腈提取液加水稀释得到基质样品溶液，以基质样品溶液为溶剂，称取不同量的山乌桕素标准品，逐级稀释配制不同浓度的山乌桕素标准品基质工作液，通过色谱质谱联用仪进行数据采集，绘制外标曲线；5)根据外标曲线和样品目标峰响应面积，计算样品中山乌桕素含量。2.根据权利要求1所述一种鉴别山乌桕蜂蜜真实性的方法，其特征在于，步骤1)所述酸化水溶液pH为1
‑
4，其与待测蜂蜜样品混溶比例为1
‑
4:1，mL:g。3.根据权利要求1所述一种鉴别山乌桕蜂蜜真实性的方法，...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗丽萍，刘韬，宁方建，
申请(专利权)人：南昌大学，
类型：发明
国别省市：