可用于产生非典型CD8+T细胞应答的方法和组合物技术

本发明专利技术涉及可用于产生非典型CD8+T细胞应答的方法和组合物。公开了诱导对异源抗原之CD8+T细胞应答的方法，其中CD8+T细胞的至少10％受MHC

【技术实现步骤摘要】
可用于产生非典型CD8+T细胞应答的方法和组合物
[0001]本申请是申请号为201680014682.9的中国专利申请的分案申请，原申请是2016年2月10日提交的PCT国际申请PCT/US2016/017373于2017年9月8日进入中国国家阶段的申请。
[0002]相关申请的交叉引用
[0003]本申请要求2015年2月10日提交的美国临时申请No.62/114,203、2015年7月24日提交的美国临时申请No.62/196,520、以及2015年9月18日提交的美国临时申请No.62/220,703的优先权权益，其各自通过引用整体并入本文。


[0004]总体来说，本领域是在免疫接种中使用CMV载体。更具体地，本领域是产生以非典型MHC限制性为特征的CD8
+
免疫应答。更具体地，本领域是产生具有受MHC
‑
E限制之受体的T细胞，包括CD8
+
。
[0005]政府支持声明
[0006]本专利技术是在由美国国立卫生研究院(National Institutes of Health)授予的基金号P01 AI094417的美国政府支持下产生的。美国政府对本专利技术享有一定的权利。

技术介绍

[0007]表达猿猴免疫缺陷病毒(Simian Immunodeficiency Virus，SIV)蛋白的恒河猴巨细胞病毒(RhCMV)疫苗载体(RhCMV/SIV)提供了针对病原性SIV的防护(Hansen，S.G.等，Nat Med 15，293(2009)；Hansen，S.G.等，Nature 473，523(2011)；二者均通过引用并入本文)。这种防护与其他T细胞疫苗的根本区别在于其极高的效力以及几乎瞬时起效，约50％的疫苗接种者(vaccinnee)在显著平缓且缩短的病毒血症急性期后表现出对病毒复制的完全控制。尽管RhCMV保护的恒河猴显示病毒血症的周期性低水平“尖峰(blip)”，但是未观察到CD4
+
记忆T细胞耗竭，未发生SIV特异性抗体应答，并且随后，随着时间的推移病毒核酸变得几乎不可量化，同时能够复制的病毒从受保护动物的组织中消失。这些事件在自发的SIV原种对照者(elite controller)和DNA致敏(prime)/Ad5加强疫苗接种的(boost vaccinated)对照者中并不发生(Hansen，S.G.等，Nature 502，100(2013)中，通过引用并入本文)。鉴于RhCMV诱导的CD8
+ T细胞在经RhCMV/SIV疫苗接种的恒河猴中介导这种保护作用中的中心作用，定义这些T细胞的功能特性对于理解其对RhCMV/SIV载体诱导之SIV复制控制的机制性贡献至关重要。理解这些性质可进而导致表达异源抗原之巨细胞病毒(CMV)疫苗载体的新用途。

技术实现思路

[0008]本文中公开了在对象中产生对至少一种异源抗原之免疫应答的方法。所述方法包括向所述对象施用有效量的CMV载体。所述CMV载体包含编码所述至少一种异源抗原的第一核酸、编码至少一种活性UL40蛋白或者其同源物或直系同源物的第二核酸序列、以及编码
至少一种US28蛋白或者其同源物或直系同源物的第三核酸序列。所述CMV载体不表达活性UL128蛋白或其直系同源物，并且不表达活性UL130蛋白或其直系同源物，并且由所述载体产生的CD8
+ T细胞的至少10％受MHC
‑
E或其同源物限制。在一些实施方案中，所述第三核酸序列编码二至五种活性US28蛋白或者其同源物或直系同源物。所述异源抗原可以是任何抗原，包括来自于例如以下的病原体特异性抗原：人类免疫缺陷病毒(HIV)、猿猴免疫缺陷病毒(SIV)、单纯疱疹病毒、乙型或丙型肝炎病毒、乳头瘤病毒(papillomavirus)、疟原虫属(Plasmodium)寄生虫和结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)。在另一些实例中，所述异源抗原可以是肿瘤抗原，包括例如与以下相关的肿瘤抗原：急性髓细胞性白血病(acute myelogenous leukemia)、慢性髓细胞性白血病(chronic myelogenous leukemia)、骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome)、急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia)、慢性淋巴细胞白血病(chronic lymphoblastic leukemia)、非霍奇金淋巴瘤(non
‑
Hodgkin's lymphoma)、多发性骨髓瘤、恶性黑素瘤、乳腺癌、肺癌、卵巢癌、前列腺癌、胰腺癌、结肠癌、肾细胞癌(renal cell carcinoma，RCC)和生殖细胞肿瘤(germ cell tumor)。在另一些实例中，所述异源抗原可以是组织特异性抗原或宿主自身抗原，包括例如来自于T细胞受体(TCR)之可变区的抗原、来自于B细胞受体之可变区的抗原、精子抗原或卵抗原。在另一些实例中，所述载体不编码(1)活性UL40蛋白(或其直系同源物)和/或活性US28蛋白(或其直系同源物)，(2)活性UL128蛋白(或其直系同源物)，以及(3)活性UL130蛋白(或其直系同源物)，产生MHC
‑
II“超表位(supertope)”限制性CD8
+ T细胞而非HLA
‑
E限制性CD8
+ T细胞。
[0009]本文中还公开了人或动物巨细胞病毒载体，其包含编码(1)至少一种异源蛋白抗原的第一核酸序列，(2)编码至少一种活性UL40蛋白或者其同源物或直系同源物的第二核酸序列，以及(3)编码至少一种活性US28蛋白或者其同源物或直系同源物的第三核酸序列。所述载体不表达活性UL128和UL130蛋白或其直系同源物。在一些实施方案中，所述第三核酸序列编码二至五种活性US28蛋白或者其同源物或直系同源物。
[0010]还公开了人或动物巨细胞病毒载体，其(1)不表达活性UL128蛋白(或其直系同源物)，(2)不表达活性UL130蛋白(或其直系同源物)，并且(3)不表达活性UL40蛋白(或其直系同源物)和/或活性US28蛋白(或其直系同源物)。
[0011]本文中还公开了产生识别MHC
‑
E
‑
肽复合物之CD8
+ T细胞的方法。所述方法包括向第一对象施用有效产生识别MHC
‑
E/肽复合物的CD8
+ T细胞组之量的CMV载体，其编码(1)至少一种异源抗原，(2)至少一种活性UL40蛋白(或其直系同源物或同源物)，以及(3)至少一种活性US28基因(或其直系同源物或同源物)。所述CMV载体不编码活性UL128和UL130蛋白或其直系同源物。在一些实施方案中，所述CMV载体编码二至五种活性US28蛋白或者其直系同源物或同源物。所述异源抗原可以是任何抗原，包括病原体特异性抗原、肿瘤抗原、自身抗原或组织特异性抗原本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.巨细胞病毒(CMV)载体，其包含：(1)编码至少一种异源抗原的第一核酸序列；(2)编码至少一种活性UL40蛋白或者其直系同源物或同源物的第二核酸序列；以及(3)编码至少一种活性US28蛋白或者其直系同源物或同源物的第三核酸序列；其中所述CMV载体不表达活性UL128蛋白或其直系同源物，并且不表达活性UL130蛋白或其直系同源物。2.在对象中产生对至少一种异源抗原之免疫应答的方法，所述方法包括向所述对象施用在所述对象中有效引起对第一异源抗原的CD8
+
T细胞应答之量的权利要求1所述的CMV载体。3.CMV载体，其包含编码至少一种异源抗原的核酸序列，其中所述CMV载体：(1)不表达活性UL128蛋白或其直系同源物；(2)不表达活性UL130蛋白或其直系同源物；并且(3)不表达选自UL40或US28的活性蛋白质或其直系同源物。4.在对象中产生对至少一种异源抗原之免疫应答的方法，所述方法包括向所述对象施用在所述对象中有效引起对所述至少一种异源抗原的CD8
+
T细胞应答之量的权利要求3所述的CMV载体。5.产生识别MHC
‑
E
‑
肽复合物之CD8
+
T细胞的方法，所述方法包括：(1)向对象施用有效产生识别MHC
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E/肽复合物的CD8
+
T细胞组之量的权利要求1所述的CMV载体；(2)鉴定来自所述CD8
+
T细胞组的第一CD8
+
TCR，其中所述第一CD8
+
TCR识别来自于MHC
‑
E/异源抗原的肽复合物；(3)从所述对象中分离一种或更多种CD8
+
T细胞；以及(4)用表达载体转染所述一种或更多种CD8
+
T细胞，其中所述表达载体包含编码第二CD8
+
TCR的核酸序列和与编码所述第二CD8
+
TCR的核酸序列可操作地连接的启动子，其中所述第二CD8
+
TCR包含所述第一CD8
+
TCR的CDR3α和CDR3β，从而产生识别来自于MHC
‑
E/异源抗原的...

【专利技术属性】
技术研发人员：克劳斯，
申请(专利权)人：俄勒冈健康与科学大学，
类型：发明
国别省市：