一种外泌体纯化方法及其装置制造方法及图纸

本发明专利技术提供了一种外泌体纯化方法，包括S1二次两级切向流超滤、S2超滤液处理以及S3冻干处理，通过本发明专利技术制备获得的外泌体产品纯度高，且制备方法简单；本发明专利技术还提供了一种外泌体纯化装置，通过本发明专利技术的外泌体纯化装置以及方法可用于高纯度、高通量大规模工厂化样品的分离纯化生产，具有较高的商用价值与推广价值。值。

【技术实现步骤摘要】
一种外泌体纯化方法及其装置


[0001]本专利技术涉及生物
，具体而言，涉及一种一种外泌体纯化方法及其装置。

技术介绍

[0002]2013年，诺贝尔生理或医学奖授予研究细胞囊泡运输调控机制领域研究的三位科学家，之后外泌体研究逐渐成为科研热点。外泌体(Exosome)是由活细胞分泌的直径约为30
‑
150nm的小囊泡，具有典型的脂质双分子层结构，广泛存在于细胞培养上清液、血液、唾液、尿液、精液、羊水以及其它生物体液中。其携带有多种蛋白质、脂类、RNA等重要信息，在细胞与细胞间的物质和信息传递中起重要作用，可以调控细胞代谢、细胞凋亡以及免疫调节等作用，可作为医疗美容、再生医学、疾病诊断等行业，被誉为细胞治疗的下一个前沿领域。
[0003]目前，外泌体的分离富集提取方法主要靠人工操作，主要技术方法包括离心、沉淀、超滤、免疫亲和及微流控等，随着科学技术的发展和人们健康观念和追求美的观念的普及，外泌体市场需求变大，传统外泌体分离技术方法规模化提取分离与纯化受限产能不足，造成外泌体供不应求，因此外泌体规模化生产迫在眉睫。<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种外泌体纯化方法，其特征在于：包括以下步骤：S1二次两级切向超滤：将含有外泌体的提取液通入第一级切向流超滤装置，将超滤后的液体回收得到渗透液，将杂质截留，降低样品溶液中杂质的含量并能够进行除菌；之后将所述渗透液泵入第二级切向流超滤装置，回收过滤液后得到富集液；所述第一级切向流超滤装置的超滤膜孔径大于所述第二级切向流超滤装置的超滤膜孔径，使得外泌体能够穿过第一级切向流超滤装置的滤膜；所述第二级切向流超滤装置内超滤膜的孔径小于所述外泌体，使得外泌体无法够穿过第二级切向流超滤装置的滤膜；S2富集液处理:将步骤S1处理后得到的富集液通入至快速蛋白液相色谱设备中进行层析处理后得到层析后的液体；S3冻干:将富集液进行冻干处理后得到冻干粉，完成外泌体的纯化。2.根据权利要求1所述的外泌体纯化方法，其特征在于：所述步骤S2中，所述第一级切向流超滤装置超滤膜的孔径大于等于0.18μm，所述第二级切向流超滤装置超滤膜的孔径小于等于0.03μm。3.根据权利要求1所述的外泌体纯化方法，其特征在于：所述步骤S3的具体操作为：在富集液中加入赋形剂，之后将富集液装瓶后转入真空冷冻干燥机，冻干后得到冻干粉。4.根据权利要求1所述的外泌体纯化方法，其特征在于：所述步骤S2中，所述层析处理的条件如下：层析柱选用亲和层析柱，平衡液为0.06M Tris
‑
HCl，0.5M NaCl，PH7.9；洗脱液为0.06M Tris
‑
HCl，0.5M NaCl，0.6M咪唑，...

【专利技术属性】
技术研发人员：何加铭，李思，杨茗予，涂建飞，
申请(专利权)人：宁波甬恒瑶瑶智能科技有限公司，
类型：发明
国别省市：