用于免疫PET成像的放射性标记的MET结合蛋白制造技术

本文提供了放射性标记的抗MET抗体和MET x MET双特异性抗体以及它们在免疫PET成像中的用途。包括检测受试者或样品中MET蛋白的存在的方法和监测表达Met的肿瘤的治疗功效的方法。法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于免疫PET成像的放射性标记的MET结合蛋白


[0001]本公开涉及放射性标记的MET结合蛋白及其在免疫PET成像中的用途。
[0002]序列表
[0003]序列表的正式副本以ASCII格式的序列表与说明书同时通过EFS
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Web以电子方式提交，文件名为“10649WO01_SEQ_LIST_ST25.txt”，创建日期为2020年9月15日，大小为约136KB。这个ASCII格式化文件中所含的序列表是说明书的一部分并且以全文引用的方式并入本文中。

技术介绍

[0004]肝细胞生长因子(HGF)(又名散射因子[SF])是通过与HGF受体(HGFR)相互作用而发挥其活性的异源二聚体旁分泌生长因子。HGFR是c
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Met癌基因的产物，且也被称作MET。MET是由通过二硫键连接到细胞外α链的跨膜β链组成的受体酪氨酸激酶。HGF与MET的结合会激活MET的激酶催化活性，从而导致β链的Tyr 1234和Tyr 1235的磷酸化以及随后下游信号传递途径的激活。
[0005]已显示MET和/或HGF过表达、活化或扩增涉及非小细胞肺癌(NSCLC)、胃癌、卵巢癌、胰腺癌、甲状腺癌、乳腺癌、头颈癌、结肠癌和肾癌(Sierra和Tsao,Ther.Adv.Med.Oncol.,3(增刊1)：S21
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S35，2011)。MET扩增被认为是NSCLC和食管胃恶性肿瘤中肿瘤发生的关键驱动因素。另外，导致MET的外显子14缺失的突变已描述为NSCLC子集中的致癌驱动因素。具有MET基因扩增的肿瘤细胞系的生长和存活高度依赖于MET。临床前数据涉及MET信号传导对多种肿瘤类型诸如NSCLC、结直肠癌和头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)中的靶向疗法的抗性。
[0006]免疫正电子发射断层扫描(PET)是一种诊断成像工具，其利用用正电子发射体标记的单克隆抗体，将抗体的靶向特性与正电子发射断层扫描摄像机的灵敏度组合。参见例如The Oncologist,12:1379(2007)；Journal of Nuclear Medicine,52(8):1171(2011)。免疫PET使得能够可视化显示和定量体内抗原和抗体积聚，并且因此可以充当用于诊断和补充疗法的重要工具。举例来说，免疫PET可有助于选择针对特定疗法的潜在候选人，以及有助于对治疗的监测。
[0007]临床前和近期临床结果两者表明，携带MET遗传改变的肿瘤响应于MET抑制剂，证实MET是癌症驱动因素。因此，需要用于抗MET和/或抗MET疗法的诊断工具，尤其包括能够检测所述疗法的合适候选物的诊断工具。

技术实现思路

[0008]本公开中包括用于免疫PET成像的放射性标记的抗MET抗体缀合物和MET x MET双特异性抗体缀合物。
[0009]在一个方面，缀合物包含抗MET抗体、MET x MET双特异性抗体、或它们的抗原结合片段、螯合部分和正电子发射体。
[0010]本文还提供了用于合成所述缀合物的方法和适用于其的合成中间体。
[0011]本文还提供了对表达MET的组织进行成像的方法，所述方法包括将本文所述的放射性标记的抗MET抗体缀合物或MET x MET双特异性抗体缀合物施用于所述组织；以及通过正电子发射断层扫描(PET)成像来使MET表达可视化。
[0012]本文还提供了用于检测组织中的MET的方法，所述方法包括将本文所述的放射性标记的抗MET抗体缀合物或MET x MET双特异性抗体缀合物施用于所述组织；以及通过PET成像来使MET表达可视化。在一个实施方案中，所述组织存在于人类受试者中。在某些实施方案中，所述受试者是非人类哺乳动物。在某些实施方案中，所述受试者患有疾病或病症，诸如癌症。
[0013]本文还提供了用于确定受试者中表达MET的细胞的存在的方法。所述方法包括向所述受试者施用本文所述的放射性标记的抗MET抗体缀合物或MET x MET双特异性抗体缀合物；以及通过PET成像来使MET表达可视化。
[0014]本文还提供了用于鉴定患有适合于抗肿瘤疗法的实体瘤的受试者的方法，所述抗肿瘤疗法包含HGF/MET信号传导路径的抑制剂，例如抗MET抗体、MET x MET双特异性抗体或其抗体药物缀合物(ADC)。所述方法包括向所述受试者施用本文所述的放射性标记的抗体缀合物，以及通过PET成像来使肿瘤中所施用的放射性标记的抗体缀合物可视化，其中肿瘤中放射性标记的抗体缀合物的存在将受试者鉴定为适合于包含HGF/MET信号传导路径的抑制剂的抗肿瘤疗法。
[0015]本文还提供了治疗受试者的实体瘤的方法，所述方法包括确定所述实体瘤是MET阳性的；以及向有需要的所述受试者施用抗肿瘤疗法。在某些实施方案中，抗肿瘤疗法包含抗MET抗体或MET x MET双特异性抗体。在某些实施方案中，向所述受试者施用本文所述的放射性标记的抗体缀合物，并且经由正电子发射断层扫描(PET)成像对放射性标记的抗体缀合物的定位进行成像，以确定肿瘤是否是MET阳性的。
[0016]本文还提供了用于监测正在用抗肿瘤疗法治疗的受试者中的抗肿瘤疗法的功效的方法，其中所述方法包括向所述受试者施用本文所述的放射性标记的缀合物；通过PET成像对肿瘤中所施用的放射性标记的缀合物的定位进行成像；以及确定肿瘤生长，其中缀合物或放射性标记的信号的摄取从基线的降低指示肿瘤消退和抗肿瘤疗法的功效。在某些实施方案中，所述抗肿瘤疗法包含HGF/MET信号传导路径的抑制剂(例如，抗MET抗体或MET x MET双特异性抗体，或任一者的ADC)。
[0017]本文还提供了用于预测受试者对包含HGF/MET信号传导路径的抑制剂的抗肿瘤疗法的反应的方法，所述方法包括确定所述肿瘤是否是MET阳性的，其中如果所述肿瘤是MET阳性的，则其指示所述受试者对包含HGF/MET信号传导路径的抑制剂的抗肿瘤疗法的作出阳性反应。在某些实施方案中，通过施用本公开的放射性标记的抗体缀合物并通过PET成像将放射性标记的抗体缀合物在肿瘤中定位来确定肿瘤为阳性，其中肿瘤中放射性标记的抗体缀合物的存在指示肿瘤是MET阳性的。
[0018]本文提供了用于诊断和治疗患有肿瘤的受试者的方法，所述方法包括向所述受试者施用本文所述的放射性标记的缀合物，其中经由PET成像对放射性标记的抗体缀合物的定位进行成像以确定肿瘤是否是MET阳性的；诊断患有MET阳性肿瘤的受试者；以及向所述受试者施用包含HGF/MET信号传导路径的抑制剂的抗肿瘤疗法。
[0019]本文提供了用于诊断患有表达MET的肿瘤的受试者的方法，所述方法包括向所述受试者施用本文所述的放射性标记的抗MET抗体缀合物或MET x MET双特异性抗体缀合物；通过PET成像使MET表达可视化；以及当通过PET成像使MET表达可视化时诊断患有表达MET的肿瘤的所述受试者。
附图说明
[0020]图1描绘在UV 280nm吸光度检测的情况下，5μg DFO
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M本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】ID NO:6、14、22、30、38、46、54、62、70、78、86、94、102、110、118、126和134组成的组的氨基酸序列，或具有至少90％、至少95％、至少98％或至少99％序列同一性的它们的基本上相似的序列；LCDR1结构域，其具有SEQ ID NO:140的氨基酸序列，或具有至少90％、至少95％、至少98％或至少99％序列同一性的它们的基本上相似的序列；和LCDR2结构域，其具有SEQ ID NO:142的氨基酸序列，或具有至少90％、至少95％、至少98％或至少99％序列同一性的它们的基本上相似的序列；(v)是多特异性抗原结合分子，其包含与MET的第一结合特异性和与肿瘤特异性抗原的第二结合特异性；(vi)是多特异性抗原结合分子，其包含与MET的一个表位的第一结合特异性和与MET的第二表位的第二结合特异性；(vii)以小于约230nM的K
D
结合至单体人MET(例如，hMET.mmh)，如通过在25℃或37℃下的表面等离子体共振所测量；(viii)以小于约3nM的K
D
结合至二聚体人MET，如通过在25℃或37℃下的表面等离子体共振所测量；(ix)阻断HGF与MET的结合；以及(x)在患有癌症的受试者中抑制肿瘤生长并增加存活率。8.如权利要求1至7中任一项所述的缀合物，其中所述抗体包含重链可变区(HCVR)中的三个重链互补决定区(HCDR)，其中所述HCVR具有选自由SEQ ID NO:2、10、18、26、34、42、50、58、66、74、82、90、98、106、114、122和130组成的组的氨基酸序列；和轻链可变区(LCVR)中的三个轻链互补决定区(LCDR)，其中所述LCVR具有SEQ ID NO:138的氨基酸序列。9.如权利要求1至8中任一项所述的缀合物，其中所述抗体包含SEQ ID NO:18的HCVR中的三个CDR。10.如权利要求1至8中任一项所述的缀合物，其中所述抗体包含SEQ ID NO:58的HCVR中的三个CDR。11.如权利要求1至8中任一项所述的缀合物，其中所述抗体包含SEQ ID NO:82的HCVR中的三个CDR。12.如权利要求1至11中任一项所述的缀合物，其中所述抗体包含SEQ ID NO:138的LCVR中的三个CDR。13.如权利要求1至12中任一项所述的缀合物，其中所述抗体包含：(i)第一抗原结合结构域(D1)；和(ii)第二抗原结合结构域(D2)；其中D1特异性地结合人MET的第一表位；并且其中D2特异性地结合人MET的第二表位。14.如权利要求13所述的缀合物，其中：(i)D1包含SEQ ID NO:58的HCVR氨基酸序列内的所述CDR；以及(ii)D2包含SEQ ID NO:82的HCVR氨基酸序列内的所述CDR。15.如权利要求13所述的缀合物，其中：(i)D1包含SEQ ID NO:60
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62
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140
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144的HCDR1
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HCDR2
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HCDR3
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LCDR1
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LCDR3氨基酸序列组；以及
(ii)D2包含SEQ ID NO:84
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144的HCDR1
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HCDR2
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HCDR3
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LCDR1
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LCDR2
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LCDR3氨基酸序列组。16.一种对表达MET的组织进行成像的方法，所述方法包括将如权利要求1至15中任一项所述的放射性标记的抗体缀合物施用于所述组织；以及通过正电子发射断层扫描(PET)成像来使MET表达可视化。17.一种鉴定受试者中表达MET的肿瘤的方法，所述方法包括向所述受试者施用如权利要求1至15中任一项所述的放射性标记的抗体缀合物；经由正电子发射断层扫描(PET)对所述放射性标记的抗体缀合物进行成像；其中...

【专利技术属性】
技术研发人员：M，
申请(专利权)人：瑞泽恩制药公司，
类型：发明
国别省市：