诱导体内器官发育的微创细胞移植方法技术

本文提供了在对象的淋巴结中移植细胞和生长异位组织的方法和系统。在某些实施方式中，本文提供的方法和系统使得微创细胞移植能够治疗有需要的患者。在某些实施方式中，本文提供的方法和系统包括使用超声内窥镜检查。提供的方法和系统包括使用超声内窥镜检查。提供的方法和系统包括使用超声内窥镜检查。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】诱导体内器官发育的微创细胞移植方法
[0001]优先权要求
[0002]本申请要求于2019年4月11日提交的美国临时申请序列62/832,492的优先权，其内容通过引用整体并入本文。
[0003]介绍
[0004]本专利技术涉及用于将细胞移植到对象的淋巴结中以产生功能性异位组织和器官的微创方法。

技术介绍

[0005]对器官移植和/或再生的需求很大。然而，可用于移植到绝症患者的器官短缺代表了全球性的医学、社会和经济挑战。此外，全器官移植对接受者自身的健康状况有严格的要求。例如，目前美国每年约有30,000名终末期肝病(ESLD)患者不符合标准肝移植的条件。
[0006]全器官移植的另一种方法可能涉及细胞移植以再生衰竭的器官。例如，肝细胞移植(HT)可以延长和提高ESLD患者的生活质量，这些患者被认为不适合标准肝移植并且没有其它治疗选择。然而，由于多种原因，针对患病器官的原位细胞疗法可能不可行，从终末期肝硬化和纤维化肝脏中可能缺乏适当的环境到完全迪乔治综合征(DiGeorge syndrome)中缺乏胸腺。
[0007]对于患有ESLD的患者，可能存在重大挑战：大多数细胞疗法旨在促进细胞植入原生患病肝脏。移植的肝细胞通常通过门静脉注射到脾脏(患者的脾动脉或啮齿动物的脾实质)或肝内。移植到脾动脉中的肝细胞在初次注射脾脏后可以迅速主动或被动地迁移到患病肝脏，预计移植肝细胞将在那里发生肝脏再生。然而，由于移植的解剖部位，这种方法有很大的局限性。这些ESLD患者中的大多数(Takahashi等，2014)都有脾肿大和脾功能亢进，对于通过脾动脉循环进入脾实质的所有细胞(例如，红细胞、白细胞和血小板)，脾脏中可发生侵袭性细胞捕获，随后发生吞噬作用和细胞破坏。此外，作为门静脉供应到肝实质的主要成分，移植的肝细胞可以通过脾静脉进一步引导至肝脏。这些细胞可以从门静脉三联征循环到肝血窦，在那里肝细胞对小门静脉分支和肝血窦的部分阻塞导致暂时性门脉高压、初始缺血和许多移植细胞的死亡(da Fonseca等人，2008)。移植的肝细胞克服肝窦内皮细胞屏障和植入到肝实质内的能力非常有限。此外，ESLD患者可能有显著程度的肝纤维化和肝硬化，这可能是已经受到进行性细胞结构紊乱的限制的肝小叶内随后细胞生长的主要限制因素。
[0008]因此，仍然需要能够产生具有合理解剖特征的功能性器官的新型基于细胞的器官再生方法。还需要针对ESLD、代谢性肝病和急性肝衰竭的新疗法。
[0009]专利技术概述
[0010]一方面，本专利技术提供了一种在对象中移植一种或多种细胞并生长异位组织的微创方法。在某些实施方式中，该方法包括通过腔内途径(endoluminal approach)推进内窥镜，例如进入对象的胃肠道、呼吸道或泌尿道，利用经腔途径(transluminal approach)将附接到内窥镜的针穿过内脏壁插入淋巴结，并通过针将一种或多种细胞递送到淋巴结中，从而
使一种或多种细胞植入并在淋巴结中产生异位组织。
[0011]在某些实施方式中，在放射成像或超声成像的帮助下执行推进内窥镜、插入针或执行两者。在某些实施方式中，放射成像包括动态放射成像、计算机断层扫描(CT)、磁共振成像(MRI)或两者。在某些实施方式中，淋巴结在对象的腹腔或胸腔中。在某些实施方式中，淋巴结位于对象的纵隔或腹膜后区域。
[0012]在某些实施方式中，在本专利技术的对象中移植一种或多种细胞并生长异位组织的微创方法包括：在超声或放射成像的帮助下将针插入对象腹腔或胸腔的淋巴结中，并通过针将一种或多种细胞递送到淋巴结中，从而使一种或多种细胞在淋巴结中植入、扩增并分化为异位组织。在某些实施方式中，该方法还包括：推进内窥镜穿过对象的胃肠道、呼吸道或泌尿道，并利用经腔途径将附接到内窥镜的针穿过内脏壁插入对象的淋巴结。在某些实施方式中，推进内窥镜、插入针或两者都在淋巴结的超声成像的帮助下进行。在某些实施方式中，放射成像包括动态放射成像、计算机断层扫描(CT)、磁共振成像(MRI)或两者。在某些实施方式中，内窥镜包括被配置为检测淋巴结的超声探头。
[0013]在某些实施方式中，一种或多种细胞包括肝细胞、胰腺细胞或胰岛、肾细胞或碎片、胸腺细胞或碎片、或肺细胞或碎片。在某些实施方式中，一种或多种细胞对于对象是自体的、同种异体的或异种的。在某些实施方式中，一种或多种细胞对于对象是同系的。
[0014]在某些实施方式中，本文公开的方法进一步包括从活供体组织中分离一种或多种细胞。在某些实施方式中，本文公开的方法进一步包括在递送之前从冷冻保存中回收一种或多种细胞。在某些实施方式中，该方法进一步包括向对象施用免疫抑制剂以减少一种或多种细胞的免疫排斥。
[0015]在某些实施方式中，该方法包括将一种或多种细胞递送到腹腔或胸腔中的至少2、3、4、5、6、7、8、9、10或更多个淋巴结中。
[0016]在某些实施方式中，一种或多种细胞包括平均直径为约20μm的细胞。在某些实施方式中，每次递送到单个淋巴节的一种或多种细胞包含至少约1000万、2000万、3000万、4000万、5000万、6000万、7000万、8000万、9000万或1亿个细胞。在某些实施方式中，针递送针悬浮液形式的一种或多种细胞，其中每毫升的悬浮液具有至少约1000万、2000万、2500万、3000万、4000万、4500万、5000万、5500万、6000万、7000万、8000万、9000万或1亿个细胞。在某些实施方式中，针递送悬浮液形式的一种或多种细胞，其中每毫升悬浮液具有至少约1000万、2000万、3000万、4000万或5000万个活细胞。在某些实施方式中，一种或多种细胞以细胞群的形式被递送到淋巴结中，其中细胞群具有至少约50％、55％、60％、65％、66％、67％、68％、69％、70％、71％、72％、73％、74％、75％、80％、85％、90％、95％、或约100％的活细胞。在某些实施方式中，一种或多种细胞以细胞群的形式递送到淋巴结中，其中，当一种或多种细胞通过针时，所述递送导致细胞群中的细胞活力百分比降低小于约20％、15％、10％、9％、8.5％、8％、7.5％、7％、6.5％、6％、5.5％、5％、4.5％、4％、3.5％、3％、2.5％、2％、1.5％、1％或0.5％。
[0017]在某些实施方式中，针的内径至多为约700μm、600μm、500μm、450μm、400μm、300μm、260μm、250μm或200μm。在某些实施方式中，针的内径至多为约260μm。在某些实施方式中，针的外径至多为约1mm、900μm、800μm、750μm、700μm、650μm、600μm、550μm、520μm、510μm、500μm、480μm、450μm，或400μm。在某些实施方式中，针的外径至多为约510μm。在某些实施方式
中，针至多为约19、19.5、20、20.5、21、21.5、22、22.5、23.5、24、24.5、25、25.5、26、26本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种在对象中移植一种或多种细胞并生长异位组织的微创方法，包括：(a)通过腔内途径将内窥镜推进到对象的胃肠道、呼吸道或泌尿道，(b)利用经腔途径将附接到内窥镜的针穿过内脏壁插入对象的淋巴结，和(c)通过针将一种或多种细胞递送到淋巴结中，从而使一种或多种细胞植入并在淋巴结中产生异位组织。2.如权利要求1所述的方法，其中，在放射成像或超声成像的帮助下执行推进内窥镜、插入针或执行两者。3.如权利要求2所述的方法，其中，所述放射成像包括动态放射成像、计算机断层扫描(CT)、磁共振成像(MRI)或两者。4.如权利要求1
‑
3中任一项所述的方法，其中，所述淋巴结在所述对象的腹腔或胸腔中。5.如权利要求4所述的方法，其中，所述淋巴结位于对象的纵隔或腹膜后区域。6.一种在对象中移植一种或多种细胞并生长异位组织的微创方法，包括：(a)在超声或放射成像的帮助下，将针插入对象的腹腔或胸腔的淋巴结中，和(b)通过针将一种或多种细胞递送到淋巴结中，从而使一种或多种细胞植入并在淋巴结中产生异位组织。7.如权利要求6所述的方法，其中，该方法还包括：推进内窥镜穿过对象的胃肠道、呼吸道或泌尿道，并利用经腔途径将附接到内窥镜的针穿过内脏壁插入对象的淋巴结。8.如权利要求2
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7中任一项所述的方法，其中，在淋巴结的超声成像的帮助下执行推进内窥镜、插入针或执行两者。9.如权利要求8所述的方法，所述放射成像包括动态放射成像、计算机断层扫描(CT)、磁共振成像(MRI)或两者。10.如权利要求1、2、7、8或9中任一项所述的方法，其中，所述内窥镜包括被配置为检测所述淋巴结的超声探头。11.如权利要求1
‑
10中任一项所述的方法，其中，所述一种或多种细胞包括肝细胞、胰腺细胞或胰岛、肾细胞或肾组织碎片、胸腺细胞或胸腺组织碎片、或肺细胞或肺组织碎片。12.如权利要求1
‑
11中任一项所述的方法，其中，所述一种或多种细胞对于所述对象是自体的、同种异体的或异种的。13.如权利要求1
‑
11中任一项所述的方法，其中，所述一种或多种细胞与所述对象是同系的。14.如权利要求1
‑
11中任一项所述的方法，还包括从活供体组织中分离所述一种或多种细胞。15.如权利要求1
‑
11中任一项所述的方法，还包括在递送之前从冷冻保存中回收所述一种或多种细胞。16.如权利要求1
‑
15中任一项所述的方法，其中，所述方法包括将一种或多种细胞递送到腹腔或胸腔中的至少2、3、4、5、6、7、8、9、10或更多个淋巴结中。17.如权利要求1
‑
16中任一项所述的方法，还包括向对象施用免疫抑制剂以减少所述一种或多种细胞的免疫排斥。18.如权利要求1
‑
17中任一项所述的方法，其中，所述一种或多种细胞包括平均直径为
约20μm的细胞。19.如权利要求1
‑
18中任一项所述的方法，其中，所述一种或多种细胞包括肝细胞并且所述异位组织是异位肝组织。20.如权利要求18或19所述的方法，其中，每次递送到单个淋巴节的一种或多种细胞包含至少约1000万、2000万、3000万、4000万、5000万、6000万、7000万、8000万、9000万或1亿个细胞。21.如权利要求18
‑
20中任一项所述的方法，其中，所述针递送针悬浮液形式的一种或多种细胞，其中每毫升的悬浮液具有至少约1000万、2000万、2500万、3000万、4000万、4500万、5000万、5500万、6000万、7000万、8000万、9000万或1亿个细胞。22.如权利要求18
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21中任一项所述的方法，其中，所述针递送悬浮液形式的一种或多种细胞，其中每毫升悬浮液具有至少约1000万、2000万、3000万、4000万或5000万个活细胞。23.如权利要求18
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22中任一项所述的方法，其中，所述一种或多种细胞以细胞群的形式被递送到淋巴结中，其中所述细胞群具有至少约50％、55％、60％、65％、66％、67％、68％、69％、70％、71％、72％、73％、74％、75％、80％、85％、90％、95％、或约100％的活细胞。24.如权利要求23所述的方法，其中，所述一种或多种细胞以细胞群的形式递送到淋巴结中，其中，当一种或多种细胞通过针时，所述递送导致细胞群中的细胞活力百分比降低小于约20％、15％、10％、9％、8.5％、8％、7.5％、7％、6.5％、6％、5.5％、5％、4.5％、4％、3.5％、3％、2.5％、2％、1.5％、1％或0.5％。25.如权利要求18
‑
23中任一项所述的方法，其中，所述针的内径不大于约700μm、600μm、500μm、450μm、400μm、300μm、260μm、250μm或200μm。26.如权利要求18
‑
25中任一项所述的方法，其中，所述针的内径不大于约260μm。27.如权利要求18
‑
26中任一项所述的方法，其中，所述针的外径不大于约1mm、900μm、800μm、750μm、700μm、650μm、600μm、550μm、520μm、510μm、500μm、480μm、450μm，或400μm。28.如权利要求18
‑
27中任一项所述的方法，其中，所述针的外径不大于约510μm。29.如权利要求18
‑
28中任一项所述的方法，其中，所述针的尺寸不大于约19、19.5、20、20.5、21、21.5、22、22.5、23.5、24、24.5、25、25.5、26、26.5或27号规格。30.如权利要求18
‑
29中任一项所述的方法，其中，所述针的尺寸不大于约25号规格。31.如权利要求18
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30中任一项所述的方法，其中，所述针不大于约25号规格，并且所述针递送悬浮液形式的一种或多种细胞，其中每毫升悬浮液具有至少约5000万个活细胞，以及其中一种或多种细胞包含至少约65％的活细胞。32.如权利要求19
‑
31中任一项所述的方法，其中，所述方法治疗所述对象的肝脏疾病或病症。33.如权利要求32所述的方法，其中，所述肝脏疾病或病症是与饮酒相关的终末期肝病或肝纤维化，甲型、乙型、丙型或丁型肝炎感染，非酒精性脂肪肝，自身免疫性肝炎，原发性胆汁性肝硬化，原发性硬化性胆管炎，胆道闭锁，囊性纤维化，阿拉吉耶综合征，梅毒，布鲁氏菌病，寄生虫感染，化学品暴露，慢性胆道疾病，布加综合征，奥斯勒病或右心衰竭。34.如权利要求32所述的方法，其中，所述肝脏疾病或病症与代谢紊乱有关，包括酪氨酸血症、枫糖浆尿病、苯丙酮尿症、Crigler
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Najjar综合征、草酸中毒、高草酸尿症、血色病、
α
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1抗胰蛋白酶缺乏症、威尔逊病、家族性肝内胆汁淤积综合征、半乳糖血症、糖原贮积病、或家族性淀粉样多发性神经病。35.如权利要求19
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32中任一项所述的方法，其中，所述对象已经接受了减少对象肝脏的血液供应并诱导肝细胞功能障碍的经颈静脉肝内...

【专利技术属性】
技术研发人员：E，
申请(专利权)人：匹兹堡大学联邦系统高等教育，
类型：发明
国别省市：