本发明专利技术提供一种补肾益气活血组合物及其在人牙周膜干细胞增殖分化中的应用，属于医药和分子生物学技术领域。本发明专利技术研究发现补肾益气活血方能有效提升体外培养的人牙周膜干细胞增殖和成骨分化的能力，且效果较当归和补骨脂单味药更佳。这一结果从细胞生物学和牙周组织工程的角度为中医药相关组方药应用于慢性牙周炎的临床治疗提供了实验支撑，对补肾益气活血方剂用于临床上治疗慢性牙周炎具有指导意义，具有良好的实际应用之价值。具有良好的实际应用之价值。具有良好的实际应用之价值。
【技术实现步骤摘要】
一种补肾益气活血组合物及其在人牙周膜干细胞增殖分化中的应用
[0001]本专利技术属于医药和分子生物学
，具体涉及一种补肾益气活血组合物及其在人牙周膜干细胞增殖分化中的应用。
技术介绍
[0002]公开该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
[0003]牙周炎是导致牙齿缺失的主要病因，其病程呈慢性发展趋势，随年龄增长或全身性疾病的发展而加重，研究发现牙周炎与糖尿病、冠心病、类风湿关节炎、阿尔茨海默病等全身性炎症反应有关联。
[0004]目前临床上多采用局部牙周基础治疗辅之以口服抗生素等药物治疗牙周炎，针对性强，消除急性炎症快捷有效，但并不能促进牙周支持组织的修复与再生，且局部炎症易于复发，使得牙周炎的远期治疗效果差强人意。研究表明，人牙周膜干细胞(human Periodontal ligamentstem cells，hPDLSCs)能在一定条件下分化成为较成熟的成牙骨质细胞和成纤维细胞，一定程度上可促进牙周组织的自我更新和修复。因此，扩充足够数量的hPDLSCs并促进其骨向分化则成为牙周组织再生的关键。
技术实现思路
[0005]本专利技术提供一种补肾益气活血组合物及其在人牙周膜干细胞增殖分化中的应用。本专利技术根据传统医学的辨证理论首次提出补肾益气活血方，经试验验证，其能够有效促进人牙周膜干细胞增殖和骨向分化，从而有望在(慢性)牙周炎的治疗中发挥更大作用。基于上述研究成果，从而完成本专利技术。
[0006]具体的，本专利技术涉及以下技术方案：
[0007]本专利技术的第一个方面，提供一种补肾益气活血组合物，所述补肾益气活血组合物由以下质量份数的原料药制成：
[0008]黄芪20
‑
40份、当归5
‑
20份、川芎1
‑
10份、白术5
‑
20份、茯苓20
‑
40份、熟地10
‑
30份、枸杞10
‑
30份、补骨脂10
‑
20份、肉桂1
‑
10份、丹皮5
‑
20份、菊花5
‑
20份、黄芩5
‑
20份、川牛膝5
‑
20份。
[0009]本专利技术的第二个方面，提供上述补肾益气活血组合物的制备方法，所述制备方法包括：
[0010]S1、向上述原料药中加入水，浸泡煎煮后进行抽滤，所得滤液备用；滤渣再加入水进行煎煮，抽滤后，合并两次滤液；
[0011]S2、将步骤S1制得合并滤液中加入乙醇，静置离心后得上清液，蒸发浓缩后即得。
[0012]本专利技术的第三个方面，提供上述补肾益气活血组合物在如下任意一种或多种中的
应用：
[0013]a)促进人牙周膜干细胞增殖或制备促进人牙周膜干细胞增殖的产品；
[0014]b)促进人牙周膜干细胞成骨分化或制备促进人牙周膜干细胞成骨分化的产品；
[0015]c)治疗牙周炎或制备治疗牙周炎的产品。
[0016]其中，所述b)中，促进人牙周膜干细胞成骨分化具体表现为：
[0017]b1)促进成骨相关因子表达，所述成骨相关因子包括但不限于Runx2、OCN、OPN和ALP；
[0018]b2)提高细胞成骨分化后期出现的矿化结节面积；
[0019]所述c)中，所述牙周炎包括慢性牙周炎。
[0020]所述产品可以为药物或者试验试剂，所述试验试剂可供实验室作基础研究使用。
[0021]当所述产品为药物时，所述药物还可以包含其他非药物活性成分，所述非药物活性成分包括药学上可接受的辅料和/或载体。
[0022]本专利技术的第四个方面，提供一种促进体外人牙周膜干细胞增殖和/或成骨分化的方法，所述方法包括：向人牙周膜干细胞中施加上述组合物。
[0023]以上一个或多个技术方案的有益技术效果：
[0024]上述技术方案研究发现了补肾益气活血方能有效提升体外培养的hPDLSCs增殖和成骨分化的能力，且效果较当归和补骨脂单味药更佳。这一结果从细胞生物学和牙周组织工程的角度为中医药相关组方药应用于慢性牙周炎的临床治疗提供了实验支撑，对补肾益气活血方剂用于临床上治疗慢性牙周炎具有指导意义，具有良好的实际应用之价值。
附图说明
[0025]构成本专利技术的一部分的说明书附图用来提供对本专利技术的进一步理解，本专利技术的示意性实施例及其说明用于解释本专利技术，并不构成对本专利技术的不当限定。
[0026]图1是本专利技术实施例中各组成骨相关基因比较；其中，A为Runx2，B为OPN，C为OCN，D为ALP，TKP组为补肾益气活血方组，与对照组比较，
a
P<0.05；与阳性对照组相比，
b
P<0.05；与当归组相比，
c
P<0.05；与补骨脂组相比，
d
P<0.05；
[0027]图2是本专利技术实施例中茜素红染色结果(标尺：100μm)；其中，A为阳性对照组，B为补肾益气活血方组，C为当归组，D为补骨脂组。
具体实施方式
[0028]应该指出，以下详细说明都是例示性的，旨在对本申请提供进一步的说明。除非另有指明，本文使用的所有技术和科学术语具有与本申请所属
的普通技术人员通常理解的相同含义。
[0029]需要注意的是，这里所使用的术语仅是为了描述具体实施方式，而非意图限制根据本申请的示例性实施方式。如在这里所使用的，除非上下文另外明确指出，否则单数形式也意图包括复数形式，此外，还应当理解的是，当在本说明书中使用术语“包含”和/或“包括”时，其指明存在特征、步骤、操作、器件、组件和/或它们的组合。下列具体实施方式中如果未注明具体条件的实验方法，通常按照本领域技术内的分子生物学的常规方法和条件，这种技术和条件在文献中有完整解释。参见例如Sambrook等人，《分子克隆：实验手册》中所
述的技术和条件，或按照制造厂商所建议的条件。
[0030]结合具体实例对本专利技术作进一步的说明，以下实例仅是为了解释本专利技术，并不对其内容进行限定。如果实施例中未注明的实验具体条件，通常按照常规条件，或按照销售公司所推荐的条件；实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可通过商业途径购买得到。
[0031]本专利技术的一个典型具体实施方式中，提供一种补肾益气活血组合物，所述补肾益气活血组合物由以下质量份数的原料药制成：
[0032]黄芪20
‑
40份、当归5
‑
20份、川芎1
‑
10份、白术5
‑
20份、茯苓20
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40份、熟地10
‑
30份、枸杞10
‑
30份、补骨脂10...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种补肾益气活血组合物，其特征在于，所述补肾益气活血组合物由以下质量份数的原料药制成：黄芪20
‑
40份、当归5
‑
20份、川芎1
‑
10份、白术5
‑
20份、茯苓20
‑
40份、熟地10
‑
30份、枸杞10
‑
30份、补骨脂10
‑
20份、肉桂1
‑
10份、丹皮5
‑
20份、菊花5
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20份、黄芩5
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20份、川牛膝5
‑
20份。2.权利要求1所述补肾益气活血组合物的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：S1、向上述原料药中加入水，浸泡煎煮后进行抽滤，所得滤液备用；滤渣再加入水进行煎煮，抽滤后，合并两次滤液；S2、将步骤S1制得合并滤液中加入乙醇，静置离心后得上清液，蒸发浓缩后即得。3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S1中，原料药与水的料液比为1：2～10(g/mL)，优选为1：5，在室温下浸泡10
‑
120min，优选为60min，煎煮时间控制为10
‑
60min，优选为45min；所述滤渣与水的料液比为1：2～10(g/mL)，优选为1...
【专利技术属性】
技术研发人员：綦焱，彭凤梅，林秀娟，贺长历，谢瑞阅，
申请(专利权)人：山东省千佛山医院，
类型：发明
国别省市：
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