一种贝莱斯芽孢杆菌、悬浮液及制备方法和应用技术

本发明专利技术提供一种贝莱斯芽孢杆菌，为贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis Bv

【技术实现步骤摘要】
一种贝莱斯芽孢杆菌、悬浮液及制备方法和应用


[0001]本专利技术属于微生物
，涉及一种贝莱斯芽孢杆菌、悬浮液及制 备方法和应用。

技术介绍

[0002]随着工业和矿业的快速发展，以及污灌和污泥滥用，农药化肥不合理 施用，化石类燃料和农用薄膜的不完全燃烧等一系列原因，使得重金属污 染已呈日趋严重，对生态环境和人体健康造成了极大的威胁。此外，重金 属污染还将导致土壤退化，农作物歉收，并且可能通过食物链影响人类的 生命安全。因此，对重金属污染土壤的治理和修复，任务十分紧迫。
[0003]植物根际促生菌株(Plant Growth Promoting Rhizobacteria，简称PGPR) 是指存在于植物根际环境中，通过产生植物激素、溶解无机磷等直接作用 和竞争生态位、诱导植物系统抗性等间接作用促进植物生长的一类有益菌 株。近年来大量研究表明，PGPR菌株能在植物根系及根际土壤有效定殖， 具有显著的促生、防病和增产效果、同时调节植物根际土壤微生态环境、 缓解生态污染等特性，成为有机生态农业可持续发展的有效途径之一，应 用前景十分广阔。而利用植物根际有益PGPR菌株缓解土壤次生盐渍化和 重金属污染，提高产量和品质，提高植物免疫能力，并调节土壤微生态是 农业可持续发展的新途径。

技术实现思路

[0004]为了实现上述目的，本专利技术所采用的技术方案是：一种贝莱斯芽孢杆菌， 它为贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis Bv
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1，保藏于“中国微生物菌种 保藏管理委员会普通微生物中心”，保藏号为CGMCC No.14469。保藏日期 为2017年07月27日，保藏地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国 科学院微生物研究所，邮政编码：100101。
[0005]基于上述，所述贝莱斯芽孢杆菌是由水稻根际分离、筛分出来的革兰 式阳性菌菌种，经培养基发酵培养得到的。
[0006]基于上述，所述贝莱斯芽孢杆菌的生长温度范围为4℃～50℃，所述 贝莱斯芽孢杆菌的生长pH值为6.5～7.5。
[0007]基于上述，所述培养基为蛋白胨培养基。
[0008]本专利技术还提供一种贝莱斯芽孢杆菌悬浮液，包括无菌硫酸镁溶液和均匀 分散在该无菌硫酸镁溶液中贝莱斯芽孢杆菌的菌体。
[0009]基于上述，所述贝莱斯芽孢杆菌悬浮液的浓度为2
×
107CFU/mL～ 2
×
109CFU/mL。
[0010]本专利技术还提供一种制备贝莱斯芽孢杆菌悬浮液的方法，其步骤包括：
[0011]从水稻根际分离、筛分出来的革兰式阳性菌作为菌种，经培养基培养得 到贝莱斯芽孢杆菌菌种；
[0012]将贝莱斯芽孢杆菌菌种接种到培养基上，并在28℃～32℃发酵培养 36h～50h，得到贝莱斯芽孢杆菌发酵液；对所述贝莱斯芽孢杆菌发酵液进 行离心处理，得到贝莱斯芽孢
杆菌的菌体；采用0.05mol/L～0.1mol/L的无 菌硫酸镁溶液分散所述贝莱斯芽孢杆菌的菌体，获得所述贝莱斯芽孢杆菌 悬浮液。
[0013]本专利技术还提供一种所述的贝莱斯芽孢杆菌悬浮液的应用，所述贝莱斯芽 孢杆菌悬浮液可用于治理土壤次生盐渍化和重金属污染。
[0014]本专利技术还提供一种所述的贝莱斯芽孢杆菌悬浮液的使用方法，包括植 物移栽时利用所述贝莱斯芽孢杆菌悬浮液进行浸根处理，和/或在植物移栽 后20天之内利用所述贝莱斯芽孢杆菌悬浮液对植物进行灌注处理。
[0015]本专利技术所提供的贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis Bv
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1菌株具有以 下生物学特性：
[0016]如图11和图12所示，本专利技术所提供的贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensisBv
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1菌株是从水稻根际分离的革兰式阳性菌。菌体直杆状，NA培养基 上菌落呈不规则形，表面扁平干燥，边缘呈小锯齿状，不透明，不产生色素。 该菌株的生长温度范围为4℃～50℃，最适生长温度为30℃，最适宜的pH值 为6.5
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7.5，最高耐盐度为10％。明胶液化、淀粉水解、柠檬酸盐利用、过氧 化氢酶、硫化氢产生试验、硝酸盐还原和V
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P测定为阳性，葡糖糖氧化发酵 为发酵型。该菌16S rDNA序列全长为1428bp，与Bacillus velezensis(贝莱 斯芽孢杆菌)的16S rDNA序列相似性达到99％。
[0017]本专利技术提供的贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis Bv
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1悬浮液在番 茄等蔬菜生长过程中在植物根际具有良好的定殖能力，能对土壤中的镉、 铅、铜等具有降解功效。
[0018]通过试验对比表明，添加了该贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensisBv
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1悬浮液的育苗基质进行蔬菜育苗时，在叶片数、SPAD值(叶绿素 含量相对值)、茎粗、株高等指标均大于添加镉、铅、铜胁迫的对照组。
[0019]因此，本专利技术提供的贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis Bv
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1悬浮 液具有良好的缓解蔬菜根际土壤中的镉、铅、铜的危害程度，调节蔬菜根 际土壤微生态以促进植株生长，并显著提高根系活力，有利于提高产量。
[0020]另外，通过实验表明，添加了2
×
109CFU/mL的Bv
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1菌悬液的 番茄幼苗，在植株鲜重和植株干重均大于只添加清水的空白对照。
[0021]而同时添加Bv
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1悬浮液和NaCl的试验组中的番茄幼苗，无论是 在株高、生物量、SPAD值、QY(最大光量子效率)、MDA(丙二醛)、相 对电导率以及SOD(超氧化物歧化酶)、POD(过氧化物酶)、CAT(过氧 化氢酶)等抗氧化保护酶活性均比只添加NaCl的试验组明显得到了改善。 由此说明，该贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis Bv
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1悬浮液对土壤中 的盐胁迫具有缓解功效。
附图说明
[0022]图1为镉胁迫及加菌对番茄幼苗生长趋势茎粗、叶片及株高影响结果。
[0023]图2为铅胁迫及加菌对番茄幼苗生长趋势茎粗、叶片及株高影响结果。
[0024]图3为铜胁迫及加菌对番茄幼苗生长趋势茎粗、叶片及株高影响结果。
[0025]图4为施菌处理对镉胁迫下不同时期番茄叶绿素含量的影响。
[0026]图5为施菌处理对铅胁迫下不同时期番茄叶绿素含量的影响。
[0027]图6为施菌处理对铜胁迫下不同时期番茄叶绿素含量的影响。
[0028]图7为施菌本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1. 一种贝莱斯芽孢杆菌，其特征在于，它为贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis Bv
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1，保藏于“中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心”，保藏号为CGMCC No.14469。2.根据权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌，其特征在于，所述贝莱斯芽孢杆菌是由水稻根际分离、筛分出来的革兰式阳性菌菌种，经培养基发酵培养得到的。3.根据权利要求2所述的贝莱斯芽孢杆菌，其特征在于，所述贝莱斯芽孢杆菌的生长温度范围为4℃～50℃，所述贝莱斯芽孢杆菌的生长pH值为6.5～7.5。4.根据权利要求3所述的贝莱斯芽孢杆菌，其特征在于，所述培养基为蛋白胨培养基。5.一种贝莱斯芽孢杆菌悬浮液，其特征在于，它包括无菌硫酸镁溶液和均匀分散在该无菌硫酸镁溶液中的权利要求1至4任一项所述的贝莱斯芽孢杆菌的菌体。6.根据权利要求5所述的贝莱斯芽孢杆菌悬浮液，其特征在于，所述贝莱斯芽孢杆菌悬浮液的浓度为2
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【专利技术属性】
技术研发人员：张涛，申顺善，朴凤植，孙凯乐，王永，孟更，马肖静，欧阳兆鹏，邓磊，
申请(专利权)人：河南农业大学，
类型：发明
国别省市：