含有TREM2突变基因的类小胶质细胞系、小鼠模型及其构建方法技术

本申请涉及一种含有TREM2突变基因的类小胶质细胞系、小鼠模型及其构建方法。含有TREM2突变基因的类小胶质细胞系构建方法包括：取含有核苷酸序列如序列表SEQ ID No.1所示的TREM2突变基因的皮肤组织细胞，利用转录因子进行培养，诱导得到多能干细胞；之后分化成早期原始造血细胞；再分化成类小胶质细胞系。含有TREM2突变基因的小鼠模型是采用CRISPR/Cas9系统构建，步骤包括：将含有Cas9 mRNA、sgRNA和TREM2突变基因的单链寡核苷酸显微注射至小鼠受精卵中，再移植到鼠输卵管内进行孕育，出生的小鼠即为含有TREM2突变基因的小鼠模型。本申请提供的类小胶质细胞系便于体外研究TREM2通过类小胶质细胞在AD病理过程中产生作用的原因，小鼠模型的建立便于体内研究TREM2突变对AD病理过程的作用机制。TREM2突变对AD病理过程的作用机制。TREM2突变对AD病理过程的作用机制。

【技术实现步骤摘要】
含有TREM2突变基因的类小胶质细胞系、小鼠模型及其构建方法


[0001]本申请属于基因工程
，具体涉及一种含有TREM2突变基因的类小胶质细胞系、小鼠模型及其构建方法。

技术介绍

[0002]阿尔兹海默病(Alzheimer
’
s disease，AD)是目前影响人类健康的主要神经退行性疾病，其典型表现为认知功能的缓慢进行性丧失。因其发病与年龄密切相关，且多发于老人；故随着社会人口的老龄化，发病率会越来越高。美国每800万人口就有2047位AD患者，中国的AD患病人群也有600
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1000万人。然而，到目前为止人类还没有治疗该病的有效措施。
[0003]研究发现，APP，PSEN1，PSEN2的基因变异和APOE的基因分型与AD的发生有很大关系。近年来通过GWAS研究发现髓系细胞2中表达触发受体(TREM2)基因发生变异后，AD的风险也会增高。TREM基因簇位于6号染色体p21.1，包含4个TREM基因(TREM1，TREM2，TREM4，TREM5)和两个TREM样的基因(TREML1，TR本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种TREM2突变基因，其特征在于：所述TREM2突变基因的核苷酸序列如序列表SEQ ID No.1 所示。2.一种重组载体，其特征在于：所述重组载体包含如权利要求1所述的TREM2突变基因。3.一种含有TREM2突变基因的类小胶质细胞系的构建方法，其特征在于，包括步骤：S1、取含有权利要求1所述的TREM2突变基因的皮肤组织细胞，利用转录因子进行培养，诱导得到多能干细胞；S2、将所述多能干细胞分化成早期原始造血细胞；S3、将所述早期原始造血细胞分化成类小胶质细胞系。4.根据权利要求3所述的构建方法，其特征在于，步骤S1中，所述转录因子选自Oct4、Klf4、Sox2和c
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Myc中的至少一种；步骤S2中，所述分化是在含造血分化因子的培养基中进行分化；步骤S3中，所述分化是在含有CSF
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1、IL
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34和TGFβ1的无血清分化培养基中进行分化。5.权利要求3或4所述的方法构建得到的含有TREM2突变基因的类小胶质细胞系。6.一种含有TREM2突变基因的小鼠模型的构建方法，其特征在于，所述含有TREM2突变基因的小鼠模型是采用CRISPR/Cas...

【专利技术属性】
技术研发人员：唐毅，秦琪，韦玉生，李沉简，
申请(专利权)人：首都医科大学宣武医院，
类型：发明
国别省市：