一种能有效提高玫瑰细胞液品质的发酵方法技术

本发明专利技术公开了一种能有效提高玫瑰细胞液品质的发酵方法：从保存菌种的琼脂斜面培养基上取一环酵母或肠杆菌接入液体种子培养基中，在20

【技术实现步骤摘要】
一种能有效提高玫瑰细胞液品质的发酵方法


[0001]本专利技术涉及一种能有效提升玫瑰纯露及细胞液品质的发酵方法，属于微生物发酵


技术介绍

[0002]玫瑰纯露，又称水精油，是玫瑰精油在蒸馏萃取过程中分离出来的冷凝水溶液，是一种精油的副产品。其特性虽与精油接近，但却不完全相同。纯露中除了含有少量精油成分之外，还含有全部植物体内的水溶性物质。玫瑰细胞液是在制作玫瑰花茶的过程中，玫瑰鲜花(冠)在低温、亚真空条件下烘干蒸馏，其中易挥发物质被循环热风带出，通过冷凝器冷凝成的液体，是玫瑰花茶制作过程中的副产品。这两种产品属于精油提取副产物且应用价值单一，市场上用于日化用品的纯露和细胞液的质量参差不齐，亟需寻求一种可以提高其应用价值的方法，以扩大其功效及市场价值。研究表明玫瑰提取液富含多种酚类、醇类和酯类等香气物质，而微生物作为“细胞工厂”可以潜在地将其进行代谢产生功效成分，进而提高应用价值。
[0003]利用微生物对玫瑰纯露进行发酵是一种条件温和，操作简便，环境友好的技术方法。通过微生物天然的代谢转化机制可以有效地将底物转化为其他潜在的有益成分，该方法在其他领域已得到广泛的应用，具有成熟的操作基础。

技术实现思路

[0004]本专利技术所要解决的技术问题是：提供一种能有效提升玫瑰纯露及细胞液品质的发酵方法。
[0005]为了解决上述技术问题，本专利技术所采用的技术方案是：
[0006]一种能有效提高玫瑰细胞液品质的发酵方法，包括以下步骤：
[0007]步骤1)：从保存菌种的琼脂斜面培养基上取一环酵母或肠杆菌接入液体种子培养基中，在20
‑
30℃下培养12
‑
48小时，以活化菌种，得到种子液；
[0008]步骤2)：将种子液按体积百分比4
‑
8％接入到以大马士革玫瑰纯露作为基质配制的液体发酵培养基中，于29
‑
33℃下培养24
‑
168小时，得到发酵液。
[0009]优选地，所述步骤1)中的酵母或肠杆菌为土星形塞伯林德纳氏酵母、路氏肠杆菌、马克斯克鲁维酵母或拜耳接合酵母。
[0010]优选地，所述步骤1)中的种子培养基含有：磷酸氢二钾三水合物1
‑
3g/L、磷酸二氢钾0.5
‑
2g/L、无水硫酸镁0.2
‑
0.7g/L、氯化钠4
‑
6g/L、硫酸铵8
‑
11g/L、葡萄糖4
‑
6g/L，蒸馏水定容，调节pH至4.8
‑
7.2。
[0011]优选地，所述步骤2)中的液体发酵培养基含有：磷酸氢二钾三水合物1
‑
3g/L、磷酸二氢钾0.5
‑
1g/L、无水硫酸0.2
‑
0.7g/L、氯化钠2
‑
7g/L、硫酸铵8
‑
11g/L、甘油9
‑
12g/L，以大马士革玫瑰纯露作为基质定容，调节pH为5.3
‑
6.8。
[0012]优选地，所述步骤1)中的培养在恒温震荡器中进行，转速为150
‑
220rpm。
[0013]优选地，所述步骤2)中的培养在恒温震荡器中进行，转速为180
‑
220rpm。
[0014]优选地，对所述步骤2)得到的发酵液采用0.2
‑
0.3μm的尼龙滤膜过滤后，保存于3
‑
6℃条件下。
[0015]优选地，对所述步骤2)得到的发酵液进行测定，多酚质量含量提高了1
‑
10％，苯乙醇质量含量提高了5
‑
80％，丁香油酚质量含量提高了10
‑
70％，甲基丁香酚质量含量提高了30
‑
85％，同时有新香气物质产生。
[0016]更优选地，所述的新香气物质包括乙酸苄酯、乙酸苯乙酯及香茅醇。
[0017]更优选地，所述测定的方法中，总酚含量的测定方法为：(1)离心后的发酵液取0.3
‑
0.5mL上层清液中加入1
‑
3mL体积浓度10％福林酚试剂，混匀，静置4
‑
6min，然后加入1.4
‑
1.8mL质量浓度7.5％碳酸钠溶液，静置60min，于765nm下测定吸光值，并根据标准曲线计算出总酚含量；新香气物质的测定方法为：以溶解在正己烷的γ
‑
癸内酯作为内标物，采用GC
‑
MS测定发酵液的挥发性成分。
[0018]与现有技术相比，本专利技术的有益效果在于：
[0019](1)本专利技术所用菌株来自大马士革玫瑰田土壤，其能够提高多酚含量，增加玫瑰提取液的香气成分；
[0020](2)本专利技术的发酵过程反应条件温和，环境友好，具有良好的开发和应用前景。
附图说明
[0021]图1为发酵过程中所采用的四种菌；其中，(a)为土星形塞伯林德纳氏酵母Cyberlindnera saturnus，(b)为路氏肠杆菌Enterobacter ludwigii，(c)为马克斯克鲁维酵母Kluyveromyces marxianus，(d)为拜耳接合酵母Zygosaccharomyces bailii；
[0022]图2为实施例3中玫瑰纯露发酵五天后的多酚含量；其中，泥A代表大马士革玫瑰田土壤，中间的个位数代表编号，5d代表发酵5天；
[0023]图3为没食子酸浓度与吸光度的关系曲线。
具体实施方式
[0024]为使本专利技术更明显易懂，兹以优选实施例，并配合附图作详细说明如下。
[0025]实施例
[0026]一、以大马士革玫瑰田土壤筛选大马士革玫瑰发酵菌
[0027](1)富集培养基配方为磷酸二氢钾1
‑
3g/L、无水硫酸镁0.2
‑
0.7g/L、氯化钠3
‑
6g/L、硫酸铵4
‑
6g/L、葡萄糖4
‑
6g/L、蛋白胨9
‑
11g/L、以蒸馏水和玫瑰纯露按一定比例配制定容、调节pH至6
‑7±
0.2。121℃，0.1MPa，灭菌20min。
[0028](2)取8
‑
12g泥土于80
‑
100mL无菌生理盐水中浸泡0.75
‑
1.25h，温室振荡25
‑
35min，静置25
‑
35min，吸取8
‑
12mL上层清夜于88
‑
92mL富集培养基，28
‑
32℃振荡培养46
‑
50h。
[0029](3)用大马士革玫瑰纯露配制YPDA培养基。121℃，0.1MPa，灭菌20min，完毕后待其冷却至20<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种能有效提高玫瑰细胞液品质的发酵方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1)：从保存菌种的琼脂斜面培养基上取一环酵母或肠杆菌接入液体种子培养基中，在20
‑
30℃下培养12
‑
48小时，以活化菌种，得到种子液；步骤2)：将种子液按体积百分比4
‑
8％接入到以大马士革玫瑰纯露作为基质配制的液体发酵培养基中，于29
‑
33℃下培养24
‑
168小时，得到发酵液。2.如权利要求1所述的能有效提高玫瑰细胞液品质的发酵方法，其特征在于，所述步骤1)中的酵母或肠杆菌为土星形塞伯林德纳氏酵母、路氏肠杆菌、马克斯克鲁维酵母或拜耳接合酵母。3.如权利要求1所述的能有效提高玫瑰细胞液品质的发酵方法，其特征在于，所述步骤1)中的种子培养基含有：磷酸氢二钾三水合物1
‑
3g/L、磷酸二氢钾0.5
‑
2g/L、无水硫酸镁0.2
‑
0.7g/L、氯化钠4
‑
6g/L、硫酸铵8
‑
11g/L、葡萄糖4
‑
6g/L，蒸馏水定容，调节pH至4.8
‑
7.2。4.如权利要求1所述的能有效提高玫瑰细胞液品质的发酵方法，其特征在于，所述步骤2)中的液体发酵培养基含有：磷酸氢二钾三水合物1
‑
3g/L、磷酸二氢钾0.5
‑
1g/L、无水硫酸0.2
‑
0.7g/L、氯化钠2
‑
7g/L、硫酸铵8
‑
11g/L、甘油9
‑
12g/L，以大马士革玫瑰纯露作为基质定容，调节pH为5.3
‑
6.8。5.如...

【专利技术属性】
技术研发人员：张硕，陈炬龙，唐雨欣，
申请(专利权)人：上海应用技术大学，
类型：发明
国别省市：