监测细胞培养基的方法技术

本公开文本提供了一种使用拉曼光谱法指纹识别和分析细胞培养样品以检测细胞培养基制备错误、降解或可能使其对于细胞培养用途是次优的培养基中的其他变化的方法。次优的培养基中的其他变化的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】监测细胞培养基的方法
相关申请的交叉引用
[0001]本申请要求2019年5月23日提交的美国临时申请号62/852,230的优先权权益，并且将其通过引用以其整体特此并入。

技术介绍

[0002]就劳动力损失和生产延迟而言，用于上游生物加工的次优培养基可能会造成数十万美元的损失。当不正确制备时，即当特定组分被意外排除或以错误量添加或当超过其最佳有效期使用时，培养基被认为是次优的。培养基质量是一个重要的性能参数，所述参数通常是在14天的生产生物反应器过程(每天取样和补料，这是时间和资源密集型的)中通过HPLC功能测试(诸如通过氨基酸分析)进行评价的。次优培养基的使用可能会导致效价降低和/或产品属性改变。然而，重要的是具有能够正确测量培养基组成的分析方法，以确保关键组分的物理存在并且经由测量重要的降解标记物来监测有效期。因此，需要开发能够测量培养基状况的成本有效且准确的方法。

技术实现思路

[0003]本公开文本涉及一种监测细胞培养基变化的方法，所述变化可能影响所述细胞培养基在任何环境中使细胞生长的有效性。本公开文本的一方面涉及细胞培养基样品本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于使用拉曼光谱法指纹识别细胞培养基和/或鉴定细胞培养基的最佳储存条件的方法，所述方法包括：收集所述细胞培养基的拉曼光谱，所述细胞培养基含有一种或多种组分的混合物，其中将所述细胞培养基的拉曼光谱与和所述一种或多种组分中的每一种相关的一个或多个参考光谱进行比较或与和参考培养基组合物相关的参考光谱进行比较。2.一种用于使用拉曼光谱法鉴定细胞培养基中特定组分的变化率和/或实时监测细胞培养基的变化的方法，所述方法包括：收集所述细胞培养基的拉曼光谱(“收集光谱”)，其中将所述细胞培养基的拉曼光谱与和一种或多种组分中的每一种相关的参考光谱进行比较。3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述参考光谱将没有降解。4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中约每一小时、约每两小时、约每三小时、约每四小时、约每五小时、约每六小时、约每七小时、约每八小时、约每九小时、约每十小时、约每11小时、约每12小时、约每13小时、约每14小时、约每15小时、约每16小时、约每17小时、约每18小时、约每19小时、约每20小时、约每21小时、约每22小时、约每23小时或约每24小时收集所述细胞培养基的拉曼光谱。5.根据权利要求4所述的方法，其中所述拉曼光谱是至少5个数据点、至少10个数据点、至少15个数据点、至少16个数据点、至少17个数据点、至少18个数据点、至少19个数据点、至少20个数据点、至少21个数据点、至少22个数据点、至少23个数据点、至少24个数据点、至少25个数据点、至少26个数据点、至少27个数据点、至少28个数据点、至少29个数据点、至少30个数据点、至少31个数据点、至少32个数据点、至少33个数据点、至少34个数据点、至少35个数据点、至少36个数据点、至少37个数据点、至少38个数据点、至少39个数据点、至少40个数据点、至少41个数据点、至少42个数据点、至少43个数据点、至少44个数据点、至少45个数据点、至少46个数据点、至少47个数据点、至少48个数据点、至少49个数据点或至少50个数据点的平均值。6.根据权利要求5所述的方法，其中每10秒、每15秒、每20秒、每25秒、每30秒、每35秒、每40秒、每45秒、每50秒、每55秒或每60秒测量每个数据点。7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述拉曼光谱通过多变量分析进行分析。8.根据权利要求7所述的方法，其中所述多变量分析是主成分分析(PCA)。9.根据权利要求7所述的方法，其中所述PCA产生所述拉曼光谱的PC得分。10.根据权利要求7所述的方法，其中所述多变量分析是偏最小二乘法分析(PLS)，并且其中所述分析产生校准预测模型。11.根据权利要求1至10中任一项所述的方法，所述方法进一步包括比较所述细胞培养基的收集光谱。12.根据权利要求11所述的方法，其中所述比较包括所述收集光谱的PC得分与所述参考光谱的参考PC得分的比较。13.根据权利要求11或12所述的方法，所述方法进一步包括当所述收集光谱的PC得分与所述参考光谱的参考PC得分不同时，确定所述细胞培养基被降解。14.根据权利要求11或12所述的方法，所述方法进一步包括当所述收集光谱的PC得分高于所述参考光谱的参考PC得分时，确定所述细胞培养基被降解。15.根据权利要求11或12所述的方法，所述方法进一步包括当所述收集光谱的PC得分
低于所述参考光谱的参考PC得分时，确定所述细胞培养基被降解。16.根据权利要求13
‑
15中任一项所述的方法，其中所述细胞培养基被降解，并且与未经降解的培养基相比，所述经降解的细胞培养基使培养中的多个细胞的活力降低约1％、约2％、约3％、约4％、约5％、约6％、约7％、约8％、约9％或约10％。17.根据权利要求13
‑
16中任一项所述的方法，其中所述细胞培养基被降解，并且与未经降解的培养基相比，所述经降解的细胞培养基使培养中的细胞的活细胞密度降低约1x106个细胞/mL、约2x106个细胞/mL、约3x106个细胞/mL、约4x106个细胞/mL、约5x106个细胞/mL、约6x106个细胞/mL、约7x106个细胞/mL、约8x106个细胞/mL、约9x106个细胞/mL、约10x106个细胞/mL、约11x106个细胞/mL或约12x106个细胞/mL。18.根据权利要求13
‑
17中任一项所述的方法，其中所述细胞培养基被降解，并且与未经降解的培养基相比，所述经降解的细胞培养基使培养中的细胞的抗体产生效价降低约0.1g/L、约0.2g/L、约0.3g...

【专利技术属性】
技术研发人员：P，
申请(专利权)人：百时美施贵宝公司，
类型：发明
国别省市：