一种类器官基质胶微球及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种类器官基质胶微球及其制备方法和应用，属于类器官技术领域。利用海藻酸盐水凝胶材料的凝胶

【技术实现步骤摘要】
一种类器官基质胶微球及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及类器官
，具体是一种类器官基质胶微球及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]类器官是一种三维的细胞培养体系，它能够模拟人体或动物器官的部分结构和功能特征。与传统的二维细胞培养或非灵长类动物模型相比，类器官培养体系克服了标准单层癌细胞培养的许多局限性，使得我们能够在体外研究器官层次的生物学模型，而且这种培养更接近于人体的实际生理环境。重要的是，类器官培养尤其肿瘤类器官培养再现了肿瘤的形态和生物学特性，为癌症研究、药物研发和精准医学提供了有价值的新工具。
[0003]经典的类器官技术，都是将培养类器官的细胞与基质胶在低温下混合后，接种到细胞培养板中，再置于37℃的培养环境中，通过基质胶的温敏特性形成凝胶化反应，将细胞包埋到基质胶中，基质胶提供了细胞三维的培养环境。该技术的最大问题是，由于用细胞培养板培养，难以实现类器官的规模化制备，无法满足药物高通量筛选的需求。
[0004]为此，有研究者将微流控技术引入到类器官球培养中，CN110004111A公开了一种类本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种类器官基质胶微球的制备方法，其特征在于，所述的制备方法利用海藻酸盐水凝胶材料的凝胶
‑
溶胶转化特性，通过微流控管道，先将含有细胞的基质胶液滴分散包埋在海藻酸盐凝胶中，然后将包埋有基质胶液滴的海藻酸盐凝胶在30
‑
40℃条件下孵育，待基质胶液滴固化形成基质胶凝胶球后，加入能够去除海藻酸盐凝胶中的离子交联剂的螯合剂溶液将海藻酸盐凝胶液化，除去液体，获得基质胶微球，进一步培养后获得类器官基质胶微球。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的离子交联剂为二价阳离子或者三价阳离子，二价阳离子包括Ca
2+
、Cu
2+
、Fe
2+
、Sr
2+
、Zn
2+
和Ba
2+
，三价阳离子包括Fe
3+
、Ga
3+
；所述的螯合剂包括柠檬酸钠和EDTA。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的细胞包括原代细胞、永生化细胞系和干细胞来源的细胞。4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的微流控管路包括可实现油包水液滴的“T”形、“Y”形、“十”字形、“回”形、箭头形微流控管路。5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的将含有细胞的基质胶液滴分散包埋在海藻酸盐凝胶中的方法包括外部凝胶化和内部凝胶化。6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，外部凝胶化的具体过程包括如下步骤：(1)配制终浓度为5
‑
50mg/mL海藻酸盐溶液；(2)将商品化基质胶溶液与细胞在1
‑
4℃环境下混合均匀，细胞含量为102‑
107个/mL；(3)将步骤(2)制备的载细胞的基质胶溶液作为分散相，步骤(1)配制的海藻酸盐溶液作为流动相，通过微流控管路，在1
‑
4℃环境下，分散相溶液以液滴的形式均匀分散到流动相溶液中，再通过无菌空气断裂流动相液体柱，流入含有海藻酸盐离子交联剂的收集器中，获得包埋有载细胞的基质胶液滴的海藻酸盐凝胶；或者，先将步骤(2)制备的载细胞的基质胶溶液作为分散相，液体石蜡作为流动相，通...

【专利技术属性】
技术研发人员：王若雨，于炜婷，梁珊珊，房艳华，郑国爽，
申请(专利权)人：大连大学，
类型：发明
国别省市：