一种利用枯草芽孢杆菌发酵催化制备莱鲍迪苷M的方法技术

本发明专利技术涉及一种利用枯草芽孢杆菌发酵催化制备莱鲍迪苷M的方法，其特征在于：（1）将糖基转移酶UGT76G1和UGT11基因连到PBR322质粒载体上，导到枯草芽孢杆菌中，接入LB培养基，30～37℃、100

【技术实现步骤摘要】
一种利用枯草芽孢杆菌发酵催化制备莱鲍迪苷M的方法


[0001]本专利技术属微生物发酵酶制剂
，涉及一种利用枯草芽孢杆菌发酵催化制备莱鲍迪苷M的方法。

技术介绍

[0002]甜菊糖（甜菊糖苷）是从甜叶菊干叶中提取的天然甜味剂，其甜度是蔗糖的200～300倍，能量约为蔗糖的1/300，无毒无副作用，具有较高的稳定性和安全性，是代替蔗糖理想的天然甜味剂，被国际上誉为“第三糖源”。有研究报道，长期食用甜菊糖可以预防高血压、糖尿病、肥胖病、蛀齿等疾病。甜菊苷占糖苷总量的60% ～ 70%，其口感差于莱鲍迪苷M，有一定的后苦味。莱鲍迪苷M是甜菊糖苷混合物中的一种糖苷成分，是甜菊糖苷成分中甜度最高的，口感最接近蔗糖，具有更高的稳定性。
[0003]目前，有报道利用酶法和发酵法对甜菊糖进行改质，可以将甜菊苷催化为莱鲍迪苷M，可以大大改善甜菊糖原料的口感，减弱后苦味。这些方法大多成本高、工艺复杂，难以工业化生产。因此，有必要发展一种工艺简单，成本低、能应用于工业化生产莱鲍迪苷M的方法。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是为本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种利用枯草芽孢杆菌发酵催化制备莱鲍迪苷M的方法，其特征在于包括如下步骤：（1）种子制备：将已合成的糖基转移酶UGT76G1基因和糖基转移酶UGT11基因连接到PBR322质粒载体上，将载有糖基转移酶UGT76G1基因和糖基转移酶UGT11基因的PBR322质粒载体导转到枯草芽孢杆菌的感受态中，将植入了糖基转移酶UGT76G1基因和糖基转移酶UGT11基因的枯草芽孢杆菌接入LB培养基，控制LB培养基温度30～37℃，转速100
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250 rpm，培养20～24 h；（2）种子罐培养：将步骤（1）所得的枯草芽孢杆菌按照1%～10%体积比的接种量接入到装有LB培养基的种子罐中培养，控制种子罐转速为200～400 rpm，通气比为0.1～1 V/V.min，30～37℃温度下培养20～24 h，得到种子培养液；（3）发酵罐生产：将种子培养液按照1%～10%体积比的接种量，接入装有发酵培养基的发酵罐中培养，控制发酵罐转速为200～1000 rpm，通气比为0.1～2 V/V.min，在30～37℃温度下，控制pH为6～8，培养48～72小时，发酵结束得到发酵液；（4）将步骤（3）所得的发酵液采用陶瓷膜超滤的方法得到枯草芽...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨乐，张敏，祁飞，戴永辉，
申请(专利权)人：安徽金禾实业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：