敲降RBMS1的试剂在制备治疗三阴性乳腺癌的药物中的应用制造技术

本发明专利技术涉及敲降RBMS1的试剂在制备治疗三阴性乳腺癌的药物中的应用，属于抗肿瘤药物技术领域。本发明专利技术提供了敲降RBMS1的试剂在制备治疗三阴性乳腺癌的药物中的应用。在三阴性乳腺癌中敲降RBMS1基因可以通过抑制B4GALT1基因转录进而下调PD

【技术实现步骤摘要】
敲降RBMS1的试剂在制备治疗三阴性乳腺癌的药物中的应用


[0001]本专利技术涉及抗肿瘤药物
，具体涉及敲降RBMS1的试剂在制备治疗三阴性乳腺癌的药物中的应用。

技术介绍

[0002]三阴性乳腺癌作为乳腺肿瘤分子分型一种，由于雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和表皮生长因子受体2(Her2)均呈阴性表达，所以一直没有很有效的靶标分子作为治疗策略，且大多数三阴性乳腺癌患者对免疫治疗表现出有限的反应，尤其是当肿瘤缺乏肿瘤浸润淋巴细胞而无法刺激抗癌免疫。因此，明确可以增强三阴性乳腺癌免疫原性的合适靶标，将为提高针对三阴性乳腺癌的免疫治疗提供一种新方法。程序性死亡配体
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1(PD
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L1；也称为B7
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H1或CD274)是一种33kDa的I型跨膜蛋白，可与T细胞上的程序性细胞死亡蛋白
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1(PD
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1)结合，形成一种主要的免疫检查点，从而抑制肿瘤浸润淋巴细胞效应子功能的激活、扩展和获得，并使癌细胞能够逃避T细胞介导的免疫监视。PD
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L1在肿瘤细胞中的过度表达也会介导嵌合抗原受体T(CAR
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T：Chimeric antigen receptor T cell)细胞耗竭，这导致CAR
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T细胞在实体瘤中的治疗效果不佳。因此，靶向PD
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L1/PD1轴可以重振肿瘤微环境中耗尽的肿瘤浸润淋巴细胞和CAR
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T细胞，为多种癌症提供有希望的治疗结果。然而，免疫检查点阻断单一疗法的反应率大多低于40％，并且大量患者对这种疗法反应不佳。因此，对新型免疫检查点调节剂的研究将能够为新的组合策略提供潜在的目标，以提高免疫检查点阻断疗法的疗效。但目前缺少针对三阴性乳腺癌的联合癌症免疫疗法的潜力靶标分子。

技术实现思路

[0003]本专利技术的目的在于提供敲降RBMS1的试剂在制备治疗三阴性乳腺癌的药物中的应用。在三阴性乳腺癌中敲降RBMS1基因能够增强肿瘤细胞杀伤能力，增强三阴性乳腺癌免疫治疗敏感性，实现三阴性乳腺癌免疫分型及治疗。
[0004]本专利技术提供了敲降RBMS1的试剂在制备治疗三阴性乳腺癌的药物中的应用。
[0005]本专利技术还提供了敲降RBMS1的试剂在制备抑制三阴性乳腺癌肿瘤生长的药物中的应用。
[0006]本专利技术还提供了敲降RBMS1的试剂在制备促进T细胞分泌CD8+中干扰素γ和/或颗粒酶B的药物中的应用。
[0007]本专利技术还提供了敲降RBMS1的试剂在制备下调PD
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L1表达的药物中的应用。
[0008]本专利技术还提供了敲降RBMS1的试剂在制备下调B4GALT1表达的药物中的应用。
[0009]本专利技术还提供了敲降RBMS1的试剂在制备增强三阴性乳腺癌免疫治疗敏感性的药物中的应用。
[0010]本专利技术还提供了检测RBMS1表达量的试剂在制备三阴性乳腺癌免疫分型试剂盒中的应用。
[0011]本专利技术还提供了一种三阴性乳腺癌免疫治疗药物，所述药物包括敲降RBMS1的试
剂和免疫治疗用药物。
[0012]优选的是，所述免疫治疗用药物包括免疫治疗用抗体。
[0013]优选的是，所述免疫治疗用抗体包括CTLA
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4抗体。
[0014]本专利技术提供了敲降RBMS1的试剂在制备治疗三阴性乳腺癌的药物中的应用。在三阴性乳腺癌中敲降RBMS1基因可以通过抑制B4GALT1基因转录进而下调PD
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L1表达从而影响肿瘤中浸润淋巴细胞对肿瘤细胞杀伤能力，增强三阴性乳腺癌免疫治疗敏感性，为三阴性乳腺癌免疫分型及治疗提供新的潜在靶点。本专利技术提供了RBMS1的新用途，可以用于判断三阴性乳腺癌患者是否适用免疫治疗，可作为免疫治疗方案中的联合抑制剂靶点、免疫抑制剂的潜在靶点，即提供了免疫疗法新靶点、还可用于制备抗肿瘤免疫药物检测试剂盒。
附图说明
[0015]图1为本专利技术提供的RBMS1和PD
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L1在乳腺癌患者中表达情况图；其中，A为乳腺癌患者乳腺正常组织和癌症组织免疫组化染色结果图；B为对A图中免疫组化染色结果进行定量及统计图；
[0016]图2为本专利技术提供的敲降RBMS1下调PD
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L1表达结果图；其中，A为调控PD
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L1的RNA结合蛋白筛选的火山图；B为在三种三阴性乳腺癌细胞中采用免疫印迹方法检测干扰素γ处理和PBS处理后PD
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L1蛋白水平表达；C为在三种三阴性乳腺癌细胞中采用流式细胞术检测干扰素γ处理和PBS处理后细胞表面PD
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L1表达；
[0017]图3为本专利技术提供的RBMS1敲降可以促进增强肿瘤细胞抗免疫原性结果图；其中，A为敲降RBMS1细胞与未敲降细胞在Balb/c小鼠皮下成瘤瘤体图片；B为瘤体重量统计差异分析图；C为小鼠肿瘤生长曲线及差异分析图；D为小鼠瘤体内分离出的淋巴细胞分泌的干扰素γ分析流式图及统计图；E为小鼠瘤体内分离出的淋巴细胞分泌的颗粒酶B分析流式图及统计图；
[0018]图4为本专利技术提供的RBMS1下调B4GALT1基因表达结果图；其中，A为敲降RBMS1基因后采用实时荧光定量PCR检测B4GALT1基因mRNA水平定量图；B为敲降RBMS1基因后免疫印迹法检测B4GALT1蛋白水平图；C图为敲降RBMS1基因后检测B4GALT1基因RNA稳定性统计图；
[0019]图5为本专利技术提供的B4GALT1调控PD
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L1表达结果图；其中，A为敲降B4GALT1后免疫印迹检测PD
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L1蛋白水平；B为PD
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L1与B4GLAT1相互作用检测图；
[0020]图6为本专利技术提供的在敲降RBMS1基因后回复B4GALT1后可促进肿瘤生长结果图；其中，A为在Balb/c小鼠皮下注射对照组、敲降RBMS1组及敲降RBMS1后回复B4GALT1组细胞成瘤实验瘤体照片；B为瘤体重量统计及差异分析图；C为瘤体生长曲线及差异分析图；
[0021]图7为本专利技术提供的抑制RBMS1表达可使免疫治疗发挥更好效果结果图；其中，A为小鼠成瘤后给予CTLA4抗体治疗后小鼠瘤体图片；B为瘤体重量及差异分析图；C为小鼠根据测量小鼠瘤体绘制的生长曲线及差异分析图；
[0022]图8为本专利技术提供的RBMS1敲降联合CTLA
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4抗体治疗可以促进增强肿瘤细胞抗免疫原性结果图；其中，A为四组小鼠瘤体内分离出的淋巴细胞分泌的干扰素γ分析流式图及统计图；B为小鼠瘤体内分离出的淋巴细胞分泌的颗粒酶B分析流式图及统计图。
具体实施方式
[0023]本专利技术提供了敲降RBMS1的试剂在制备治疗三阴性乳腺癌的药物中的应用。本专利技术应用生物信息学分析RBMS1在三阴性乳腺癌及免疫浸润少的冷肿瘤中高表达。
[0024]本专利技术还提本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.敲降RBMS1的试剂在制备治疗三阴性乳腺癌的药物中的应用。2.敲降RBMS1的试剂在制备抑制三阴性乳腺癌肿瘤生长的药物中的应用。3.敲降RBMS1的试剂在制备促进T细胞分泌CD8+中干扰素γ和/或颗粒酶B的药物中的应用。4.敲降RBMS1的试剂在制备下调PD
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L1表达的药物中的应用。5.敲降RBMS1的试剂在制备下调B4GALT1表达的药物中的应用。6.敲降RBMS1的试剂在制备增...

【专利技术属性】
技术研发人员：汪洋，张金瑞，张鸽，张文静，祁旸凡，赵瑾瑶，白璐，李田田，王鹿宁，
申请(专利权)人：大连医科大学，
类型：发明
国别省市：