液相色谱-质谱联用检测藿香正气口服液中化合物含量的方法技术

本发明专利技术属于药剂成分分析技术领域，具体涉及一种液相色谱

【技术实现步骤摘要】
液相色谱
‑
质谱联用检测藿香正气口服液中化合物含量的方法


本专利技术属于药剂成分分析
，具体涉及一种液相色谱
‑
质谱联用检测藿香正气口服液中化合物含量的方法。

技术介绍

[0001]藿香正气口服液，中成药名。为祛暑剂，具有解表化湿，理气和中之功效。用于外感风寒、内伤湿滞或夏伤暑湿所致的感冒，症见头痛昏重、胸膈痞闷、脘腹胀痛、呕吐泄泻；肠胃型感冒。藿香正气口服液收载于2020版《中国药典》一部，其中记载了采用不同的HPLC方法分别测定橙皮苷的含量、和厚朴酚与厚朴酚的总含量。为了提高并完善藿香正气口服液质量标准，需要检测出藿香正气口服液中指标性成分的含量。
[0002]现有《中国中药杂志》记载了余佳文等人建立了同时测定藿香正气口服液中橙皮苷、柚皮芸香苷、和厚朴酚、厚朴酚、甘草苷、甘草酸铵含量的UPLC分析方法，以控制制剂中陈皮、厚朴和甘草浸膏。《HPLC法同时测定藿香正气系列制剂中6种成分的含量》文献记载了王姣等人建立了同时测定藿香正气口服液中橙皮苷、欧前胡素、异欧前胡素、厚朴酚、和厚朴酚、苍术素含量的HPLC分析。《HPLC法同时测定藿香正气口服液中9种成分的含量》文献中记载了郭大乐等人建立了藿香正气口服液中甘草香豆素、异甘草素、芹糖甘草苷、柚皮芸香苷、甘草苷、川皮苷6种成分的含量检测方法。总之，现有技术不能精确检测藿香正气口服液中指标性成分的含量，特别是含量比较低的有效成分。

技术实现思路

[0003]有鉴于此，本专利技术在于提供一种测定藿香正气口服液中的甘草苷、甘草酸、橙皮苷、芸香柚皮苷、川陈皮素、水合氧化前胡素、厚朴酚、和厚朴酚以及茯苓酸A种一种或多种化合物含量的方法，该方法使用液相色谱
‑
质谱联用的方法进行检测，可以有效分离其中一种或多种成分并精确检测出每种成分的含量，可以为藿香正气口服液整体质量控制评价体系的建立提供科学实验依据。
[0004]所述液相色谱
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质谱联用的方法包括：先使用液相色谱进行梯度洗脱分离，然后进行质谱检测；在质谱检测中，所述甘草苷、甘草酸、橙皮苷、柚皮芸香苷、厚朴酚、和厚朴酚、茯苓酸A中的一种在负离子扫描模式下检测，或所述水和氧化前胡素、川陈皮素中的一种或多种在正离子扫描模式下检测，所述化合物对应的NCE能量分别为甘草苷为50V、甘草酸为30V、橙皮苷为50V、柚皮芸香苷为30V、厚朴酚为70V、和厚朴酚为70V、茯苓酸A 50V；水和氧化前胡素50V、川陈皮素50V。
[0005]进一步，使用质荷比417.1191
→
135.0071作为甘草苷的检测离子对，使用质荷比579.1719
→
271.0609作为芸香柚皮苷的检测离子对，使用质荷比609.1825
→
301.0706作为橙皮苷的检测离子对，使用质荷比821.3965
→
351.0557作为甘草酸的检测离子对，使用质荷比265.1234
→
249.0917作为和厚朴酚的检测离子对，使用质荷比265.1234
→
245.0967作
为和厚朴酚的检测离子对，使用质荷比497.3273
→
423.2904作为茯苓酸A的检测离子对，使用质荷比305.1019
→
203.0345作为水合氧化前胡素的检测离子对，使用质荷比403.1387
→
373.0924作为水合氧化前胡素的检测离子对。
[0006]进一步，所述质谱仪优选用四级杆轨道阱质谱。
[0007]进一步，所述质谱检测的条件为：选择平行反应检测模式；HESI源参数为：喷雾电压
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3.0kV/+3.5kV、鞘气(N2)35L/h、辅助气(N2)10L/h、吹扫气(N2)0L/h、毛细管温度350℃、辅助气加热温度350℃；和/或PRM分辨率为17500、隔离宽度为4.0Da、AGC target为2e5、Maximum IT为100ms。
[0008]进一步，所述液相色谱可以选用高效液相色谱柱进行分离，也可以选用超高效液相色谱(UHPLC)进行分离，为了达到更好的分离效果，选用选用粒径≤3.7μm的填料为固定相的色谱柱，即超高效液相色谱柱。
[0009]进一步，所述液相色谱选用包含流动相A和流动相B的溶液为流动相，所述流动相A为0.1％甲酸水溶液，所述流动相B为0.1％甲酸乙腈；所述梯度洗脱分离的洗脱程序为：
[0010]0min≤T≤1min，所述流动相B与所述流动相A的体积比为：5
‑
10:90
‑
95；
[0011]1min＜T≤12min，所述流动相B与所述流动相A的体积比为：10
‑
20:80
‑
90；
[0012]12min＜T≤20min，所述流动相B与所述流动相A的体积比为：20
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27:73
‑
80；
[0013]20min＜T≤24min，所述流动相B与所述流动相A的体积比为：27
‑
33:67
‑
73；
[0014]24min＜T≤30min，所述流动相B与所述流动相A的体积比为：33
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40:60
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67；
[0015]30min＜T≤33min，所述流动相B与所述流动相A的体积比为：40
‑
48:52
‑
60；
[0016]33min＜T≤42min，所述流动相B与所述流动相A的体积比为：48
‑
80:20
‑
52；
[0017]T＞42min，所述流动相B与所述流动相A的体积比为：80
‑
95:5
‑
20。
[0018]在某些具体实施例中，如果检测对象为藿香正气口服液或者藿香正气丸，供试品溶液的制备为：分别精密量取藿香正气口服液于容量瓶中，用80％甲醇溶液稀释，超声处理10min，放冷，用80％甲醇溶液补足至刻度，16000rpm于4℃离心10min，过0.22μm滤膜得上清液，即供试品溶液。如果为藿香正气丸，则先研细混匀后进行以上步骤配制供试品溶液。
[0019]进一步，在检测中，设置内标物为淫羊藿苷，在负离子扫描模式下，NCE能量为50V，检测离子对为721.2349
→
367.1175；或在正离子扫描模式下，NCE能量为40V，检测离子对为677.2440
→
531.1864。
[0020]进一步，前任一所述检测方法的检测对象也可以替换为包含甘草苷、甘草酸、橙皮苷、芸香柚皮苷、川陈皮素、水合氧化前胡素、厚朴酚、和厚朴酚以及茯苓酸A 9个成分中一种或多种组合物或者藿香正气丸。即前任一所述检测藿香正气丸或含有甘草苷、甘草酸、橙皮苷、芸香柚皮苷、川陈皮素、水合本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.液相色谱
‑
质谱联用检测藿香正气口服液中化合物含量的方法，其特征在于，所述藿香正气口服液中化合物为甘草苷、甘草酸、橙皮苷、芸香柚皮苷、川陈皮素、水合氧化前胡素、厚朴酚、和厚朴酚、茯苓酸A中的一种或多种；所述方法包括：先使用液相色谱进行梯度洗脱分离，然后进行质谱检测；在质谱检测中，所述甘草苷、甘草酸、橙皮苷、柚皮芸香苷、厚朴酚、和厚朴酚、茯苓酸A中的一种在负离子扫描模式下检测，或所述水和氧化前胡素、川陈皮素中的一种或多种在正离子扫描模式下检测，所述化合物对应的NCE能量分别为甘草苷为50V、甘草酸为30V、橙皮苷为50V、柚皮芸香苷为30V、厚朴酚为70V、和厚朴酚为70V、茯苓酸A 50V；水和氧化前胡素50V、川陈皮素50V。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，使用质荷比417.1191
→
135.0071作为甘草苷的检测离子对，使用质荷比579.1719
→
271.0609作为芸香柚皮苷的检测离子对，使用质荷比609.1825
→
301.0706作为橙皮苷的检测离子对，使用质荷比821.3965
→
351.0557作为甘草酸的检测离子对，使用质荷比265.1234
→
249.0917作为和厚朴酚的检测离子对，使用质荷比265.1234
→
245.0967作为和厚朴酚的检测离子对，使用质荷比497.3273
→
423.2904作为茯苓酸A的检测离子对，使用质荷比305.1019
→
203.0345作为水合氧化前胡素的检测离子对，使用质荷比403.1387
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373.0924作为水合氧化前胡素的检测离子对。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述质谱仪选用四级杆轨道阱质谱。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述质谱检测的条件为：选择平行反应检测模式；HESI源参数为：喷雾电压
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3.0kV/+3.5kV、鞘气(N2)35L/h、辅助气(N2)10L/h、吹扫气(N2)0L/h、毛细管温度350℃、辅助气加热温度350℃；和/或PRM分辨率为17500、隔离宽度为4.0Da、AGC target为2e5、Maximum IT为100ms。5.根据权利要求1所述的方法，所述液相色谱选用选用粒径≤3.7μm的填料为固定相。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述液相色谱选用包含流动相A和流动相B的溶液为流动相，所述流动相A为0.1％甲酸水溶液，所述流动相B为0.1％甲酸乙腈；所述梯度洗脱分离的洗脱程序为：0min≤T≤1min，所述流动相B与所述流动相A的体积比为：5
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10:90
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95；1min＜T≤12min，所述流动相B与所述流动相A的体积比为：10
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20:80
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90；12min＜T≤20min，所述流动相B与所述流动相A的体积比为：20
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27:73
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80；20min＜T≤24min，所述流动相B与所述流动相A的体积比为：27
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33:67
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73；24min＜T≤30min，所述流动相B与所述流动相A的体积比为：3...

【专利技术属性】
技术研发人员：余河水，董自亮，彭涛，李正，刘世琪，吴梦凡，原欢欢，禹奇男，
申请(专利权)人：天津中医药大学，
类型：发明
国别省市：