一种体外微量促卵泡素生物学活性的快速检测和诊断方法技术

本发明专利技术提供一种体外微量促卵泡素生物学活性的快速检测和诊断方法，涉及生物医学技术领域，包含以下步骤：从少量尿液样品中浓缩FSH；进一步从浓缩的FSH样品中去掉LH，得到纯化的FSH；建立SNAP

【技术实现步骤摘要】
一种体外微量促卵泡素生物学活性的快速检测和诊断方法


[0001]本专利技术涉及生物医学
，尤其涉及一种体外微量促卵泡素生物学活性的快速检测和诊断方法。

技术介绍

[0002]促卵泡素(FSH)对于维持正常的生理和生殖功能有非常重要的作用，包括促进卵泡各种细胞生长、发育，以利卵母细胞的成熟。FSH由垂体前叶嗜碱性细胞合成、分泌的一类糖蛋白，由α、β两个亚基组成，α有85个氨基酸，β有115 个氨基酸，特异性由β亚基组成，分子量约30kD。
[0003]促卵泡素受体(FSHR)是一种G蛋白偶联受体。FSH通过激活FSHR，通过下游信号通路促进卵泡周围间质细胞分化为内、外两层泡膜细胞并合成促黄体生成素受体；促进卵泡颗粒细胞增生和颗粒细胞内的芳香化酶系统活化，使雄激素转化为雌激，同时促进卵泡液分泌，使卵泡细胞逐渐增大，增加重量。关于人类FSH激素异常的情况，主要包括FSH分泌量的不足以及分泌的FSH生物活性的缺失，这些情况都会引起排卵障碍和不孕。体外检测FSH浓度的方法主要包括放射免疫，酶联免疫和侧向流试纸条等，但是这些方法只适用于检测 本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种体外微量促卵泡素生物学活性的快速检测和诊断方法，其特征在于：包含以下步骤：S1：取样：从少量尿液样品中浓缩纯化FSH；S2：纯化FSH：从浓缩的样品中去掉LH，得到纯化FSH；S3：建立SNAP
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FSHR HEK 293稳定表达细胞株；S4：利用样品FSH刺激FSHR内在化；S5：利用标准化的FSH刺激FSHR的内在化；S6：获取FSHR内在化图像；S7：利用Image J高内涵图像分析软件，比对待测样品和标准品的生物学活性。2.根据权利要求1所述的体外微量促卵泡素生物学活性的快速检测和诊断方法，其特征在于：所述S1的具体步骤：从待检对象采集尿液30ml，滤纸简单过滤去掉细胞组织碎片；然后将尿液转到两个15ml的超滤管中，离心超滤；超滤完成后，加入10ml的DMEM洗涤浓缩尿液蛋白，再次浓缩。3.根据权利要求2所述的体外微量促卵泡素生物学活性的快速检测和诊断方法，其特征在于：所述超滤管为amicon
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15， cutoff 10kD的超滤管。4.根据权利要求1所述的体外微量促卵泡素生物学活性的快速检测和诊断方法，其特征在于：所述S2的具体步骤为：将S1中得到的微量样品转入微量离心管，加入适量的LH抗体和Protein A适量珠子，离心去除尿液样品中的LH，得到FSH样品供ELISA测定浓度和用于刺激FSHR内在化。5.根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘建喜，
申请(专利权)人：南通大学，
类型：发明
国别省市：