Linc01374及编码mRNA在诊断胃癌中的应用制造技术

本发明专利技术涉及一种Linc01374及编码mRNA在诊断胃癌中的应用，涉及生物技术和医学技术领域。本发明专利技术提供了一种生物样本中Linc01374及编码mRNA在诊断胃癌中的应用，为胃癌诊断提供候选标志物，成本低，其广泛应用能够对胃癌高危患者做出精准、快速及无创的诊断。快速及无创的诊断。

【技术实现步骤摘要】
Linc01374及编码mRNA在诊断胃癌中的应用


[0001]本专利技术涉及生物技术和医学
，特别是涉及一种Linc01374及编码mRNA在诊断胃癌中的应用。

技术介绍

[0002]近年来，胃癌的发病率和死亡率显著增加，胃癌早期的高效准备诊疗尤为重要。内镜筛查是目前早期诊断胃癌的主要方法，但因其检查相关条件要求颇高、为侵入性且费用较高，而且部分患者检查过程中会产生剧烈的恶心、呕吐等反应，使其难以广泛应用于胃癌的临床筛查中，而且对于医生技术水平要求较高，内镜检查可能存在误诊情况。
[0003]外泌体是指由细胞分泌出来的直径30
‑
200nm的一种囊泡小体，其内含有大量的物质包括核酸、蛋白质、酶等，其作为天然的纳米载体不断地脱离各种类型细胞，与其他细胞外囊泡家族相比，外泌体的生物形成是在严格的加载机制控制下，是多泡体与浆细胞膜融合而不是直接脱落的结果，在包括恶性肿瘤在内的病理条件下不同的生物分子通过外泌体的分布，对恶性肿瘤的发生、进展和转移具有调节作用。其中长非编码RNA(LncRNAs)和可以将癌症、炎症等病理信号传递给细胞并对细胞分化、增殖、迁移、凋亡及死亡等状态进行调控。
[0004]多项研究已经证明，外泌体能够传递特定蛋白质和核酸给肿瘤微环境中的接受细胞或传递到特定的远距离位置。其独特表达模式和相对稳定的内容物使其成为肿瘤液体活检的一种新候选物，其具有作为胃癌早期诊断的生物标志物的巨大潜力。

技术实现思路

[0005]针对上述问题，本专利技术提供一种生物样本中Linc01374及编码mRNA在诊断胃癌中的应用，为胃癌诊断提供候选标志物，成本低，其广泛应用能够对胃癌高危患者做出精准、快速及无创的诊断。
[0006]为了达到上述目的，本专利技术提供一种生物样本中Linc01374及编码mRNA在诊断胃癌中的应用。
[0007]本专利技术人在研究过程中发现，胃癌患者血清中Linc01374的表达量显著高于正常人，并且与正常胃上皮细胞GES
‑
1相比，胃癌细胞SGC
‑
7901培养液上清外泌体中Linc01374基因表达显著增高。
[0008]本专利技术还提供了一种生物样本中Linc01374及编码mRNA作为生物标志物在开发和/或制备用于胃癌的诊断用途的产品中的应用。
[0009]本专利技术还提供了一种检测生物样本中Linc01374及编码mRNA的试剂盒，其特征在于，包括检测生物样本中Linc01374和/或Linc01374编码mRNA的试剂。
[0010]在其中一个实施例中，所述生物样本取自：血液、尿液、羊水中的至少一种。
[0011]在其中一个实施例中，所述生物样本为外周血。
[0012]在其中一个实施例中，所述对照样本中含有预定量的Linc01374和/或Linc01374
编码mRNA，作为判断Linc01374和/或Linc01374编码mRNA的高表达或低表达的对照。
[0013]在其中一个实施例中，所述试剂盒采用定量逆转录PCR法检测。
[0014]在其中一个实施例中，所述定量逆转录PCR法中，采用以下引物对进行荧光定量PCR反应：
[0015]正向序列：5
’‑
CGCTTGACCGCTCTTCCTTTCC
‑3’
；
[0016]反向序列：5
’‑
TGTGCTACTGTCTCCTGTCCATCC
‑3’
。
[0017]在其中一个实施例中，所述试剂盒还包括以下内参Linc01374荧光定量PCR引物对：
[0018]正向引物：5
’‑
GATGAGATTGGCATGGCTT
‑3’
[0019]反向引物：5
’‑
CACCTTCACCGTTCCAGTT
‑3’
。
[0020]与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：
[0021]本专利技术的一种生物样本中Linc01374及编码mRNA在诊断胃癌中的应用，解决了传统胃癌诊断技术中内镜和病理检查给患者带来痛苦和危险，以及检查成本高、效率低、可能存在误诊的问题，为胃癌诊断提供候选标志物，成本低，其广泛应用能够对胃癌高危患者做出精准、快速及无创的诊断。
附图说明
[0022]图1为实施例2中胃癌患者血清外泌体的电镜鉴定结果图；
[0023]图2为实施例2中健康人血清外泌体的电镜鉴定结果图；
[0024]图3为实施例2中Western Blot鉴定外泌体表面标记物的结果图，其中1为胃癌患者血清外泌体，2为健康人血清外泌体；
[0025]图4为实施例3中胃上皮细胞GES
‑
1来源外泌体的电镜鉴定结果图；
[0026]图5为实施例3中SGC
‑
7901细胞来源外泌体的电镜鉴定结果图；
[0027]图6为实施例3中Western Blot鉴定外泌体表面标记物的结果图，其中1为胃上皮细胞GES
‑
1来源外泌体，2为SGC
‑
7901细胞来源外泌体。
具体实施方式
[0028]为了便于理解本专利技术，下面将参照相关附图对本专利技术进行更全面的描述。附图中给出了本专利技术的较佳实施例。但是，本专利技术可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。相反地，提供这些实施例的目的是使对本专利技术的公开内容的理解更加透彻全面。
[0029]除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本专利技术的
的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本专利技术的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本专利技术。本文所使用的术语“和/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。
[0030]定义：
[0031]本专利技术所述的定量逆转录PCR法：指应用于以RNA作为起始材料的PCR实验中的一种实验方法，在该方法中，总RNA或信使RNA(mRNA)首先通过逆转录酶转录成互补DNA(cDNA)，然后以cDNA为模板进行qPCR反应。
[0032]试剂、材料、设备来源：
[0033]正常胃上皮细胞GES
‑
1和SGC
‑
7901细胞(北华大学药学院)
[0034]本实施例所用试剂、材料、设备如无特殊说明，均为市售来源；实验方法如无特殊说明，均为本领域的常规实验方法。
[0035]实施例1
[0036]比较胃癌患者及健康人血清Linc01374基因差异。
[0037]1、血清中miRNA提取。
[0038]采集患者及健康人外周血5mL于抗凝管中，3000r/min离心20min，取上层血清，按照miRNA提取试剂盒说明书进行miRNA的提取。分光光度计法测定RNA浓度。
[0039]2、RNA逆转录。
[0040]本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.生物样本中Linc01374及编码mRNA在诊断胃癌中的应用。2.生物样本中Linc01374及编码mRNA作为生物标志物在开发和/或制备用于胃癌的诊断用途的产品中的应用。3.一种检测生物样本中Linc01374及编码mRNA的试剂盒，其特征在于，包括检测生物样本中Linc01374和/或Linc01374编码mRNA的试剂。4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述生物样本取自：血液、尿液、羊水中的至少一种。5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述生物样本为外周血。6.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述对照样本中含有预定量的Linc01374和/或Linc01374编码mRNA，作为判断Linc01374和/或Linc01374编码mRNA的高表达或低表达的对照。7.根据权利要求3
‑
6中任一项所述的试剂...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭笑，叶思萍，杨文闯，石立强，安丽萍，林睿，
申请(专利权)人：北华大学，
类型：发明
国别省市：