从蜂花粉提取物中筛选出特征标志物的方法及特征标志物在鉴定蜂花粉中的应用技术

本发明专利技术公开一种从蜂花粉提取物中筛选出特征标志物的方法及特征标志物在鉴定蜂花粉中的应用，属于蜂花粉技术领域。该从蜂花粉提取物中筛选出特征标志物的方法，包括：S1、采用高效液相色谱串联高分辨质谱技术对蜂花粉提取物进行分析得到相关图谱数据；S2、将图谱数据进行处理获得峰对应的数据；S3、筛选峰对应的数据去除p＞0.05以及无二维质谱的数据得到数据集；S4、将数据集进行多元统计分析获得差异化合物；S5、分析差异化合物与抑制酪氨酸酶活性的相关性，筛选出特征标志物。本发明专利技术还包括特征标志物在鉴定蜂花粉中的应用。本发明专利技术筛选出的特征标志物可准确快速地判断待测蜂花粉是否具有优异的美白功效。粉是否具有优异的美白功效。粉是否具有优异的美白功效。

【技术实现步骤摘要】
从蜂花粉提取物中筛选出特征标志物的方法及特征标志物在鉴定蜂花粉中的应用


[0001]本专利技术涉及功能食品、化妆品和保健品
，具体涉及一种从蜂花粉提取物中筛选出特征标志物的方法及特征标志物在鉴定蜂花粉中的应用。

技术介绍

[0002]酪氨酸酶是人类黑色素形成的关键酶。酪氨酸酶羟化酪氨酸产生多巴胺，多巴胺被氧化为多巴醌，多巴醌在非酶条件下形成黑色素。过量的黑色素会导致人体色素沉着过多，影响人体皮肤的颜色，也会引起老年斑、雀斑、黄褐斑等皮肤病。抑制酪氨酸酶活性常被用作美白产品的评价指标。抑制酪氨酸酶活性越高，则美白功效越好。
[0003]蜂花粉是由植物花粉、花蜜和蜜蜂唾液混合而成的颗粒状物质。蜂花粉中含有多种营养物质和生物活性物质，是功能因子的天然来源，成为医药、化妆品和营养产品的原料和膳食补充剂。蜂花粉具有抑制酪氨酸酶活性，但是其抑制酪氨酸酶的标志性成分尚不清楚，关于美白蜂花粉的鉴定方法也缺乏。蜂花粉品种繁多，其成分受到地理环境、植物来源、生产方式等多种因素影响，导致蜂花粉的质量参差不齐，不同成分造成不同活性，所以不同来源的蜂花粉具本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种从蜂花粉提取物中筛选出特征标志物的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、采用高效液相色谱串联高分辨质谱技术对蜂花粉提取物进行分析得到相关图谱数据；S2、将步骤S1获得的所述图谱数据进行处理获得峰对应的数据；S3、筛选所述峰对应的数据去除p＞0.05以及无二维质谱的数据得到数据集；S4、将所述数据集进行多元统计分析获得差异化合物；S5、分析所述差异化合物与抑制酪氨酸酶活性的相关性，以皮尔逊相关系数r进行排序，筛选出r＞0.8的化合物即为特征标志物。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤S1中，所述高效液相色谱串联高分辨质谱技术中，设定色谱柱流速为0.3mL/min；柱温箱40℃；流动相为：A相
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0.13％甲酸，B相
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乙腈；梯度洗脱条件为：0min，5％乙腈；3min，5％乙腈；20min，30％乙腈；25min 60％乙腈；27min，5％乙腈；30min，5％乙腈，进样量为2μL，检测波长280nm；质谱分析采用电喷雾离子化形式，正离子模式；质谱条件为：离子喷雾电压为5500mV，温度为550℃，离子源气体155；离子源气体255，质谱采集质量
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电荷比范围为100
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1500，碰撞能量为35V，聚簇电位为60V。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤S4中，所述多元统计分析包括通过主成分分析获得样品之间的关系，并利用正交偏最小二乘判别分析筛选差异化合物。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，在步骤S4中，所述差异化合物的筛选条件为：p[1]＞0.05，p(corr)[1]＞0.5，VIP＞1。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤S1中，所述蜂花粉提取物由以下步骤制得：将破壁后的蜂花粉用石油醚超声脱脂，将脱脂后的蜂花粉与乙醇混合并超声辅助提取30
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40min，提取次数为2
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3次，提取温度≤40℃；之后进行真空浓缩得到乙醇粗提物，将所述乙醇粗提物用乙酸乙酯萃取得到萃取物，将所述萃取物旋蒸浓缩，之后冷冻干燥得到蜂花粉提取物。6.根据权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：鲁群，张星星，喻美华，刘睿，
申请(专利权)人：华中农业大学，
类型：发明
国别省市：