一种基于生物活性检测的美洲大蠊乙醇提取物质量检测方法技术

本发明专利技术提供一种基于生物活性检测的美洲大蠊乙醇提取物质量检测方法，可有效解决美洲大蠊乙醇提取物质量控制问题。该方法以美洲大蠊乙醇提取物的“功能与主治”为基础，通过建立的人永生化表皮细胞（HaCAT细胞）细胞增殖法/MTT比色法可以实现对美洲大蠊乙醇提取物生物活性质量控制和品质进行很好的评价。本发明专利技术方法重新现好、直观，可用于对美洲大蠊乙醇提取物生物活性进行测定，以达到综合评介和控制产品质量的目的，是中药质量控制和评价方法上的创新。创新。创新。

【技术实现步骤摘要】
一种基于生物活性检测的美洲大蠊乙醇提取物质量检测方法


[0001]本专利技术涉及一种体外生物活性测定评价的方法,尤其用于美洲大蠊乙醇提取物。
[0002]
技术介绍

[0003]目前，中药的质量标准主要是以通过测定某一个或某几个有效成分的含量来对中药的质量加以控制，且该指标成分在很大程度上不一定是该药品的药效成分或主要药效成分，即使为主要药效成分，由于其含量较低与临床有效剂量间缺乏相关性，因此，该指标成分测定也往往不一定能代表总体生物活性。最为关键的是对于组成药物多、成分及其复杂的中药制剂，很难用其中某个化学成分来阐述其药效。其次，中成药虽然经过了主要药效学及临床研究表明其具有有效性，但药效学研究和临床研究时样品的代表性、可靠性以及中药活性成分的可变性，不能保证每批产品是否仍然具有药效作用，其重现性一般未经验证。最后，中药制剂在生产过程中原料来源发生改变时、生产工艺改进时、在考核产品稳定时认为只要满足目前的药品标准即可，一般对生物活性可能发生改变考虑甚少。因此，存在某些药品虽然仍满足目前的药品标准，但其生物活性已经发生了很大的变化。对此，《中国药本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种既于美洲大蠊乙醇提取物体外生物活性评价方法包括以下步骤：a.标准品溶液和标准品稀释液的配制：将标准品冻干粉用无菌 PBS溶液重悬为500 μg/mL；再用维持培养基稀释至每 1ml 含 200 ng/mL的标准品稀释液；b.供试品溶液和供试品稀释液的配制：美洲大蠊乙醇提取物样品，首先用BCA 法测定样品的浓度；根据样品起始浓度用维持培养基将其稀释至31.25ug/mL～125 ug/mL范围内；c.测定实验操作如下：（1）HaCAT细胞株用完全培养基于 37℃，5% CO2条件下培养，控制细胞浓度为1.0
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10 5 ~5.0
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10 5
细胞/mL 进行传代，传代后 24~36 小时用于生物学活性检测；（2）弃上清，消化并收集细胞，用完全培养基配成 5.0
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10 4

【专利技术属性】
技术研发人员：耿福能，姜顺日，王杉杉，刘彬，吴桃清，张扬，沈咏梅，林庆华，耿越飞，
申请(专利权)人：四川好医生攀西药业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：