表达G2型猪流行性腹泻病毒S/S1的猪繁殖与呼吸综合征嵌合病毒及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种表达G2型猪流行性腹泻病毒S/S1的猪繁殖与呼吸综合征嵌合病毒及其应用，属于兽用生物制品技术领域。本发明专利技术提供两株重组表达G2型PEDV流行株S或S1基因的PRRSV嵌合病毒。基于PRRSV天然弱毒株感染性克隆平台构建的这两株嵌合病毒，均可诱导猪体同时产生抵抗PEDV和PRRSV的中和抗体。这些嵌合病毒可作为活载体疫苗候选株，用于研制同时抵抗PEDV和PRRSV流行株的新型基因工程疫苗。本发明专利技术涉及两株重组表达G2型PEDV流行株S或S1基因的PRRSV嵌合病毒的构建与拯救。这些嵌合病毒为有效防控PED和PRRS疫情提供了新型疫苗候选株和关键技术支持,同时抵抗PEDV和PRRSV流行株的基因工程活疫苗的成功研制可以实现“一针两防”，具有巨大经济价值和良好的市场前景。具有巨大经济价值和良好的市场前景。具有巨大经济价值和良好的市场前景。

【技术实现步骤摘要】
表达G2型猪流行性腹泻病毒S/S1的猪繁殖与呼吸综合征嵌合病毒及其应用


[0001]本专利技术涉及表达G2型猪流行性腹泻病毒S/S1的猪繁殖与呼吸综合征嵌合病毒及其应用，属于兽用生物制品


技术介绍

[0002]猪流行性腹泻(PED)是严重危害全球养猪业的烈性传染病。临床上能引起仔猪腹泻，呕吐，脱水和代谢性酸中毒等症状。其病原体猪流行性腹泻病毒(PEDV)为单股正链RNA 病毒，属于冠状病毒科阿尔法冠状病毒属(CoV
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α)。PEDV可以感染所有年龄猪，10日龄内仔猪感染后发病率和死亡率都可达到100％。疫苗免疫是防控PED的有效方法，然而，现有 PEDV商品化疫苗(包含灭活疫苗以及基于G1型毒株的弱毒疫苗)无法为2010年以来出现的新型PEDV变异株(G2型)提供足够的交叉保护力。猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)同样给全球养猪业造成巨大经济损失。临床上主要引起母猪繁殖障碍和仔猪呼吸系统综合征。其病原体猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)为单股正链RNA病毒，属于动脉炎病毒科(Arteriviridae)。PRRSV是目本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1. 一种重组载体，用于构建表达G2型猪流行性腹泻病毒S蛋白的猪繁殖与呼吸综合征嵌合病毒，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。2. 一种重组载体，用于构建表达G2型猪流行性腹泻病毒S1蛋白的猪繁殖与呼吸综合征嵌合病毒，其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。3.表达G2型猪流行性腹泻病毒S或S1蛋白的猪繁殖与呼吸综合征嵌合病毒，其特征在于，所述嵌合病毒系利用如权利要求1或2所述重组载体所拯救构建。4.权利要求3所述表达G2型猪流行性腹泻病毒S或S1蛋白的猪繁殖与呼吸综合征嵌合病毒的构建方法，其特征在于，所述方法如下：以HP
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PRRSV天然弱毒株感染性克隆rJSTZ1712
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12为活病毒载体，利用同源重组或者双酶切连接方法在其ORF1b和ORF2a基因之间插入G2型PEDV流行株XJ1904
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34的S或S1基因序列，构建拯救表达G2型PEDV流行株S或S1蛋白的PRRSV嵌合病毒。5. 根据权利要求4所述表达G2型猪流行性腹泻病毒S或S1蛋白的猪繁殖与呼吸综合征嵌合病毒的构建方法，其特征在于，所述HP
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PRRSV天然弱毒株感染性克隆rJSTZ1712
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12载体，包含HP
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PRRSV JSTZ1712
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12分离株基因组全长cDNA序列，该全长cDNA序列的5
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端加有巨细胞病毒真核启动子序列，3
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端Poly(A)尾下游加有丁肝炎病毒核酶序列以及牛生长激素多聚腺苷酸信号转录终止序列；所述rJSTZ1712
‑
12载体...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈南华，邱明，李树滨，朱建中，
申请(专利权)人：扬州大学，
类型：发明
国别省市：