一种高浓度抗HER2的抗体制剂及其用途制造技术

本发明专利技术涉及一种高浓度抗HER2的抗体制剂及其用途。本发明专利技术的抗体制剂无额外缓冲剂，而是高浓度的蛋白自缓冲，减少组氨酸氧化产物如天冬氨酸盐和甲酰胺等对抗体活性影响。该制剂能够充分防止蛋白聚集、降解、氧化或者变性等，从而保持其有效组分的生物学活性，适合于临床使用。使用。使用。

【技术实现步骤摘要】
Volume”，Physiology Reviews”，1993；73：1
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78]。
[0010]找到一种合适的缓冲剂对药物蛋白来说是尤其重要的。蛋白质的构象和活性关键地取决于pH值。蛋白质易受各种pH的影响，比小分子药物受影响要严重很多。例如，天门冬酰胺和谷氨酰胺的侧链酰胺在低pH值(小于4.0)以及在中性或更高的pH值(大于6.0)时被脱去酰胺基。天冬氨酸残基在低pH值时促进相邻肽键的水解。特别是在硫醇存在下，二硫键的稳定性和分布取决于pH值。蛋白质的溶解度、絮凝、凝集、沉淀和纤丝化精确地取决于pH值。对一些药物制剂来说重要的结晶习性也关键地取决于pH值。药物用途的缓冲剂必须不仅满足缓冲能力以维持正确的pH值，而且它们必须是这样的一种缓冲剂，即它们的给予不会强烈地扰乱受试者的生理pH值。药物制剂的缓冲剂还必须与典型地复杂的配制过程不矛盾。例如升华或蒸发的缓冲剂，例如乙酸盐和咪唑，通常在冷冻干燥期间和在重新构成的冷冻干燥产品中不能依赖其保持pH值。其它从蛋白质无定形相中结晶出来的缓冲剂，例如磷酸钠，在需要冷冻的工艺中不能保持pH值。
[0011]在药物终产品中用于保持pH的缓冲剂还必须不仅在保持的pH下是有效的，而且必须是安全的和适合于患者。例如一些其它有用的缓冲剂在低或高浓度下的柠檬酸盐和在高浓度下的乙酸盐对胃肠外给药时是不希望产生痛苦的。一些缓冲剂例如乙酸盐、琥珀酸盐、柠檬酸盐、组氨酸(咪唑)、磷酸盐和Tris已经被发现用于配制药物蛋白，它们所有都具有不希望的限制和缺点，并且它们都具有固有的缺点，即是制剂中的额外的组分，其使配制过程变得复杂，增加了有害的组分、影响其它稳定性、贮存期限和最终用户可接受性的风险。
[0012]组氨酸的氧化降解已被广泛报道，在一项研究中，组氨酸通过光氧化产生光敏剂，从而介导单克隆抗体的光降解，组氨酸还可以被过氧化氢和金属阳离子氧化。单线态氧攻击组氨酸的咪唑环，引发组氨酸的光氧化反应，形成一种内过氧化物中间体，该中间体进一步分解，生成多种最终产物，包括天冬氨酸和尿素。咪唑环也易受金属催化氧化，主要生成2
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氧组氨酸及其开环产物，如天冬氨酸盐和甲酰胺。另一方面，氨基酸官能团可以氧化产生二氧化碳、氨、醛和含有咪唑部分的羧酸。观察到在含有组氨酸溶液中的单克隆抗体的活性减弱，鉴定其组氨酸氧化产物为甲酰基咪唑[Chunlei Wang，Aaron Yamniuk，Jun Dai，Investigation of a Degradant in a Biologics Formulation Buffer Containing L
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Histidine]。

技术实现思路

[0013]为了追求更佳的临床效果，专利技术人经过浓缩得到高浓度的抗HER2制剂，获得了一种相较于罗氏公司的PHESGO等高浓度产品制备简单、效果更优的皮下注射的抗HER2高浓度制剂。本专利技术无额外的缓冲剂，而是高浓度的蛋白自缓冲，减少组氨酸氧化产物如大冬氨酸盐和甲酰胺等对抗体活性影响。本专利技术进一步地对高浓度制剂处方进行了摸索和研究，发现甲硫氨酸对阻止高浓度抗体聚集、降解有明显作用；同时，还发现聚山梨酯20在药物制剂中用作助溶剂，对提高药物溶解度，增强药物的药理作用或减少副作用有明显益处。另外高浓度制剂中添加了透明质酸酶可以顺利实现皮下注射。综上，本专利技术提供了一种针对皮下注射的抗HER2高浓度制剂，且能稳定保存所述高浓度制剂，该制剂能够充分防止蛋白聚集、降解、氧化或者变性等，从而保持其有效组分的生物学活性，适合于临床使用。
[0014]专利技术详述
[0015]1、术语
[0016]本说明书中提及的所有公布、专利和专利申请都以引用的方式并入本文，所述引用的程度就如同已特定地和个别地指示将各个别公布、专利或专利申请以引用的方式并入本文。
[0017]在下文详细描述本专利技术前，应理解本专利技术不限于本文中描述的特定方法学、方案和试剂，因为这些可以变化。还应理解本文中使用的术语仅为了描述具体实施方案，而并不意图限制本专利技术的范围。除非另外定义，本文中使用的所有技术和科学术语与本专利技术所属领域中普通技术人员通常的理解具有相同的含义。
[0018]本文所公开的某些实施方案包含了数值范围，并且本专利技术的某些方面可采用范围的方式描述。除非另有说明，应当理解数值范围或者以范围描述的方式仅是出于简洁、便利的目的，并不应当认为是对本专利技术的范围的严格限定。因此，采用范围方式的描述应当被认为具体地公开了所有可能的子范围以及在该范围内的所有可能的具体数值点，正如这些子范围和数值点在本文中已经明确写出。不论所述数值的宽窄，上述原则均同等适用。当采用范围描述时，该范围包括范围的端点。
[0019]当涉及可测量值比如量、暂时持续时间等时，术语“约”是指包括指定值的
±
20％、或在某些情况下
±
10％、或在某些情况下
±
5％、或在某些情况下
±
1％、或在某些情况下
±
0.1％的变化。
[0020]术语“抗HER2抗体”是指能够识别、结合来自于人的HER2分子的抗体。
[0021]本文所用的术语“抗体”，典型是指包含通过共价二硫键和非共价相互作用保持在一起的两条重(H)多肽链和两条轻(L)多肽链的Y型四聚蛋白。天然IgG抗体即具有这样的结构。每条轻链由一个可变结构域(VL)和一个恒定结构域(CL)组成。每条重链包含一个可变结构域(VH)和恒定区。
[0022]如在此使用的，广义上的“抗体”的类型可包括如多克隆抗体(polyclonal antibodies)、单克隆抗体、嵌合抗体、人源化抗体及灵长类化抗体、CDR移植抗体(CDR
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grafted antibody)、人类抗体(包括重组产生的人类抗体)、重组产生的抗体、胞内抗体、多特异性抗体、双特异性抗体、单价抗体、多价抗体、抗个体基因型抗体、合成抗体(包括突变蛋白及其变体)等等。
[0023]术语“单克隆抗体”(或称“单抗”)指由单一细胞克隆产生的基本均质、仅针对某一特定抗原表位的抗体。单克隆抗体可以使用本领域中已知的多种技术制备，包括杂交瘤技术、重组技术、噬菌体展示技术、转基因动物、合成技术或上述技术的组合等。
[0024]术语“抗体片段”包含完整抗体的至少一部分。如在此所使用，抗体分子的“片段”包括抗体的“抗原结合片段”，并且术语“抗原结合片段”是指免疫球蛋白或抗体中与所选抗原或其免疫原性决定部分特异性结合或反应的多肽片段，或由此片段进一步衍生的融合蛋白产物，例如单链抗体，嵌合抗原受体中的胞外结合区等。示例性的抗体片段或其抗原结合片段包括但不限于：可变轻链片段、可变重链片段、Fab片段、F(ab')2片段、Fd片段、Fv片段、单结构域抗体、线性抗体、单链抗体(scFv)及由抗体片段形成的双特异性抗体或多特异性抗体等。
[0025]术语“抗原”是指被抗体或抗体结合片段识别并特异性结合的物质，广义上，抗原可以包括所选本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种稳定的适用于皮下注射的抗HER2高浓度溶液制剂，其特征在于：无额外的缓冲剂，组分包含：1)100～200mg/ml抗HER2抗体；2)60～90mg/ml稳定剂，其中所述稳定剂是糖类；3)0.3～2mg/ml非离子表面活性剂；4)0～50mM甲硫氨酸；5)150至16000U/ml透明质酸酶。2.如权利要求1所述的制剂，其特征在于：所述的抗HER2抗体为曲妥珠单抗、帕妥珠单抗和/或它们的抗原结合片段。3.如权利要求1所述的制剂，其特征在于：所述的抗HER2抗体的浓度为100～150mg/ml，优选为120mg/ml。4.如权利要求1所述的制剂，其特征在于：所述制剂的pH值为5.0～6.0，优选pH值为5.5。5.如权利要求1所述的制剂，其特征在于：所述稳定剂为蔗糖、甘露醇和/或海藻糖，优选为蔗糖，所述稳定剂的浓度优选为70mg/ml。6.如权利要求1所述的制剂，其特征在于：所述表面活性剂为聚山梨酯20或聚山梨酯80，所述浓度为0.3～1.5mg/ml，浓度优选为1.0mg/ml。7.如权利要求1所述的制剂，其特征在于：甲硫氨酸作为第二稳定剂使用，甲硫氨酸的浓度为5至20mM。8.如权利要求1所述的制剂，其特征在于：所述透明质酸酶含量为1000至16000个U/ml，优选为2000U/ml。9.一种稳定的适用于皮下注射的抗HER2高浓度溶液制剂，其特征在于：无额外的缓冲剂，组分包含：100～150mg/ml抗HER2抗体、60～90mg/ml蔗糖、0.3～1.5mg/ml聚山梨酯20、0至50mM甲硫氨酸、2000U/ml透明质酸酶，pH范围是5.0～6.0。10.一种稳定的适用于皮下注射的抗HER2高浓度溶液制剂，其特征在于：组分为：60mg/ml曲妥珠和60mg/ml帕妥珠抗体、25～50mg/ml蔗糖、25～50mg/ml海藻糖、0.3～1mg/ml聚山梨酯20、5～50mM甲硫氨酸、2000U/ml透明质酸酶、pH5.5。11.一种稳定的适用于皮下注射的抗HER2高浓度溶液制剂，其特征在于：组分为：40mg/ml曲妥珠和80mg/ml帕妥珠抗体、33.3～66.7mg/ml蔗糖、16.7～33.3mg/ml海藻糖、0.3～1mg/ml聚山梨酯20、5～50mM甲硫氨酸、2000U/ml透明质酸酶、pH5.5。12.一种稳定的适用于皮下注射的抗HER2高浓度溶液制剂，其特征在于：组分为：120mg/ml曲妥珠和帕妥珠抗体、70mg/ml蔗糖、1mg/ml聚山梨酯20、10mM甲硫氨酸、2000U/ml透明质酸酶，pH5.5。13.一种稳定的适用于皮下注射的抗HER2高浓度溶液制剂，其特征在于：组分为：60mg/ml曲妥珠和60mg/ml帕妥...

【专利技术属性】
技术研发人员：周兵兵，张乐，丛日圆，董婷，范贺超，杨萌萌，闫莽，王乐，艾现伟，王桂江，李道远，王克波，王庆民，孙丽霞，安振明，刘骏，
申请(专利权)人：齐鲁制药有限公司，
类型：发明
国别省市：