一种从胡黄连中发酵提取胡黄连苷的工艺制造技术

本发明专利技术公开了一种从胡黄连中发酵提取胡黄连苷的工艺，包括：胡黄连原料粉碎；酶制剂的制备：将纤维素酶、半纤维素酶、蛋白酶、淀粉酶、糖苷酶分散在水中得到酶制剂；发酵产物的制备：向酶制剂中加入蔗糖酯、草酸铵混合均匀，加入粉碎的胡黄连，高温灭活；胡黄连提取物的提取：按照渗漉法用提取溶剂对发酵产物进行提取，提取后溶液减压浓缩、稀释后上已净化的大孔吸附树脂吸附、洗脱，收集洗脱液，减压浓缩、干燥、粉碎；胡黄连苷的获取：将胡黄连提取物用无水乙醇溶解，过滤，滤液拌入拌样用层析硅胶，干燥，洗脱，粉碎得胡黄连苷。本发明专利技术所述的一种从胡黄连中发酵提取胡黄连苷的工艺，制备简单，胡黄连苷含量高，安全、易于操作，成本低廉。成本低廉。成本低廉。

【技术实现步骤摘要】
一种从胡黄连中发酵提取胡黄连苷的工艺


[0001]本专利技术涉及胡黄连苷提取
，特别涉及一种从胡黄连中发酵提取胡黄连苷的工艺。

技术介绍

[0002]胡黄连为玄参科多年生草本植物，与黄连名称相似，且均为苦寒清热燥湿之品，善除胃肠湿热，同为治湿热泻痢之良药。目前发现胡黄连化学成分主要有环烯醚萜类、葫芦素类、苯乙醇糖苷类和酚苷类，另外还含有极少量的甘露醇、胡黄连醇、胡黄连甾醇、香荚兰乙酮及芳香酸等，胡黄连中环烯醚萜苷类成分(胡黄连总皂苷)为主要有效成分具有抗乙型肝炎病毒及保肝、降酶等多种药理活性，具有清热、除湿、明目、补肝、益胆、杀虫的效用，主治痨热咳嗽、湿热泻痢、小儿疳积、目赤等疾病。
[0003]目前从胡黄连提取胡黄连总皂苷的方法已有不少文献报道，大多采用乙醇回流提取后配合大孔树脂为吸附剂的分离制备方法，但存在胡黄连总皂苷的提取效率低，且工艺不稳定。故此，我们提出了一种从胡黄连中发酵提取胡黄连苷的工艺。

技术实现思路

[0004]本专利技术的主要目的在于提供一种从胡黄连中发酵提取胡黄连苷的工艺，可以有效解决
技术介绍
中的问题。
[0005]为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案为：
[0006]一种从胡黄连中发酵提取胡黄连苷的工艺，包括以下步骤：
[0007]步骤一、胡黄连原料粉碎：将胡黄连原料进行粉碎至粒径为100～200目，备用；
[0008]步骤二、酶制剂的制备：将纤维素酶、半纤维素酶、蛋白酶、淀粉酶、糖苷酶分散在水中得到酶制剂；
[0009]步骤三、发酵产物的制备：向酶制剂中加入蔗糖酯、草酸铵混合均匀，加入粉碎的胡黄连，20～25℃低速搅拌8～10h，搅拌速度为40～60r/min，高温灭活得到发酵产物；
[0010]步骤四、胡黄连提取物的提取：按照渗漉法用提取溶剂对发酵产物进行提取，提取后溶液55～60℃减压浓缩至40℃时测定相对密度为1.01g/cm3，浓缩液加适量水稀释后上已净化的大孔吸附树脂吸附，用水洗大孔吸附树脂柱，洗至近无色，并且molish反应阴性，用3～5倍柱体积30～75％乙醇洗脱，收集洗脱液，55～60℃减压浓缩、干燥、粉碎，得胡黄连提取物；
[0011]步骤五、胡黄连苷的获取：将胡黄连提取物用无水乙醇溶解，过滤，滤液拌入拌样用层析硅胶，干燥，加载于分离用层析硅胶柱床顶端，用乙酸乙酯、无水乙醇的混合溶剂洗脱，收集流出液，获取纯度大于55％流份的胡黄连苷，回收溶剂，干燥，粉碎得胡黄连苷。
[0012]优选的，在所述步骤一中的胡黄连原料为西藏胡黄连(Picrorhiza scrophulariiflora Pennell)或印度胡黄连(Picrorhiza kurroa Royle ex Benth)的干燥根茎。
[0013]优选的，在所述步骤二中，所述纤维素酶的浓度为14～18u/g，所述半纤维素酶的浓度为20～26u/g，所述蛋白酶的浓度为2～4u/g，淀粉酶的浓度为3～5u/g，糖苷酶的浓度为2～3u/g。
[0014]优选的，在所述步骤三中，所述酶制剂、蔗糖酯、草酸铵和粉碎的胡黄连的质量比为100～120：1～3：0.5～1：10～30。
[0015]优选的，在所述步骤四中，所述提取溶剂为水、乙醇或者其混合溶液，所述发酵产物和提取溶剂的质量比为100：180～240。
[0016]优选的，在所述步骤四中，所述大孔吸附树脂为非极性或弱极性树脂，所述非极性为苯乙烯型树脂，所述弱极性树脂为聚苯乙烯
‑
丙烯酸酯型。
[0017]优选的，所述苯乙烯型树脂为HPD100型大孔树脂，聚苯乙烯
‑
丙烯酸酯型树脂为ME
‑
2型大孔树脂。
[0018]优选的，在所述步骤五中，所述拌样用层析硅胶的用量为胡黄连提取物0.5～1.5倍重量，分离用层析硅胶加入量为胡黄连提取物重量的3～7倍重量。
[0019]优选的，在所述步骤五中，所述混合洗脱溶剂为乙酸乙酯、无水乙醇的混合溶剂，梯度或等度洗脱，无水乙醇和乙酸乙酯的容积百分比为1～85︰1～5。
[0020]与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：
[0021]1、本专利技术将胡黄连粉碎后，便于纤维素酶、半纤维素酶能够快速渗入其细胞壁内，快速释放药物有效成分，而蛋白酶、淀粉酶、糖苷酶可进一步水解出单糖或二糖提高酶制剂的活性，并对酶制剂的活性中心起到保护作用，保证酶制剂的稳定性，提高胡黄连总皂苷的溶出程度与溶出效率；
[0022]2、本专利技术通过向酶制剂中加入蔗糖酯与草酸铵，不仅可有效降低发酵过程体系的黏度，提高酶解速度，且可快速将酶制剂运输到细胞壁并快速打开细胞壁通道，有效释放胡黄连苷，提高收率，使黄连苷含量均超过90％，对于胡黄连药材资源综合利用具有较积极的意义；
[0023]3、本专利技术采用大孔树脂结合硅胶柱层析的方式将减少提取过程产生的提取物性质差异变化对提取物的性质影响，使分离产物性质更稳定，提取分离纯化工艺系统性更强，重现性更好，制备工艺简单，胡黄连苷含量高，安全、易于操作，成本低廉。
附图说明
[0024]图1为本专利技术一种从胡黄连中发酵提取胡黄连苷的工艺的流程图。
具体实施方式
[0025]为使本专利技术实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体实施方式，进一步阐述本专利技术。
[0026]在本专利技术的描述中，需要说明的是，术语“上”、“下”、“内”、“外”“前端”、“后端”、“两端”、“一端”、“另一端”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本专利技术和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本专利技术的限制。此外，术语“第一”、“第二”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性。
[0027]在本专利技术的描述中，需要说明的是，除非另有明确的规定和限定，术语“安装”、“设置有”、“连接”等，应做广义理解，例如“连接”，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或一体地连接；可以是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连，可以是两个元件内部的连通。对于本领域的普通技术人员而言，可以具体情况理解上述术语在本专利技术中的具体含义。
[0028]实施例一
[0029]如图1所示，一种从胡黄连中发酵提取胡黄连苷的工艺，包括以下步骤：
[0030]步骤一、胡黄连原料粉碎：将胡黄连原料进行粉碎至粒径为100～200目，备用，胡黄连原料为西藏胡黄连(Picrorhiza scrophulariiflora Pennell)或印度胡黄连(Picrorhiza kurroa Royle ex Benth)的干燥根茎；
[0031]步骤二、酶制剂的制备：将纤维素酶、半纤维素酶、蛋白酶、淀粉酶、糖苷酶分散在水中得到酶制剂，纤维素酶的浓度为14u/g，半纤维素酶的浓度为20u/g，蛋白酶的浓度为2本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种从胡黄连中发酵提取胡黄连苷的工艺，其特征在于：包括以下步骤：步骤一、胡黄连原料粉碎：将胡黄连原料进行粉碎至粒径为100～200目，备用；步骤二、酶制剂的制备：将纤维素酶、半纤维素酶、蛋白酶、淀粉酶、糖苷酶分散在水中得到酶制剂；步骤三、发酵产物的制备：向酶制剂中加入蔗糖酯、草酸铵混合均匀，加入粉碎的胡黄连，20～25℃低速搅拌8～10h，搅拌速度为40～60r/min，高温灭活得到发酵产物；步骤四、胡黄连提取物的提取：按照渗漉法用提取溶剂对发酵产物进行提取，提取后溶液55～60℃减压浓缩至40℃时测定相对密度为1.01g/cm3，浓缩液加适量水稀释后上已净化的大孔吸附树脂吸附，用水洗大孔吸附树脂柱，洗至近无色，并且molish反应阴性，用3～5倍柱体积30～75％乙醇洗脱，收集洗脱液，55～60℃减压浓缩、干燥、粉碎，得胡黄连提取物；步骤五、胡黄连苷的获取：将胡黄连提取物用无水乙醇溶解，过滤，滤液拌入拌样用层析硅胶，干燥，加载于分离用层析硅胶柱床顶端，用乙酸乙酯、无水乙醇的混合溶剂洗脱，收集流出液，获取纯度大于55％流份的胡黄连苷，回收溶剂，干燥，粉碎得胡黄连苷。2.根据权利要求1所述的一种从胡黄连中发酵提取胡黄连苷的工艺，其特征在于：在所述步骤一中的胡黄连原料为西藏胡黄连(Picrorhiza scrophulariiflora Pennell)或印度胡黄连(Picrorhiza kurroa Royle ex Benth)的干燥根茎。3.根据权利要求1所述的一种从胡黄连中发酵提取胡黄连苷的工艺，其特征在于：在所述步骤二中，所述纤维素酶的浓度为1...

【专利技术属性】
技术研发人员：沈彩芹，刘刚，刘培冉，刘乃兵，赵学峰，田雪文，杨志强，张志东，
申请(专利权)人：山东康裕生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：