MAGEA4T细胞受体制造技术

本发明专利技术涉及一种对MAGE

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】MAGE A4 T细胞受体
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求于2019年3月27日提交的欧洲专利申请No.19 165 387.2的权益，其通过引用全文并入本文。
[0003]关于序列表的声明
[0004]与本申请相关的序列表以文本格式代替纸质副本提供，并在此通过引用并入本说明书中。包含序列表的文本文件名称是MED16702PCT_ST25。文本文件是146KB，在2020年3月24日创建，并且在提交本说明书的同时通过EFS
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Web电子递交。

技术介绍

[0005]本专利技术涉及对MAGE
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A4特异性的分离的T细胞受体(TCR)、包含TCR功能部分的多肽、多价TCR复合物、编码TCR的核酸、表达TCR的细胞、以及包含它们的组合物和药物组合物。本专利技术还涉及在医学治疗方法中或用于配制和/或用作药物中，特别是用于治疗癌症的应用中使用前述物质的方法。
[0006]相关技术的描述
[0007]形成细胞介导的免疫系统的部分的T淋巴细胞(或T细胞)在消除病原体中起主要作用。T细胞在胸腺中发育并在其表面上表达TCR分子，该TCR分子允许识别在有核细胞上表达的主要组织相容性复合体(MHC)分子上呈递的肽(称为抗原呈递)。来源于病原体的抗原，即由MHC分子呈递的外源抗原将引发强的T细胞应答，而由于在此类T细胞发育过程中在胸腺中的自身抗原特异性T细胞的阴性选择，自身抗原通常不会导致T细胞应答。因此，免疫系统可以区分呈递外源抗原或自身抗原的有核细胞，并且通过T细胞的强有效的细胞因子释放和细胞毒性机制特异性地靶向和消除受感染的细胞。
[0008]免疫系统的力量已被认为是未来癌症治疗的一个很有前途的工具。在过去的几十年中，研究已经开始通过利用过继细胞疗法(ACT)来开发T细胞的独特性质，该过继细胞疗法涉及施用离体扩增的源自患者的淋巴细胞。ACT对于癌症的治疗时一个有吸引力的概念，因为它不需要患者的免疫能力，并且被转移的淋巴细胞的特异性可以靶向通常不能有效地触发自体T细胞应答的非突变并因此免疫原性差的肿瘤抗原。尽管已证明ACT是各种类型癌症的有前途的治疗，但其作为临床治疗的广泛应用仍受到对来自每位患者的肿瘤特异性T细胞的定制(custom)分离和表征的需求的阻碍—定制(custom)分离和表征这一过程不仅可能是困难且耗时的，也常常不能产生高亲合力T细胞(Xue等，Clin.Exp.Immunol.2005 Feb；139(2):167
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172；Schmitt et al.,Hum.Gene Ther.2009 Nov；20(11):1240
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1248)
[0009]肿瘤抗原特异性TCR向原代T细胞的遗传转移可以克服ACT当前的一些局限性，因为它允许快速产生具有定义的抗原特异性的肿瘤反应性T淋巴细胞，甚至在免疫受损患者中也是如此。然而，鉴定具有特异性识别肿瘤抗原并在体内显示出预期抗肿瘤作用的TCR的合适T细胞克隆仍然是目前研究的主题。考虑到2012年全球约有1410万新发癌症病例，并且目前癌症是全球约14.6％的人类死亡的原因，因此迫切需要新的和有效的治疗方案。本专利技术的目的是满足上述需要。
[0010]MAGE
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A4属于黑素瘤抗原(MAGE)家族。该MAGE家族在包括黑素瘤、结肠、肺至乳腺和其它肿瘤的各种恶性肿瘤类型中表达。具体地，根据其组织表达模式，将MAGE家族分成两组，其中MAGE
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A亚家族在睾丸的生殖细胞中表达，在恶性肿瘤中异常再表达。这也适用于MAGE
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A4。
[0011]肿瘤组织表达研究已经揭示在19
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35％的非小细胞肺癌(NSCLC)病例、13％的乳腺癌病例、47％的上皮卵巢癌病例和22％的结肠直肠癌病例中，MAGE
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A4(过)表达(Tajima等，Lung Cancer 2003；42:23
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33；Gure等，Clin Cancer Res 2005,11:8055
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8062；Kim等，Int J Mol Med 2012,29:656
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662；Otte等，Cancer Res 2001,61:6682
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668；Daudi等，PLoS One 2014,9:e104099；Li等，Clin Cancer Res 2005,11:1809
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1814)。

技术实现思路

[0012]本专利技术的一个目的是提供一种分离的MAGE
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A4特异性T细胞受体(TCR)。
[0013]具体地，所述TCR特异性地识别氨基酸序列SEQ ID NO:1或其片段。
[0014]在具体的实施方案中，所述TCR特异性地识别SEQ ID NO:1的氨基酸序列的HLA
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A2结合形式，更具体地，所述TCR识别由HLA
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A*02:01编码的分子呈递的SEQ ID NO:1的氨基酸序列。
[0015]在一些实施方案中，所述TCR包含：可变TCRα区和可变TCR β区，所述可变TCRα区包含具有SEQ ID NO:2的氨基酸序列的CDR1、具有SEQ ID NO:3的氨基酸序列的CDR2和具有SEQ ID NO:4的氨基酸序列的CDR3，所述可变TCR β区包含具有SEQ ID NO:5的氨基酸序列的CDR1、具有SEQ ID NO:6的氨基酸序列的CDR2和具有SEQ ID NO:7的氨基酸序列的CDR3；或所述TCR包含可变TCR α区和可变TCR β区，所述可变TCRα区包含具有SEQ ID NO:12的氨基酸序列的CDR1、具有SEQ ID NO:13的氨基酸序列的CDR2和具有SEQ ID NO:14的氨基酸序列的CDR3，所述可变TCRβ区包含具有SEQ ID NO:15的氨基酸序列的CDR1、具有SEQ ID NO:16的氨基酸序列的CDR2和具有SEQ ID NO:17的氨基酸序列的CDR3；或所述TCR包含可变TCRα区和可变TCR β区，所述可变TCR α区包含具有SEQ ID NO:22的氨基酸序列的CDR1、具有SEQ ID NO:23的氨基酸序列的CDR2和具有SEQ ID NO:24的氨基酸序列的CDR3，所述可变TCRβ区包含具有SEQ ID NO:25的氨基酸序列的CDR1、具有SEQ ID NO:26的氨基酸序列的CDR2和具有SEQ ID NO:27的氨基酸序列的CDR 3。
[0016]在特定的实施方案中，TCR包含：具有SEQ ID NO:8的氨基酸序列的可变TCR α区和具有SEQ ID NO:9的氨基酸序列的可变TCRβ区；或具有SEQ ID NO:18的氨基酸序列的可变TCR α区和具有SEQ ID NO:19的氨基酸序列的可变TCRβ区；或具有SEQ ID NO:28的氨基酸序列的可变TCRα区和具有SEQ I本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种对MAGE
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A4特异性的分离的T细胞受体(TCR)，其中所述TCR包含：a)可变TCR α区，其包含具有SEQ ID NO:2的氨基酸序列的CDR1、具有SEQ ID NO:3的氨基酸序列的CDR2和具有SEQ ID NO:4的氨基酸序列的CDR3，可变TCRβ区，其包含具有SEQ ID NO:5的氨基酸序列的CDR1、具有SEQ ID NO:6的氨基酸序列的CDR2和具有SEQ ID NO:7的氨基酸序列的CDR3；或b)可变TCRα区，其包含具有SEQ ID NO:12的氨基酸序列的CDR1、具有SEQ ID NO:13的氨基酸序列的CDR2和具有SEQ ID NO:14的氨基酸序列的CDR3，可变TCRβ区，其包含具有SEQ ID NO:15的氨基酸序列的CDR1、具有SEQ ID NO:16的氨基酸序列的CDR2和具有SEQ ID NO:17的氨基酸序列的CDR3；或c)可变TCR α区，其包含具有SEQ ID NO:22的氨基酸序列的CDR1、具有SEQ ID NO:23的氨基酸序列的CDR2和具有SEQ ID NO:24的氨基酸序列的CDR3，可变TCRβ区，其包含具有SEQ ID NO:25的氨基酸序列的CDR1、具有SEQ ID NO:26的氨基酸序列的CDR2和具有SEQ ID NO:27的氨基酸序列的CDR3。2.根据权利要求1所述的分离的TCR，其中所述TCR特异性地识别SEQ ID NO:1的氨基酸序列或其片段，优选地，其中所述TCR特异性地识别SEQ ID NO:1的氨基酸序列的HLA
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A2结合形式，更优选地，其中所述TCR特异性地识别由HLA
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A*02:01编码的分子呈递的SEQ ID NO:1的氨基酸序列。3.根据前述权利要求中任一项所述的分离的TCR，其中所述TCR包含：a)具有SEQ ID NO:8的氨基酸序列的可变TCR α区和具有SEQ ID NO:9的氨基酸序列的可变TCRβ区；或b)具有SEQ ID NO:18的氨基酸序列的可变TCR α区和具有SEQ ID NO:19的氨基酸序列的可变TCRβ区；或c)具有SEQ ID NO:28的氨基酸序列的可变TCR α区和具有SEQ ID NO:29的氨基酸序列的可变TCRβ区。4.根据前述权利要求中任一项所述的分离的TCR，其中所述TCR包含功能部分，所述功能部分包含SEQ ID NO:4、7、14、17、24和27的氨基酸序列中的至少一个。5.根据权利要求1至4中任一项所述的分离的TCR，其中所述TCR包含：a)具有SEQ ID NO:10的氨基酸序列的TCRα链和具有SEQ ID NO:11的氨基酸序列的TCRβ链；b)具有SEQ ID NO:20的氨基酸序列的TCR α链和具有SEQ ID NO:21的氨基酸序列的TCRβ链；或c)具有SEQ ID NO:30的氨基酸序列的TCR α链和具有SEQ ID NO:31的氨基酸序列的TCRβ链。6.根据权利要求1至4中任一项所述的分离的TCR，其中所述TCR包含：a)具有SEQ ID NO:87的氨基酸序列的TCR α链和具有SEQ ID NO:88的氨基酸序列的TCRβ链；b)具有SEQ ID NO:89的氨基酸序列的TCRα链和具有SEQ ID NO:90的氨基酸序列的TCRβ链；或c)具有SEQ ID NO:91的氨基酸序列的TCRα链和具有SEQ ID NO:92的氨基酸序列的TCR
β链。7.根据权利要求1至4中任一项所述的分离的TCR，其中所述TCR包含：a)具有SEQ ID NO:102的氨基酸序列的TCRα链和具有SEQ ID NO:103的氨基酸序列的TCRβ链；b)具有SEQ ID NO:108的氨基酸序列的TCRα链和具有SEQ ID NO:109的氨基酸序列的TCRβ链；或c)具有SEQ ID NO:114的氨基酸序列的TCRα链和具有SEQ ID NO:115的氨基酸序列的TCRβ链。8.根据权利要求1至7中任一项所述的分离的TCR或根据权利要求8所述的多价TCR复合物，其中通过结合由HLA
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A*02:01编码的分子呈递的SEQ ID NO:1的氨基酸序列来诱导IFN
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γ分泌。9.根据权利要求1至7中任一项所述的分离的TCR，其中，与结合至由HLA
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A*02:01编码的分子呈递的不相关肽相比，当结合至由HLA
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A*02:01编码的分子呈递的SEQ ID NO:1的氨基酸序列时，由效应细胞上表达的TCR与由HLA
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A*02:01编码的分子呈递的SEQ ID NO:1的氨基酸序列的结合所诱导的IFN
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γ分泌可以高100倍以上，优选地高500倍以上，更优选地高2000倍以上。10.一种多价TCR复合物，其包含至少两个权利要求1至7中任一项所述的TCR。11.一种包含TCR α链和TCRβ链的融合蛋白，其中所述融合蛋白包含SEQ ID NO:94、96、98、104、110和116中任一项所示的氨...

【专利技术属性】
技术研发人员：C，
申请(专利权)人：二七十生物有限公司，
类型：发明
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