一种通过干扰磷酸酶基因提高里氏木霉纤维素酶表达的方法技术

技术编号:32504559 阅读:28 留言:0更新日期:2022-03-02 10:14
本发明专利技术涉及基因工程领域,具体涉及一种通过干扰磷酸酶基因提高里氏木霉纤维素酶表达的方法。本发明专利技术对里氏木霉参与细胞内蛋白降解相关的磷酸酶基因ymr1进行了RNAi介导的基因沉默,此操作提高了里氏木霉的蛋白表达量和纤维素酶酶活。维素酶酶活。维素酶酶活。

【技术实现步骤摘要】
一种通过干扰磷酸酶基因提高里氏木霉纤维素酶表达的方法


[0001]本专利技术涉及基因工程领域,具体涉及一种通过干扰磷酸酶基因提高里氏木霉纤维素酶表达的方法。

技术介绍

[0002]丝状真菌里氏木霉作为重要的工业生产菌株,广泛用于工业产品如:饲料酶、有机酸类、抗生素等的生产。它具有表达量高、分泌能力强等特点,同时它具有多种同真核生物类似的翻译后加工的方式,如糖基化、蛋白酶的切割和二硫键的形成等修饰。其混合发酵液中,纤维二糖水解酶的表达占胞外总分泌蛋白的50%以上。然而,纤维素酶的高成本仍然是纤维素生物炼制的主要瓶颈之一,因此需要继续开发新的方法,以提高纤维素酶的表达,降低应用成本。
[0003]在里氏木霉中,纤维素酶的表达受多个调控途径的影响。其中,主要调控是发生在转录水平,包括主要激活因子、抑制因子等转录因子的协同调控。由于这些多种策略的组合使用,转录和翻译可以升级到更高的水平,但这可能会给蛋白质的分泌带来新的问题,一些无法及时折叠的蛋白,可能被引入内质网的ERAD途径降解,形成限制蛋白质表达的瓶颈。但理论上,ERAD途径和其它细胞过程本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种通过干扰磷酸酶基因提高里氏木霉纤维素酶表达的方法,其特征在于,所述方法包括向里氏木霉中导入调控基因ymr1的干扰序列的步骤,所述调控基因ymr1的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。2.根据权利要求1所述的通过干扰磷酸酶基因提高里氏木霉纤维素酶表达的方法,其特征在于,通过以下引物扩增得到所述调控基因ymr1的干扰序列:ymr1iF: 5

GACAATGACCAGCAGACCATCGAG3

,ym...

【专利技术属性】
技术研发人员:苏小运孙先花姚斌罗会颖王晓璐秦星王苑涂涛张杰柏映国于会民黄火清张红莲王亚茹
申请(专利权)人:中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
类型:发明
国别省市:

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