表达反式菊酸的联合表达载体及其在调控番茄VI型腺体腺毛合成反式菊酸中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种表达反式菊酸的联合表达载体及其构建方法和应用，所述联合表达载体是以植物表达载体为骨架，含有MCPI启动子驱动TcCDS基因的表达盒和MCPI启动子驱动融合基因ADH2/ALDH1的表达盒，所述TcCDS基因为编码菊氨酰二磷酸合酶的基因，所述融合基因ADH2/ALDH1是由编码醇脱氢酶2的基因TcADH2和编码醛脱氢酶1的基因TcALDH1通过DNA连接子组成的融合基因，所述MCPI启动子为腺毛特异金属羧肽酶抑制剂类启动子。本发明专利技术在番茄VI型腺毛中重建了反式菊酸生物合成途径，产生大量的反式菊酸，结果表明，番茄VI型腺毛是通过代谢工程生物合成反式菊酸的一个高效平台。物合成反式菊酸的一个高效平台。物合成反式菊酸的一个高效平台。

【技术实现步骤摘要】
表达反式菊酸的联合表达载体及其在调控番茄VI型腺体腺毛合成反式菊酸中的应用


[0001]本专利技术涉及植物分子生物学领域，具体涉及一种合成反式菊酸的联合表达载体、构建方法及其在调控番茄VI型腺体腺毛合成反式菊酸中的应用。

技术介绍

[0002]天然除虫菊酯是一种源自菊科植物除虫菊(Tanacetum cinerariifolium)的天然高效杀虫剂，具有广谱和强力的杀虫和驱虫作用，相较于化学合成的类似物，对哺乳动物毒性小，无环境危害，是生物农药的最优选择之一，具有广阔的应用前景。目前除虫菊酯的生产主要是从除虫菊植物中天然提取，然而除虫菊的种植深受海拔、土壤和气温的影响，全球每年的产量远远满足不了社会对天然除虫菊酯的需求。I型除虫菊酯是反式菊酸和三种来源于亚麻酸的rethrolone型醇形成的的酯。反式菊酸作为除虫菊酯的重要前体物质，一直以来只能被化学合成，但是这种方法成本高，来源受限并且大多对环境有害。
[0003]植物腺毛被称为代谢细胞工厂，有能力产生大量的特化代谢产物，如萜类化合物，并且已经被用作代谢工程的目标反应器，用于生产某些植本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种表达反式菊酸(trans
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Chrysanthemic acid)的联合表达载体，其特征在于：所述联合表达载体是以植物表达载体为骨架，含有MCPI启动子驱动TcCDS基因的表达盒和MCPI启动子驱动融合基因ADH2/ALDH1的表达盒，所述TcCDS基因为编码菊氨酰二磷酸合酶的基因，所述融合基因ADH2/ALDH1是由编码醇脱氢酶2的基因TcADH2和编码醛脱氢酶1的基因TcALDH1通过DNA连接子组成的融合基因，所述MCPI启动子为腺毛特异金属羧肽酶抑制剂类启动子。2.如权利要求1所述的表达反式菊酸的联合表达载体，其特征在于：所述基因TcCDS的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述基因TcADH2的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述基因TcALDH1的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，所述DNA连接子序列为5'GGCTCTGGTAGTAGTGGC 3'，所述MCPI启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示；所述植物表达载体为pPZP212，所述表达反式菊酸的联合表达载体的核苷酸序列如SEQ ID NO.20所示。3.一种联合表达载体工程菌，其特征在于：由权利要求1或2所述的表达反式菊酸的联合表达载体转入宿主制备而得。4.如权利要求3所述的联合表达载体工程菌，其特征在于：所述联合表达载体工程菌为农杆菌。5.如权利要求1或2所述的表达反式菊酸的联合表达载体的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：1)将MCPI启动子、Nos终止子和TcCDS基因片段组装到中间载体中，构建含有MCPI启动子驱动TcCDS基因的表达盒的中间载体，从中间载体扩增出完整的表达盒导入植物表达载体中得到双元转化载体；2)制备TcADH2和TcALDH1的融合基因ADH2/ALDH1，扩增融合基因ADH2/ALDH1、MCPI启动子和NOS终止子，构建到中间载体中，得到含有MCPI
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ADH2/ALDH1
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NO...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐海洋，王莹，陈静，文静，王楚，
申请(专利权)人：重庆大学，
类型：发明
国别省市：